郭妍
- 作品数：7 被引量：29H指数：3
- 供职机构：中国科学院深圳先进技术研究院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 猪小肠黏膜脱氧核糖核酸的提取及质量研究被引量：4
- 2013年
- 目的以肠衣生产的副产物肠黏膜为原料,进行大分子DNA的提取,并进行质量研究。方法用酶解-超滤法提取DNA,工艺过程中监控主要组分的分离及终产品质量。结果酶解法释放基因组DNA、肝素,蛋白质被水解为寡肽及氨基酸,DNA被超滤截留,钙盐沉淀法去除大分子肝素。终产品在含量及纯度上达到国外同类产品水平。结论从肠黏膜提取DNA切实可行,对猪小肠综合利用有着重要的现实意义。
- 惠长野邵建华郭妍张文
- 关键词：肠黏膜脱氧核糖核酸
- 猿病毒40大T抗原基因(SV_(40)Tag)肝细胞移植治疗手术介导的急性肝衰竭的实验研究被引量：2
- 2002年
- 目的：研究带猿病毒 40大T抗原 (SV4 0 Tag)基因肝细胞移植对手术介导的ALF(Acuteliverfailure)大鼠肝功能及生存率的影响。方法 :雄性Wistar大鼠切除肝脏 90 % ,然后在脾实质内移植普通肝细胞和SV4 0 Tag(Simianvirus 40largeTantigengene)肝细胞 ,观察其肝功能指标及生存率情况。结果 :普通肝细胞移植和SV4 0 Tag细胞移植组肝功能指标及生存率均好于ALF组 ,而SV4 0 Tag肝细胞移植组生存率又高于普通肝细胞移植组。结论 :SV4 0 Tag肝细胞移植及普通肝细胞移植均可改善ALF大鼠的肝功能指标及生存率 ,而SV4 0Tag组长期生存率高于普通肝细胞移植组。
- 周少波张阳德范立侨陈伟刘勤郭妍
- 关键词：肝细胞急性肝功能衰竭
- 纯化标签不同融合端的选择对蝎毒肽色谱行为的影响
- 2012年
- 目的考察组氨酸标签置于抗癫痫肽AEP肽链不同末端对重组肽亲合层析的影响。方法同源建模构建AEP三维结构,预测空间构象对纯化标签的屏蔽效应;构建组氨酸标签不同末端融合表达载体;对比两者相同色谱条件下的层析行为及生物活性。结果 AEP构象分析显示,肽链C末端空间屏蔽效应小;在两者表达量相当的前提下,经亲和层析纯化,每升发酵液可获色谱纯样品,AEP-His6为3.3mg,Met-Gly-His6-AEP为0.8mg;HistagC端融合对rAEP活性影响较N端融合小。结论对于蝎毒这类空间结构简单的小分子活性肽,组氨酸标签融合端的选择对重组肽色谱行为及活性有显著影响。
- 惠长野邵建华郭妍张希杨学琴王佃鹏
- 关键词：蝎毒素分子构象色谱行为生物活性
- 用白蛋白纳米粒做基因载体的体外研究被引量：16
- 2004年
- 目的 评价白蛋白纳米粒做为p5 3基因载体的可行性。方法 应用复凝聚法制备白蛋白纳米粒 ,连接上 p5 3基因 ,制备成 p5 3 白蛋白纳米粒。将p5 3 白蛋白纳米粒 ,同剂量的 p5 3 脂质体微粒阳性对照组与裸DNA的阴性对照组分别转染至培养的HepG2细胞中 ,用逆转录 多聚合酶链反应 (RT PCR)及Westernblot测 p5 3的表达。 结果 (1)白蛋白纳米粒呈均匀分散的球形颗粒 ,平均粒径为 98nm。 (2 )白蛋白纳米粒能有效结合 p5 3基因。 (3 )白蛋白纳米粒能将p5 3基因高效地呈递到HepG2细胞中并表达 ,作用优于阳性对照组 ,而阴性对照组无表达。结论 制备了粒径较小的白蛋白纳米粒 ,能有效连接上 p5 3基因片段 ,并能转染HepG2细胞。
- 张阳德郭妍刘蔚东潘一峰翟登高赵劲风
- 关键词：白蛋白纳米粒基因载体体外研究P53基因基因治疗
- 多表位HBV DNA疫苗的中试制备及质量研究被引量：1
- 2009年
- 目的建立多表位HBVDNA疫苗(PVAX-HS)的中试制备及质量控制方法。方法采用分批补料发酵方式,碱裂解结合超滤浓缩,三步柱层析制备DNA疫苗,并对终产品进行全面质量控制。结果分批补料发酵获得生物量50～60g/L,质粒最终产量约为1.0mg/g菌体,符合药用DNA疫苗质量标准。结论建立了质量稳定的PVAX-HS中试制备工艺,符合规模化生产要求。
- 郭妍惠长野
- 肠上皮细胞中大肠杆菌侵袭素IbeA结合蛋白的分离被引量：1
- 2009年
- 目的分离肠上皮Caco-2细胞中与IbeA相互作用的蛋白。方法表达并纯化重组IbeA,将1、5、10μg/ml的His-IbeA及牛血清白蛋白与Caco-2单层细胞4℃孵育30min后,在37℃利用庆大霉素保护实验测定各组大肠杆菌K1致病株E44侵袭率的变化。裂解Caco-2得全细胞蛋白,上样至结合有His-IbeA的金属离子螯和柱,His pull down纯化特异性结合蛋白,电泳分析,Far-Western blotting进行两者结合特异性的验证,并分析结合蛋白N末端氨基酸序列。结果重组IbeA阻断E44侵袭Caco-2,并呈一定剂量依赖关系,对照组BSA对侵袭没有显著影响。His pull down的方法纯化出两个结合条带,Far-Western blotting验证了结合的特异性。并测定强结合条带pI约5.0,N端序列为MASITKLP。结论分离得到两个与IbeA相互作用的蛋白,为研究IbeA分子致病机制奠定了基础。
- 惠长野郭妍李珺郝小燕曹虹黄胜和
- 关键词：CACO-2细胞结合蛋白纯化
- 大肠杆菌K1致病株外膜蛋白T体外功能被引量：8
- 2010年
- 纤溶酶原激活及水解抗菌肽利于致病菌侵袭及体内存活。【目的】构建大肠杆菌K1致病株E44的ompT基因缺失突变株,证实E44外膜蛋白T(OmpT)体外激活纤溶酶原及水解抗菌肽鱼精蛋白的活性。【方法】采用基因同源重组技术敲除大肠杆菌K1株E44中的ompT基因,构建ompT缺失突变株;二步柱层析纯化E44外膜组分,S-2251发色底物法测定其纤溶酶原激活活性;考察野生株E44、ompT基因敲除株E44ompT及转化带有ompT完整阅读框的质粒pUCT的E44ompT/pUCT三者对0.1mg/mL阳离子抗菌肽鱼精蛋白的敏感程度。【结果】利用自杀性载体pCVD442和同源重组的原理构建E44的ompT基因敲除株E44ompT;纯化得到约37kDa的E44外膜组分,S-2251发色底物法证实其具有纤溶酶原激活活性,纤溶酶原激活与膜组分的加入量呈一定量效关系;与野生株E44相比,ompT敲除株E44ompT对0.1mg/mL鱼精蛋白敏感,转化入带有ompT完整序列的质粒pUCT有一定的回补作用,E44ompT部分恢复抗鱼精蛋白能力。【结论】外膜蛋白T在致病株E44中有表达,并具有激活纤溶酶原及水解鱼精蛋白的活性。
- 惠长野郭妍吴书驰彭亮曹虹黄胜和
- 关键词：纤溶酶原鱼精蛋白
