邱小忠 作品数:113 被引量:284 H指数:9 供职机构: 南方医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省科技计划工业攻关项目 广州市科技攻关项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 化学工程 理学 更多>>
五羟色胺-N-乙酰转移酶基因真核表达载体的构建表达及活性检测 被引量:1 2006年 目的构建pTARGETTM-AANAT真核表达载体并转化L6成肌细胞,检测目的基因的表达并初步探讨AANAT转基因细胞的生物活性。方法提取大鼠松果体组织mRNA,RT-PCR技术扩增五羟色胺-N-乙酰转移酶基因(AANAT)cDNA,酶切连接pTARGETTM载体,脂质体法导入L6成肌细胞。倒置显微镜观察转化细胞体外存活、RT-PCR及Western blotting技术检测pTARGETTM-AANAT的基因表达产物及转化细胞的功能表达。结果酶切分析、DNA测序及凝胶电泳检测结果证实,pTARGETTM-AANAT真核表达载体构建成功。RT-PCR及Western blotting检测表明,转化后的L6细胞表达AANAT mRNA,细胞具备AANAT蛋白的表达能力。结论成功构建pTARGETTM-AANAT的真核表达载体,转化的L6细胞株能表达AANAT蛋白活性。 廖华 曹永英 徐达传 邱小忠 余磊关键词:RT-PCR MC3T3-HA复合培养后的细胞凋亡检测 2007年 目的:探讨羟基磷灰石(Hydroxyapatite,HA)压片材料对小鼠MC3T3成骨细胞凋亡的影响,提供一种方便可行的组压片材料的生物相容性检测方法。方法:小鼠MC3T3成骨细胞株接种在HA压片材料上,应用光学显微镜和PI-Hoechst33342双染色荧光显微镜观察细胞,采用RT-PCR方法分析HA对Id2(Inhibitor of differentiation 2,分化抑制因子2)和OPN(osteopontin,骨桥蛋白)等基因表达的影响。结果:HA压片材料组MC3T3细胞凋亡率(78.7%)显著高于正常对照组(24.6%)(t’=28.1,P=0.000)。HA压片材料双荧光染色可以直接检测种子细胞的凋亡。结论:HA压片可促进小鼠MC3T3成骨细胞凋亡。 宋辰刚 邱小忠 吴刚 余磊 赖桂华 欧阳钧关键词:羟基磷灰石 凋亡 一种利用金黄色葡萄球菌生物合成具有生物相容性纳米金的方法 本发明公开了一种利用金黄色葡萄球菌生物合成纳米金的方法,该方法为将金黄色葡萄球菌液与氯金酸混匀,使混合液反应4~6h;将反应液离心,收集上清继续反应0.5~48h;再将反应液离心,收集沉淀即得纳米金。本发明生物合成的纳米... 邱小忠 华文熙 王乐禹文献传递 miRs在力学拉伸促进成肌细胞增殖过程中的作用 2014年 目的探讨3种miRs在力学拉伸促进C2C12成肌细胞增殖过程中的作用。方法周期性拉伸的各种力学条件通过BioFlex加载系统实现。采用CCK-8检测不同拉伸频率对成肌细胞增殖的影响。对促增殖拉伸组和对照组进行高通量测序,反转录定量PCR(qRT-PCR)验证高通量基因测序结果,并进行生物信息学分析。结果 0.125 Hz拉伸组明显促进C2C12成肌细胞增殖(P<0.05),而0.25Hz和0.5 Hz相比于对照组的差异无统计学意义;高通量测序分析表明,11种miRs表达于对照组和0.125Hz拉伸组,其中差异有统计学意义的为3种:mir-44,mir-36,mir-20;qRT-PCR证实这3种miRs的表达改变与测序结果一致;这3种miRs参与了多个信号通路的调控。结论高通量基因测序和生物信息学分析表明3种miRs在应力诱导的C2C12成肌细胞增殖过程中有重要作用。 张马辉 王永魁 蒋兴禄 余磊 欧阳钧 邱小忠 王乐禹关键词:MIRS 细胞增殖 高通量测序 一种三维血管网络水凝胶的构建方法 本发明实施例提供的三维血管网络水凝胶的构建方法,先将血管填充剂灌注到离体器官的血管中,待血管填充剂硬化后,剥离所述离体器官组织,得到所述离体器官的三维血管模型,再将三维血管模型放入模具中,向所述模具中倒入水凝胶预聚物低温... 邱小忠 李创坤 王乐禹文献传递 外泌体在肾病诊疗中的作用 2016年 随着靶向治疗技术的发展,外泌体逐渐成为疾病诊疗的重要靶点。多种细胞均可释放外泌体,它们是具有运载物质和传输信号功能的膜性囊泡,是几乎所有细胞胞间的交流媒介。外泌体广泛存在于血液、尿液等体液中,与肾脏的生理病理等方面关系密切。本综述旨在总结外泌体在肾病诊断和治疗的作用和进展,并提出将来外泌体研究、应用和发展的前景。 张晓滢 邱小忠关键词:外泌体 肾病 IL-1β激活后的许旺细胞与人发角蛋白三维培养构建人工神经桥接体 2006年 目的探索白细胞介素-1β(IL-1β)激活后的许旺细胞与人发角蛋白复合培养构建人工神经桥接体,修复神经缺损。方法体外培养纯化的许旺细胞经IL-1#激活前、后与细胞外基质凝胶修饰的人发角蛋白进行三维方向的共培养而构建成人工神经桥接体,移植入SD大鼠坐骨神经缺损处。S-100蛋白免疫组化染色鉴定许旺细胞,倒置显微镜和扫描电镜下观察许旺细胞与人发角蛋白共培养情况,原位杂交法观察人发角蛋白降解及神经生长因子(NGF)在坐骨神经内的表达,移植术4周后检测坐骨神经功能指数。结果经IL-1$激活后的许旺细胞能更好地黏附于人发角蛋白表面,进行分裂、增殖。3~4周,桥接体内的人发角蛋白开始降解,其周围可见IL-1%激活后的处于增殖分裂期的许旺细胞NGF表达强阳性,坐骨神经功能恢复时间提前。结论经IL-1&激活后的许旺细胞与细胞外基质凝胶修饰的人发角蛋白复合培养构建成人工神经桥接体,具有修复神经缺损的同时还能够加速坐骨神经损伤后功能的恢复。 杨俊 邱小忠 余磊 朴英杰 秦建强关键词:白介素-1Β 许旺细胞 人发角蛋白 周围神经 一种胃修复用贻贝来源生物粘合剂及其制备方法 本发明公开了一种胃修复用贻贝来源生物粘合剂及其制备方法。本发明技术取材于盛产于我国东南沿海的厚壳贻贝或翡翠贻贝,并首创性地将厚度不超过4mm的闭壳肌及其韧带与壳作为提取的对象,提取得到生物粘合剂。本发明的技术平均可以从每... 邱小忠 邢孟秋 宋小萍安定导致小鼠大脑的线粒体氧应激损伤 被引量:2 2001年 目的 探讨安定对大脑神经元产生毒副作用的分子机制。方法以10 mg/kg·b.W安定给小鼠进行腹腔注射,连续 3d后,取相同质量的大脑进行线粒体蛋白的分离,进行有关MnSOD和细胞色素氧化酶IV活性以及线粒体DNA断裂 程度等指标的测定。结果(1)安定导致小鼠大脑的线粒体蛋白含量降低,线粒体蛋白含量从(3.307±0.240)mg/ml下降到 (2.746±0.451)mg/ml(t=2.690,0.01<P<0.05);(2)安定引起神经元线粒体的MnSOD活性从(75.46±6.63)U/mg下降到 (55.30±3.83)U/mg(t=6.448, P<0.01);(3)安定对细胞色素氧化酶具有显著的损伤作用,550nm处细胞色素吸收值从 (0.112±0.008)下降到 0.069±0.008(t=8.782, P<0.01);(4)安定能导致小鼠大脑的线粒体DNA大量断裂。在碱裂解过程 中,0°C条件下,DNA双链的百分比从(92.95±2.82)%下降到(79.53±2.33)%(t=8.466,P<0.01);在 15℃作用1h,DNA双 链的百分比从(77.45±3.49)%下降到(43.15±6.1)%(t=13. 邱小忠 陈瑗 周玫 张稳柱关键词:线粒体 氧应激 药物不良反应 小鼠 DNA损伤 大鼠海马发育过程中突触蛋白-Ⅰ和生长相关蛋白-43mRNA的表达 2006年 目的:探讨大鼠海马突触蛋白和生长相关蛋白-43 mRNA的表达,了解神经元的发育。方法:采用RT-PCR方法检测大鼠发育不同阶段突触蛋白和生长相关蛋白-43 mRNA量的变化。结果:RT-PCR产物电泳后在731 bp、984 bp、324 bp处出现清晰的电泳条带,实际扩增长度与设计长度相吻合,未出现与DNA相同的杂带。内参照β-actin的PCR产物电泳条带在孕期、新生和成年时亮度均一。突触蛋白的PCR产物电泳条带以成年大鼠表达最强,胎鼠次之,新生大鼠较弱。生长相关蛋白-43的PCR产物电泳条带以新生鼠亮度最强,胎鼠次之,成年大鼠最暗。结论:大鼠海马在新生期处在轴突生长旺盛的时期,而在胚胎期和成年期是突触形成和建立的主要阶段。 辛莉 郭国庆 沈伟哉 邱小忠 余磊 欧阳钧 秦建强 钟世镇关键词:海马 生长相关蛋白-43 发育