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郑洪刚: 作品数：12 被引量：124H指数：3; 供职机构：中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划联合国开发计划署基金更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学核科学技术更多>>

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天花粉蛋白基因的克隆及序列分析被引量：18: 1994年; 本文应用ＤＮＡ多聚酶链式反应（ＰＣＲ）技术，从栝楼基因组ＤＮＡ中扩增并克隆了天花粉蛋白（ＴＣＳ）基因。核酸序列分析结果表明，克隆片段包括ＴＣＳ的前原蛋白的编码序列和５＇一侧翼区段。其编码序列与已发表的不同来源的３种ＴＣＳ基因的核苷酸序列的同源性分别为９９．２０％，９８．７４％和９８．６４％。推导出的氨基酸序列与已发表的４种ＴＣＳ的氨基酸序列的同源性分别为９８．６２％、９８．６２％、９７．４１％和９８．３８％。另外还发现，我们克隆的ＴＣＳ基因的５＇一侧翼区段比已发表的ＴＣＳ基因的相应区段多一个类似于ＴＡＴＡ盒的序列。我们进一步构建了该基因的一系列突变体，为深入研究ＴＣＳ基因结构、表达和调节机制以及ＴＣＳ的结构和功能关系奠定了重要的基础。; 郑洪刚王斌邵鹏柱杨显荣; 关键词：天花粉蛋白核糖体失活蛋白

水稻的AFLP研究初报——反应条件的优化及对温敏核不育等位突变系的分析(英文)被引量：38: 1999年; 通过对５４６０Ｓ和５４６０Ｆ这一对水稻等位突变系的ＡＦＬＰ分析，比较了ＡＦＬＰ与ＲＡＰＤ及ＲＦＬＰ检测ＤＮＡ多态性的相对效率。结果表明，这３种分子标记的ＤＮＡ多态性检出效率依次为ＡＦＬＰ＞ＲＡＰＤ＞ＲＦＬＰ；找出了水稻ＡＦＬＰ分析的最适反应条件；在这对等位突变系之间找到了一些多态性ＡＦＬＰ产物，已完成了对４个多态性ＡＦＬＰ产物的克隆，其中３个为单拷贝顺序；用这３个单拷贝克隆的混合物为探针，对作者自己构建的５４６０Ｓ水稻的ＢＡＣ库进行了筛选，获得了１２个阳性克隆，为今后ＢＡＣ库的筛选打下了基础。此外，对上述３种分子标记各自的优缺点及它们在ＤＮＡ多态性检测中的适用之处进行了分析探讨。; 王斌李传友李传友伏健民郑洪刚HenryT.NGUYEN; 关键词：AFLP 水稻分子标记温敏核不育

恶性疟原虫特异的基因克隆被引量：2: 1990年; 本文用鸟枪法将恶性疟原虫基因组 DNA 片段克隆至载体 pBR_(322)质粒中,利用抗性遗传标志和琼脂糖凝胶电泳筛选重组克隆,克隆 pBF_8,pBF_(13),pBF_(23),pBF_(24)用 HindⅢ酶解后,均显示单一插入片段,分子大小分别为1.8,2.3,0.94和6.0kb。经 Southern Blot 和 Dot Blot 分析表明,克隆 pBF_(13)对恶性疟原虫基因组 DNA 特异,与人 DNA 无交叉性杂交,可用作诊断用探针。; 刘克义黄炳成郑洪刚王斌; 关键词：疟原虫基因克隆

Ⅱ类内含子的研究进展被引量：1: 1993年; 自1977年以来,发现绝大多数真核生物的基因都是不连续的,即在编码序列中间有一个或数个间插序列(intervening sequence,IVS),前者被称为外显子(exon),后者被称为内含子(intron)。在DNA转录时,外显子和内含子的全部序列都被转录,形成前体mRNA。然后经过转录后加工,引入5′端帽子结构,3′端加上一段多聚腺苷酸。再经过剪接,去除不翻译的间插序列,把翻译部分连成一条链,形成成熟的mRNA。而原核生物的基因转录成mRNA,随即翻译成蛋白质,基因是连续的,在转录和翻译的过程中不需要剪接。; 郑洪刚; 关键词：内含子遗传学

粪产碱菌(Alcaligenes faecalix)基因文库的构建和nifH基因同源顺序的克隆被引量：1: 1992年; 采用λ噬菌体置换型载体EMBL4,构建了Alcaligenes faecalis A-15 H1菌株总DNA的基因文库。用Sau3AⅠ限制酶完成部分酶切,取13—20kb大小的片段进行克隆。载体DNA经BamHⅠ和SaiⅠ完全双酶切,左右臂“退火”形成左右臂载体分子后再与外源片段连接。左右臂载体分子与外源片段按照1:1的分子比进行体外连接。用E.coli BHB2688和E.coli BHB2690制备的包装抽提物进行体外包装,所得基因文库效价测定为1.2×10~6 pfu,远远超过理论上所需的库容量。以nif H基因作为探针,经3轮噬菌斑原位杂交,从基因文库中筛选出含有其同源顺序的克隆,并得到了梯度点杂交的验证。对所得重组噬菌体克隆之一进行Southern转移杂交,结果证实,其3.5kb的EcoRⅠ酶切片段为nif H阳性杂交条带。将其克隆到质粒pUC19 DNA上后,转入受体菌JM101中。再次经Southern转移杂交,证明所得重组质粒克隆(pAFH)含有粪产碱菌中的与nifH基因有同源顺序的片段。; 海伟力郑洪刚尤崇杓王斌; 关键词：粪产碱菌基因文库 H基因

光敏核不育水稻等位突变系的AFLP分析被引量：65: 2000年; 通过对NK58S和NK58F这一对光敏核不育水稻等位突变系的AFLP分析,比较了AFLP,RAPD及RFLP检测DNA多态性的相对效率。结果表明,这三种分子标记的DNA多态性检出效率依次为AFLP>RAPD>RFLP;找出了水稻AFLP分析的最适反应条件;通过AFLP和集群混合分析(Bulkedsegregatinganalysis,BSA),筛选出了一批与水稻光敏核不育(PGMS)基因连锁的多态性AFLP产物,已完成了对4个多态性AFLP产物的克隆,Southern杂交证明其中2个为单拷贝顺序,另外2个为低拷贝顺序。对上述三种分子标记各自的优缺点及它们在DNA多态性检测中的适用之处进行了分析探讨。; 李传友郑洪刚翁曼丽贾建航牟同敏HenryT.Nguyen王斌; 关键词：AFLP 水稻

苜蓿核基因组文库的构建及其实验方法的几点改进: 1992年; 目前,基因文库的构建方法虽已逐步普及,但仍有不少实验因最终未能从构建的文库中钓出目的基因而告失败。其主要原因是构建的文库没有达到预期的要求——真实有效.我们对核 DNA 分离和载体左右臂制备等的常用方法进行了改进,构建了苜蓿的核基因组文库,其容量测定、重组子鉴定及初步的杂交筛选都证明该文库真实有效。苜蓿(Medicago sativa L.)DNA 的制备参照 Shure 等(1983)和 Ausubel; 关常辉郑洪刚王斌荆玉祥; 关键词：苜蓿基因组文库

恶性疟原虫染色体基因文库的构建被引量：2: 1993年; 恶性疟原虫FCC1/HN株DNA经Bam HI部分消化后,取17-22kb片段插入到载体EMBL_4DNA左右臂之间,经体外包装后,感染P_2溶源菌E.coli L_(95),建成基因文库,使原虫基因组中的每一段DNA序列均有99％的几率克隆到文库中。通过原位杂交,筛出了含有重复序列的特异克隆,证明该库稳定而有效。; 刘克义郑洪刚黄炳成王斌程义亮; 关键词：疟原虫疟疾染色体基因文库

栽培花生徐州68-4核基因文库的构建: 1990年; 以 EMBL₄噬菌体多聚克隆载体将栽培花生徐州68-4的核 DNA13～20kb 片段进行了克隆,共得到重组噬菌体总数分别为5.6×10⁵,8.4×10⁵和1.3×10⁶的3个基因组基因文库。; 梁涛郑洪刚董金铎王斌姜国勇; 关键词：花生基因文库