辛渝
- 作品数:7 被引量:21H指数:3
- 供职机构:四川大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家科技型中小企业技术创新基金更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 产朊圆酵母尿酸酶的分离纯化及其部分性质研究被引量:1
- 2005年
- 产朊圆酵母Y0401经尿酸诱导培养,菌体采用超声波处理,依次经过DEAE-Sepharose离子交换层析、Phenyl Sepharose CL-4B疏水层析和Xanthine-agarose亲和层析,尿酸酶比活力达到18U/mg,纯化倍数为409倍,回收率为19.2%.纯化后的酶经还原、非还原SDS-PAGE分析为单一蛋白染色带,HPLC显示纯度为98%以上.用HPLC和Superdex 200分子筛层析两种方法测得该酶的相对分子质量为127kDa,在还原条件下进行SDS-PAGE,测得表观分子质量为33kDa,综上结果推测该酶是由分子量相同的4个亚基组成的四聚体蛋白.等电聚焦显示其等电点在6.8~7.5之间.该酶具有较强的酸碱稳定性和热稳定性.最适pH为8.5,最适温度为40.0℃.在最适pH和温度条件下测得该酶Km值为3.34×10-5 mol/L.对某些金属离子和有机物对酶活性的影响也进行了研究.
- 辛渝潭晓晶杨波卢戌余彩霞许晓燕孟延发
- 关键词:尿酸酶
- Debaryomyces sp.甘油激酶的分离纯化及基本性质研究
- 从已有的19株菌种中筛选获得产甘油激酶/(GK,E.C 2.7.1.30/)酵母菌,对该菌种进行诱导及发酵条件的优化,通过甘油诱导培养后其菌体产量提高了50%,产酶活力提高20%。确定其最适培养基为/(%/):葡萄糖0....
- 辛渝
- 关键词:发酵酵母酵母分离纯化
- 文献传递
- 酵母菌产甘油激酶的发酵条件优化被引量:1
- 2006年
- 筛选得到产甘油激酶(GK,EC2.7.1.30)德巴利酵母菌,对其发酵条件进行了优化,确定其最适培养基配方为葡萄糖0.1%,KCl0.18%,酵母膏0.3%,柠檬酸0.6%,甘油0.5%。最适培养条件为接种量6%,装液量为120mL/250mL,160r/min、31℃培养25h。在最适培养基及最适条件下,甘油激酶的酶活力可达1.19U/mg。
- 许晓燕谭晓晶余彩霞辛渝孟延发
- 关键词:酵母发酵
- 胆固醇氧化酶的发酵条件及酶学性质研究被引量:3
- 2006年
- Brevibacterium sp.可以发酵生产胆固醇氧化酶,实验中对该菌种进行了底物诱导及发酵条件的优化, 确定其最适培养基为(%):蔗糖0.3,酵母膏0.2,蛋白胨0.3,牛内膏0.3,K_2PO_4 0.1,MgSO_4 0.05,pH6.8。最适培养条件为:接种量5%,24℃培养20h,通气量为50mL 培养基/250mL 三角瓶,200r/min。在最适培养基及最适条件下,胆固醇氧化酶的酶活力可达到24.01U/mg,比未优化前1.71U/mg 提高了14倍。该酶具有较强的酸碱稳定性和热稳定性,最适 pH 为6.5,最适温度为54℃。在最适 pH 和温度条件下测得该酶 km 值为7.1 ×10^(-5)mol/L。
- 许晓燕张锐谭晓晶余彩霞辛渝杨波孟延发
- 关键词:BREVIBACTERIUM发酵正交实验
- 产朊圆酵母尿酸酶形成条件研究
- 2005年
- 择到一株产尿酸酶较高水平的产朊圆酵母(Torula utilisHenneb).对此菌株尿酸酶形成条件的研究表明:蔗糖、葡萄糖是酶形成的适合碳源;蛋白胨和酵母膏是产酶的适合氮源,另添加无机氮源对产酶略有帮助作用;尿酸、黄嘌呤和鸟嘌呤对酶形成起诱导作用,底物尿酸是适宜的诱导物.尿酸酶形成最适培养基组成为(%):蔗糖3,蛋白胨2,酵母膏0.5,(NH4)2SO40.05,尿酸0.05,KCl 0.04,Pb2+、Fe3+、Hg2+、Mg2+、Ag+、Ca2+、Zn2+不利于产酶.另对培养条件做了优化探索:最适pH为6.0,在250mL三角瓶中装30mL培养液,接种量10%,在200r/min的旋转摇床上28℃振荡培养23h.
- 杨波余彩霞辛渝许晓燕谭晓晶卢戌喻堃武翠玲孟延发
- 关键词:尿酸酶发酵
- 朊圆酵母尿酸酶的基本特性研究被引量:6
- 2006年
- 研究了尿酸酶分离纯化条件和pH、温度、底物浓度、一些有机和无机试剂对尿酸酶酶促反应速度的影响.研究结果表明,用Triton X-100及巯基乙醇处理细胞悬液(pH8.5),再用超声波处理破碎细胞效果最佳.硫酸铵沉淀尿酸酶的最佳浓度为75%.用Phenyl-Sepharose CL-4B疏水层析和Xamhine-agarose亲和层析两步纯化步骤可获得理想纯度的酶制剂.在一定的条件下,尿酸酶的最适pH和酸破稳定pH范围分别为8.5和5.0~12.最适温度为37℃;热稳定性较好,在50℃处理30min时活性保持90%,在60℃处理30min时活性仍保持80%.在最适条件下,该酶催化尿酸的米氏常数(Km)为3.34×10^-5mol/L.一些金属离子和有机化合物对酶活性的影响也进行了研究.
- 孟尧辛渝谭晓晶许晓燕余彩霞杨波孟延发
- 关键词:尿酸酶动力学特性
- 红毛五加多糖的分离纯化和表观分子质量测定被引量:9
- 2005年
- 红毛五加经热水浸提,用Sevag法脱蛋白,经DEAE cellulose32离子交换层析和SephacrylS 200HR凝胶层析纯化得到3个主要多糖组分:AHP I、AHP II、AHP Ⅲ.经HPLC和SephacrylS 300HR凝胶层析鉴定,3种多糖均为均一组分.HPLC测定AHP I、AHP II、AHP Ⅲ的表观分子质量分别为:7.0kD、59.5kD和12.9kD,SephacrylS 300HR凝胶层析进行验证,得到相似结果.
- 陈永卢戌谭晓晶孟尧辛渝许晓燕杨波李强于彩霞孟延发
- 关键词:红毛五加多糖分离纯化