赵清正
- 作品数：50 被引量：173H指数：9
- 供职机构：中国医学科学院肿瘤医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划卫生部科技专项基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 改造的人乳头瘤病毒16型E6/E7融合蛋白疫苗抗肺癌作用的实验研究
- 2004年
- 目的 研究经改造的HPV16E6/E7蛋白质疫苗 (HPV 16mE6Δ/mE7)对表达HPV16E6和E7的小鼠肺癌细胞的体内生长抑制作用 ,为肺癌免疫治疗提供新线索。方法 预防性实验 :对C5 7BL/6小鼠先进行免疫 ,然后接种表达HPV 16E6和E7癌蛋白的TC 1肿瘤细胞 ;第 3 3天 ,对未出瘤小鼠进行第二次大剂量肿瘤细胞攻击。治疗性实验 :C5 7BL/6小鼠先接种TC 1细胞 ,然后进行两次免疫治疗 ,再对未出瘤小鼠进行第二次大剂量TC 1细胞攻击实验。计算各组肿瘤发生率、肿瘤体积。采用MTT方法检测淋巴细胞增殖反应。结果 预防性实验 :在 10 0天的观察时间内 ,免疫组小鼠可以有效抵抗第一、二次肿瘤细胞攻击 ,所有小鼠均未见肿瘤发生 ;而PBS组及单纯佐剂组小鼠在第一次肿瘤细胞接种后 6～ 12天内均有肿瘤形成 ,3 0天内因肿瘤负荷出现衰竭。在治疗性实验中 ,免疫组、PBS组、单纯佐剂组小鼠成瘤率分别为 2 0 %、90 %、60 % ;第二次攻击实验中 ,免疫组仍有 87.5 %的小鼠无肿瘤生长 ,而其他两组动物在 4～ 6天内均有肿瘤形成。MTT实验表明经mE6Δ/mE7免疫的小鼠脾淋巴细胞增殖反应明显强于对照组。结论 经改造的HPV16型mE6Δ/mE7蛋白质疫苗对于实验动物肺癌有较好的抑制作用 。
- 周小山赵清正千新来许春雷陆元志
- 关键词：HPV16
- 腺病毒5型E1A基因对永生化人支气管上皮细胞生长的抑制作用及其机理被引量：4
- 2000年
- 腺病毒 5型早期区 1 A( Ad5E1 A)基因是新近发现的一个肿瘤抑制基因 .其产物 E1 A蛋白是多功能转录因子 ,它能从正、负 2个途径调控多种细胞基因的转录 ,具有降低体内致瘤性及抗转移等活性 .为了探讨 E1 A基因对代表肺癌癌前病变的永生化人支气管上皮细胞的生长是否具有抑制作用 ,构建了在真核细胞高表达 E1 A基因的重组质粒 p CEP4- E1 A.通过脂质体介导将 E1 A基因转入永生化人支气管上皮细胞第 1 68代 ( MP1 68)中 ,经潮霉素筛选 ,获得稳定表达 E1 A的永生化人支气管上皮细胞 ( MP1 68- E1 A) .结果表明 :E1 A基因的稳定表达抑制了 HER- 2 / neu基因的表达 .转染细胞 ( MP1 68- E1 A)回复扁平形态、恢复细胞生长的接触性抑制 ,细胞群体生长缓慢 (倍增时间是 MP1 68- vect细胞的 1 .41倍 ) ,细胞周期 G1期阻滞并出现凋亡 ,软琼脂集落形成抑制率达73.86% .结果说明 E1 A基因的稳定表达明显抑制了永生化人支气管上皮细胞的生长 .该作用可能与 E1 A抑制 HER- 2 / neu基因的表达及诱导永生化人支气管上皮细胞凋亡有关 .
- 千新来赵清正陈艳王争
- 关键词：E1A基因MP细胞生长基因预防
- c-erbB-2在舌鳞癌异常表达的临床意义的研究
- 目的: 探讨c-erbB-2在舌鳞状细胞癌表达的临床价值.
方法: 回顾性分析中国医学科学院肿瘤医院头颈外科1974年1月至1995年10月所有初治的活动部舌鳞状细胞癌76例.对常规HE染色检测证实有肿瘤及瘤旁...
- 张宗敏徐震纲赵清正唐平章李爱东
- 关键词：舌癌舌鳞状细胞癌C-ERBB-2基因局部复发
- 文献传递
- E1A基因对人肺腺癌细胞增殖和细胞周期的影响被引量：9
- 2001年
- 目的 探讨E1A基因对人肺腺癌细胞增殖的抑制作用与细胞周期的关系及作用机制。方法 利用细胞增殖曲线和裸小鼠体内致瘤性实验研究E1A基因对人肺腺癌细胞增殖的影响 ,采用流式细胞术分析人肺腺癌细胞周期 ,以蛋白印迹方法分析P16、P2 1、P5 3和cyclinB1水平变化。结果转染E1A基因后 ,人肺腺癌细胞 (Anip973 E1A)生长缓慢 ,体内致瘤性降低。Anip973 E1A细胞周期出现明显的S期抑制和G2 M阻滞 ,周期调控蛋白P16、P2 1、P5 3水平无明显变化 ,但cyclinB1表达明显下降。结论 E1A基因能显著抑制人肺腺癌细胞的体内外增殖 ,降低周期蛋白cyclinB1的表达 ,使细胞周期阻滞于G2 M 。
- 梁利波千新来马业伟王争刘玉英赵清正
- 关键词：E1A基因肺癌肺腺癌细胞增殖细胞周期
- 应用抑制性消减杂交技术分离E1A药敏相关基因被引量：3
- 2004年
- 背景与目的:大量研究已经证明,腺病毒5型E1A基因能抑制肿瘤的生长和转移,逆转其恶性表型,特别是能提高肿瘤细胞对多种化疗药物的敏感性,对射线也具有明显的增敏作用。但E1A基因通过哪些基因发挥作用还不知道。本研究利用抑制性消减杂交(suppressionsubtractivehybridization,SSH)技术在药物敏感的肿瘤细胞中分离差异表达的E1A药敏相关基因。方法:以E1A蛋白处理的人头颈淋巴结转移肿瘤细胞LN686为实验组,以亲本LN686细胞为对照组,提取mRNA,构建消减cDNA文库。随机挑取克隆,采用斑点杂交技术鉴定差异基因片段的表达水平,分析所获cDNA核苷酸序列,并在GenBank中进行比较,半定量RT-PCR鉴定实验组和对照组中新基因的mRNA水平。结果:文库包含约7000个阳性克隆,随机挑取384个克隆进行PCR鉴定,其中362个有插入片段,通过斑点杂交技术,证实这些基因在实验组中表达水平较对照组显著提高。将这362个克隆进行测序并经过BLAST分析,表明10个为新基因,已在GenBank中登录。对其中7个新基因进行半定量RT-PCR检测,证明经E1A蛋白处理的LN686细胞中,新基因的表达水平明显高于亲本LN686细胞,相差3～8倍。结论:应用抑制性消减杂交技术筛选到10个新基因片段,为进一步克隆其全长基因、研究其功能打下基础。
- 马业伟千新来赵清正周小山李艳春
- 关键词：肿瘤化学治疗耐药性抑制性消减杂交
- 人乳头瘤病毒治疗性疫苗研究进展被引量：2
- 2007年
- 人乳头瘤病毒(HPV)感染引起的疾病流行广泛,但现有治疗手段有限。尽管HPV预防性疫苗即将在世界范围内推广,但从中受益还需数十年时间,而且对于已感染HPV且出现病变的患者,预防性疫苗作用不大。HPV治疗性疫苗主要是针对已感染HPV的患者,其类型有病毒/细菌载体疫苗、肽疫苗、蛋白疫苗、DNA疫苗、细胞疫苗等。
- 刘波赵清正
- 关键词：人乳头瘤病毒疫苗
- E1A基因对人肺腺癌细胞增殖和转移的影响被引量：8
- 2000年
- 目的 探讨腺病毒 5型早期区 1A(Ad5E1A)基因对人肺腺癌细胞增殖和转移的影响 ,为人肺腺癌E1A基因治疗的可行性提供实验依据。方法 用本室构建的真核表达重组质粒pcDNA3 E1A ,通过脂质体介导将E1A基因转入人肺腺癌细胞系 (Anip 973) ,经G418筛选获得稳定表达E1A基因的转染细胞 (Anip 973 E1A)。通过体内、外实验 (生长速度、倍增时间、软琼脂集落形成、裸鼠致瘤性及转移能力等 ) ,观察E1A基因对人肺腺癌细胞增殖和转移的影响。结果 体外实验显示 ,Anip 973 E1A细胞生长速度减慢 ,倍增时间延长 ;软琼脂集落形成能力显著降低 ,亲本Anip 973、Anip 973 vect和Anip 973 E1A细胞集落形成率分别为 19.7%、17.2 %和 2 .3% ,集落形成抑制率为 86 .6 %。体内实验显示 ,Anip 973 E1A细胞组出瘤时间晚 ,肿瘤体积小 ,有 2只裸小鼠至实验结束未触及肿瘤 (2 /6 ) ,抑瘤率为 6 0 .1%。第 2 1天计数肺转移灶 ,亲本Anip 973、Anip 973 vect和Anip 973 E1A细胞组肺转移灶数目分别为 16 .1± 3.2、15 .4± 3.8和 7.3± 2 .3个 ,转移抑制率为 5 2 .6 %。结论 E1A基因能显著抑制人肺腺癌细胞的恶性表型 ,降低裸鼠致瘤性 ,减少肺转移灶形成 ,为人肺腺癌E1A基因治疗提供了实验依据。
- 千新来赵清正王争原志庆
- 关键词：肺腺癌细胞增殖肿瘤转移E1A基因基因治疗
- 胰岛素样生长因子受体与乳腺癌术后放疗后复发的相关性研究
- 目的:探讨胰岛素样生长因子-1受体（1GF-1R）过度表达与乳腺癌术后、放疗后复发的相关性。方法:回顾性研究25例乳腺癌术后、放射治疗后复发的病例（复发组）,同时设对照组50例。采用免疫组织化学的方法测定肿瘤组织的 IG...
- 吴君心郑天荣林祥松余子豪赵清正梁克
- 文献传递
- 腺病毒E1A基因高效真核表达载体的构建与鉴定被引量：6
- 1999年
- 目的构建真核高效表达该基因的载体，为进一步探讨运用高效表达Ｅ１Ａ的重组质粒进行肿瘤基因治疗及研究Ｅ１Ａ基因的作用机理和与其他基因的相互作用提供方法。方法运用分子克隆技术构建２套用较强启动子驱动的表达Ｅ１Ａ的真核重组质粒，并用多种限制性内切酶和ＤＮＡ测序对重组质粒进行鉴定。结果构建的重组质粒分别含有１．３４ｋｂ和１．７７ｋｂＥ１Ａ片段，分别命名为ｐＥ１Ａ１和ｐＥ１Ａ２，且插入的方向均为正向，无重排等异常现象，核苷酸序列无误。结论为人腺病毒５型（Ａｄ５）Ｅ１Ａ基因实验性抗肿瘤基因治疗包括放射增敏研究提供方法学及资料。
- 石宇赵清正陈艳
- 关键词：质粒肿瘤抑制基因基因治疗
- p16基因转染对CNE-2细胞放射敏感性的研究被引量：9
- 1999年
- 目的 探讨外源性p16 基因转染人鼻咽癌细胞系CNE2 后对其放射敏感性的影响。方法 通过脂质体介导的基因转染方法将野生型p16 基因、空载体分别转入该基因突变的CNE2 细胞中,同时设置不加任何质粒的CNE2 细胞作为对照。3 组细胞在相同的实验条件下,分别接受0 ,2,4 ,6,8,10 Gy 照射,经培养后计算细胞贴壁率再换算成存活率,按照多击单靶模型进行数学拟合,获存活曲线,求出D0 值等参数;利用流式细胞仪(FCM)检测细胞增殖周期的分布情况;利用Hoechst33342 及TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果 p16 基因的导入使D0 ,Dq 值明显下降;CNE2 细胞阻滞在G1 期,S期细胞明显减少,凋亡明显增加。结论 外源性p16 基因导入CNE2 细胞可引起放射敏感性增加,同时伴有G1
- 罗京伟梁克徐国镇赵清正殷蔚伯高黎
- 关键词：P16基因鼻咽肿瘤基因转染
