马丽萍
- 作品数:5 被引量:25H指数:2
- 供职机构:中国农业科学院作物科学研究所更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 一种快速、高效的大豆农杆菌转化技术被引量:15
- 2008年
- 【目的】拟通过改进大豆外植体的组织培养、农杆菌侵染以及植株再生等关键性环节,构建快速、高效的大豆转基因技术体系,解决外源基因难以导入大豆的难题。【方法】成熟大豆种子在环境温度25~28℃、含有1mg·L-16-苄氨基嘌呤的MSB5培养基上催芽24h。保留大豆下胚轴、胚尖及1片子叶作为外植体,并在相同条件下预培养24h。将外植体转入2/3MSB5液体培养基(1mg·L-16-苄氨基嘌呤+100μmol·L-1乙酰丁香酮+携带有Ti质粒pBI121的根瘤农杆菌GV3101)中,在28℃黑暗环境下侵染21h。侵染后的外植体在28℃黑暗条件下共培养3d。外植体经无菌水处理后移栽到灭菌土中,并在适宜条件下培养。【结果】分子检测结果表明,本研究涉及的新型外植体的再生率高达90%以上(中品661为95%,垦农18为93%,绿75为90%),转化效率明显提高;而利用子叶节和胚尖进行培养获得的外植体的再生率仅50%和70%。此外,本研究涉及的大豆转化体系省去了外植体后期繁琐、耗时的组织培养步骤,再生周期明显缩短。【结论】与前人报道的大豆遗传转化体系技术相比,本研究所使用的方法更加快速、高效,可为农杆菌介导的大豆转基因、突变体构建等基因组学研究提供强有力的技术平台。
- 马丽萍胡正张保缺张辉
- 关键词:大豆外植体
- 野生绿豆种质资源TC1966抗豆象基因的AFLP标记研究
- 野生种抗豆象绿豆种质资源 TC1966对多个豆象小种均具有很好的抗虫性。通过对抗虫亲本 TC1966、感虫亲本绿1号及以中绿1号为轮回亲本经多代回交后获得的3个近等基因系材料进行抗虫鉴定,结果轮回亲本中绿1号的种子被害率...
- 马丽萍程须珍张辉
- 关键词:绿豆豆象AFLP抗虫鉴定生物信息学
- 文献传递
- 野生绿豆种质资源TC1966抗豆象基因的AFLP标记研究被引量:10
- 2005年
- 野生种抗豆象绿豆种质资源TC1966对多个豆象小种均具有很好的抗虫性。通过对抗虫亲本TC1966、感虫亲本绿1号及以中绿1号为轮回亲本经多代回交后获得的3个近等基因系材料进行抗虫鉴定,结果轮回亲本中绿1号的种子被害率>90%,表现高感(HS);抗性亲本TC1966及三个高代材料种子被害率<10%,表现高抗(HR),说明抗虫亲本TC1966中的抗虫基因呈显性遗传,且能够在后代材料中稳定遗传和表达。本文利用AFLP分子标记技术对该5份试验材料进行了多态性指纹图谱分析,结果从830对AFLP引物组合中筛选出在抗、感虫材料间表现多态性的引物组合100对。将部分多态性AFLP特异扩增条带从聚丙烯酰胺凝胶上回收,然后将二次扩增产物进行测序,并通过同源性序列比较的手段进行了相关生物信息学分析。本研究为今后进一步开展抗豆象基因的AFLP分子标记及其转化研究乃至抗豆象基因的克隆工作提供参考依据。
- 马丽萍程须珍张辉
- 关键词:绿豆豆象AFLP抗虫鉴定生物信息学
- 基于水稻全长cDNA的大豆种质创新技术体系的构建
- 种质创新是作物种质资源有效利用的前提和关键,是顺利开展作物遗传育种工作的基础和保证.50多年来,我国作物种质创新在促进农业新品种更新换代、提高粮食产量、保障我国的粮食安全等方面做出了巨大贡献.大豆是人类食用油和蛋白质的主...
- 马丽萍
- 关键词:种质创新全长CDNA水稻转基因大豆
- 文献传递
- 野生绿豆种质资源TC1966抗豆象基因的AFLP标记研究
- 野生种抗豆象绿豆种质资源TC1966对多个豆象小种均具有很好的抗虫性.通过对抗虫亲本TC1966、感虫亲本绿1号及以中绿1号为轮回亲本经多代回交后获得的3个近等基因系材料进行抗虫鉴定,结果轮回亲本中绿1号的种子被害率>9...
- 马丽萍程须珍张辉
- 关键词:AFLP标记抗虫鉴定种质资源
- 文献传递