魏明
- 作品数：92 被引量：192H指数：6
- 供职机构：郑州大学第五附属医院更多>>
- 发文基金：河南省医学科技攻关计划项目河南省基础与前沿技术研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生理学生物学更多>>
- 低浓度二氧化硫对哮喘大鼠CD4^+CD25^+调节性T细胞及转录因子Foxp3表达的影响被引量：1
- 2013年
- 目的探讨低浓度二氧化硫(sulfurdioxide,SO2)暴露对哮喘大鼠CD4+CD 25+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)数量及转录因子Foxp3表达的影响。方法将60只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为正常对照组、低浓度SO2暴露组、哮喘组和低浓度SO2暴露哮喘组,每组15只;哮喘组采用卵清白蛋白(OVA)致敏并吸入激发制备哮喘模型,正常对照组吸入雾化生理盐水,低浓度SO2暴露组采用吸入低浓度SO2,低浓度SO2暴露哮喘组于每日雾化激发OVA前给予低浓度SO2吸入。采用流式细胞术检测外周血CD4+CD 25+Treg细胞占CD4+T细胞的比例,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测外周血和肺组织γ-干扰素(interferon-γ,γ-INF)以及白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)含量;Western blot检测肺组织Foxp3蛋白表达水平。结果哮喘组大鼠CD4+CD 25+Treg为(5.78±1.26)%,低于正常对照组的(9.63±1.37)%;低浓度SO2暴露哮喘组为(3.15±0.82)%,低于正常对照组和哮喘组,差异有统计学意义(P均<0.01)。哮喘组大鼠血浆和肺组织中IL-4含量[(23.51±4.86)ng/L和(0.93±0.16)ng/L]高于正常对照组[(11.24±2.53)ng/L和(0.29±0.06)ng/L],差异有统计学意义(P均<0.01);低浓度SO2暴露哮喘组血浆和肺组织中IL-4含量[(36.73±7.46)ng/L和(1.67±0.41)ng/L]高于正常对照组和哮喘组,差异有统计学意义(P均<0.01);哮喘组血浆和肺组织中γ-INF含量[(63.82±21.78)ng/L和(0.49±0.15)ng/L]低于正常对照组[(156.98±60.23)ng/L和(1.58±0.18)ng/L],差异有统计学意义(P<0.01),低浓度SO2暴露哮喘组γ-INF含量[(10.02±1.68)ng/L和(0.43±0.12)ng/L]低于正常对照组和哮喘组,差异有统计学意义(P<0.01)。哮喘组Foxp3蛋白表达为(8.23±0.56),低于正常对照组的(11.87±0.65)(P<0.05);低浓度SO2暴露哮喘组为(6.05±0.36),低于正常对照组和哮喘组(P<0.05)。结论低浓度SO2暴露可能通过下调CD4+CD 25+Treg数量并抑制Foxp3蛋白表达,进一步加重哮喘的Th1/Th2比例�
- 魏明
- 关键词：哮喘低浓度SO2调节性转录因子
- MiRNA-203在寻常性银屑病皮损的表达及其对HaCaT细胞增殖的影响
- 2017年
- 目的 研究微小核糖核酸（miRNA）-203在寻常性银屑病患者皮损中的表达，并探讨对角质形成细胞株（HaCaT细胞）增殖的影响。方法 取2014—2016年23例寻常性银屑病患者的皮损组织和相邻非皮损组织。荧光定量PCR法检测组织中miRNA-203的表达水平，并以5′端、3′端地高辛标记的探针对皮肤组织切片中目的miRNA进行原位杂交，观察miRNA-203在皮肤组织中的定位情况。将miRNA-203模拟物（miRNA-203模拟物组）和miRNA-203模拟物阴性对照（阴性对照组）分别转染HaCaT细胞，正常细胞培养组作为空白对照组，采用噻唑蓝（MTT）法、流式细胞仪和Western印迹法分别对HaCaT细胞的增殖、细胞周期及相关周期蛋白（Cyclin D1、Cyclin B1）的变化进行检测。结果 miRNA-203特异性地表达在表皮的角质形成细胞中，除细胞核外，细胞质亦有表达，且寻常性银屑病患者皮损组织中miRNA-203表达水平（1.35 ± 0.28）显著高于非皮损组织（0.52 ± 0.09），差异有统计学意义（t = 6.76，P = 0.012）。转染miRNA-203模拟物能抑制HaCaT细胞增殖（F = 9.36，P = 0.007），且空白对照组、阴性对照组和miRNA-203模拟物组HaCaT细胞增殖率均随时间的延长逐渐增加（F = 18.68，P 〈 0.001）。与阴性对照组和空白对照组相比，miRNA-203模拟物组HaCaT细胞被阻滞在G2/M期（G2/M期细胞比例：31.33% ± 4.56%比17.02% ± 3.53%、16.67% ± 3.32%，均P 〈 0.05），HaCaT细胞周期蛋白周期蛋白D1表达水平较高（1.15 ± 0.13比0.52 ± 0.05、0.56 ± 0.07，均P 〈 0.05），而周期蛋白B1水平较低（0.43 ± 0.08比0.93 ± 0.16、0.91 ± 0.0.15，均P 〈 0.05）。结论 miRNA-203可能参与了寻常性银屑病的发生发展过程。
- 梁颖红魏明刘佳龚艳杰涂玲张宜花
- 关键词：银屑病寻常性微小核糖核酸角质形成细胞细胞增殖
- HMGA1对TGF-β1诱导HTR-8/SVneo细胞上皮间质转化的影响
- 2023年
- 目的研究高迁移率蛋白A1(HMGA1)对HTR-8/SVneo细胞中转化生长因子β1(TGF-β1)诱导所致上皮间质转化(EMT)过程中的作用。方法将HMGA1的小分子干扰RNA(siRNA)转染进人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo,将细胞分为空白对照组、阴性对照+lipofectamine 3000组、lipofectamine 3000组、阳性对照+lipofectamine 3000组、HMGA1 SiRNA-1+lipofectamine 3000组、HMG1 SiRNA-2+lipofectamine 3000组、HMG1 siRNA-3+lipofectamine 3000组,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹法,检测各组的HMGA1基因和蛋白表达,筛选出沉默效率最佳的siRNA;TGF-β1诱导HTR-8/SVneo发生EMT,研究TGF-β1对EMT过程的影响;使用筛选后的siRNA与TGF-β1共同作用,检测HMGA1、N-cadherin、E-cadherin的表达情况;加入TGF-β1用于诱导细胞,探究PI3K/AKT和NF-κB通路相关蛋白的表达状况;利用PI3K/AKT和NF-κB通路抑制剂阻断通路,研究HMGA1在通路介导下EMT过程的作用机制。结果HMGA1 siRNA-1组沉默效果最佳,可用于后续实验;与空白对照组相比,TGF-β1组E-cadherin蛋白表达水平降低,N-cadherin蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);干扰HMGA1表达可以阻止TGF-β1诱导HTR-8/SVneo细胞发生EMT;TGF-β1诱导后,通路相关蛋白p-AKT、AKT、NF-κB表达量均增加,与空白对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);加入通路抑制剂后,HMGA1的表达量主要受PI3K/AKT通路的影响,而NF-κB通路的抑制剂对HMGA1的影响较小。结论HMGA1在TGF-β1诱导的HTR-8/SVneo细胞EMT过程中发挥着重要作用,而且TGF-β1主要通过PI3K/AKT通路调控HMGA1的表达,进而促进细胞发生EMT。
- 刘昕万俊肖笛鸣涂玲魏明
- 关键词：高迁移率族蛋白A1上皮间质转化
- 卡介苗多糖核酸对哮喘大鼠CD4＋IL-17＋T细胞与CD4＋Foxp3＋调节性T细胞的影响被引量：3
- 2015年
- 目的 观察卡介苗多糖核酸（BCG-PSN）对哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）、外周血和淋巴液中CD4＋IL-17＋T细胞（CD4＋IL-17＋T）与CD4＋Foxp3＋调节性T细胞（CD4＋Foxp3＋ Treg）百分比及IL-10、IL-17水平的影响及其可能机制.方法 SD大鼠60只随机分为对照组（n=15）、哮喘组（n=15）、BCG-PSN干预对照组（n=15）和BCG-PSN干预哮喘组（n=15）.哮喘组和BCG-PSN干预哮喘组使用卵白蛋白建立大鼠哮喘模型,对照组和BCG-PSN干预对照组以等量生理盐水代替卵白蛋白,BCG-PSN干预哮喘组和BCG-PSN干预对照组均使用BCG-PSN进行干预.收集各组大鼠BALF、外周血和淋巴液,采用流式细胞术检测CD4＋IL-17＋T和CD4＋Foxp3＋ Treg百分比,酶联免疫吸附法（ELISA）检测IL-10和IL-17水平.结果 各组大鼠淋巴液中CD4＋Foxp3＋ Treg百分比、IL-10水平较BALF和外周血均明显升高（均P＜0.01）,CD4＋IL-17＋T百分比、IL-17水平较BALF和外周血均明显下降（均P＜0.01）.哮喘组大鼠BALF、淋巴液和外周血CD4＋Foxp3＋ Treg百分比、IL-10水平较其余3组均显著降低,而CD4＋IL-17＋T百分比、IL-17水平较其余3组均显著升高（均P＜0.01）.BCG-PSN干预哮喘组大鼠BALF、淋巴液和外周血CD4＋Foxp3＋ Treg百分比和IL-10水平较哮喘组显著升高（均P＜0.01）,与对照组和BCG-PSN干预对照组比较差异无统计学意义（均P＞0.05）.BCG-PSN干预哮喘组大鼠BALF、淋巴液和外周血CD4＋IL-17＋T细胞百分比、IL-17水平较哮喘组均显著下降（均P＜0.01）,与对照组和BCG-PSN干预对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 BCG-PSN可能通过调节哮喘大鼠外周血和淋巴液中CD4＋Foxp3＋ Treg和CD4＋IL-17＋T的百分比及相关细胞因子水平,改善机体免疫功能,从而减轻哮喘的炎性反应.
- 涂玲梁颖红魏明刘佳龚艳杰张俊华张宜花
- 关键词：哮喘卡介苗多糖核酸辅助性T细胞白细胞介素10白细胞介素17
- 输血相关急性肺损伤大鼠肺组织细胞间黏附分子1和细胞因子诱导的中性粒细胞趋化因子1的表达
- 2016年
- 目的检测输血相关急性肺损伤（TRALI）大鼠肺组织细胞间黏附分子1（ICAM-1）和细胞因子诱导的中性粒细胞趋化因子1（CINC-1）的表达，探讨TRALI的发病机制。方法雄性SD大鼠60只按随机数字表法分为正常对照组、脂多糖对照组、TRALI组和阳性对照组，每组15只。（1）TRALI组：腹腔注射脂多糖2 h后进行大鼠股动脉插管，移除大鼠约10%血容量的血液，然后输注等体积的血浆；（2）正常对照组：除腹腔注射生理盐水2 ml，以及移除大鼠血液后输注等体积生理盐水外，其余处理同TRALI组；（3）脂多糖对照组：移除大鼠血液后输注等体积生理盐水，其余处理同TRALI组；（4）阳性对照组：移除大鼠血液后输注等体积脂多糖，其余处理同TRALI组。4组大鼠处理6 h后处死，进行肺组织病理学检查和髓过氧化物酶（MPO）活性测定，检测支气管肺泡灌洗液细胞总数和中性粒细胞百分比。采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫组化法检测4组大鼠肺组织ICAM-1、CINC-1 mRNA和蛋白表达。结果 TRALI组大鼠肺组织病理评分、湿干重比和MPO活性均明显高于正常对照组（均P〈0.05）。与正常对照组比较，TRALI组大鼠支气管肺泡灌洗液细胞总数和中性粒细胞百分比均明显升高（均P〈0.05）。TRALI组大鼠肺组织ICAM-1、CINC-1 mRNA表达均明显高于正常对照组（均P〈0.05）。免疫组化显示，TRALI组大鼠肺组织ICAM-1、CINC-1蛋白表达均明显高于正常对照组。结论 ICAM-1和CINC-1参与了TRALI模型大鼠肺组织中性粒细胞与内皮细胞的黏附和聚集，可能在TRALI发病过程中起重要作用。
- 梁颖红张成诗魏明刘佳龚艳杰涂玲张宜花杨璐
- 关键词：输血细胞间黏附分子1SPRAGUE-DAWLEY
- 输血相关性急性肺损伤SD大鼠肺组织细胞间黏附分子-1基因的表达被引量：1
- 2016年
- 目的研究输血相关性急性肺损伤（transfusion-relatedacutelunginjury，TRALI）SD大鼠肺组织细胞间黏附分子（intercellularcelladhesionmolecule，ICAM）一1基因表达和中性粒细胞（polymorphonuclearneutrophil，PMN）数量的变化，旨在探讨ICAM-1和PMN在TRALI发病中的作用。方法60只SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、脂多糖组、TRALI组、阳性对照组各15只。①正常对照组采用假手术处理；②脂多糖组经大鼠腹腔注射脂多糖（2mg／kg，≤1min完毕），2h后静脉输注生理盐水（约1mL／只）；（3）TRALI组腹腔注射脂多糖（2mg／kg）2h后静脉输注血浆（约1mL／只）；④阳性对照组静脉输注脂多糖（5mg／kg）诱导急性肺损伤。采用Western印迹法检测血浆CAM-1蛋白表达；采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测大鼠肺组织中ICAM-1基因表达量；采用免疫组化法观察肺组织中ICAM一1蛋白表达。结果阳性对照组、TRALI组血浆ICAM-1蛋白表达均显著高于正常对照组、脂多糖组（0．58±0．09、0．41±0．07VS．0．12±0．03、0．21±0．04，均P〈0．01）；与正常对照组肺组织中ICAM-1蛋白含量和ICAM-1mRNA表达[（0．16±0．03）和（0．36±0．05）]比较，阳性对照组[（0．33±0．09）和（1．53±0．17）]和TRALI组[（0．27±0．07）和（1．24±0．11）]明显升高（P均〈0．05）；TRALI组BALF中细胞总数和PMN百分比[（310±76．6）×10^6／L和（33．5±11．5）％]明显高于正常对照组[（101±63．8）×10^6／L和（9．8±3．5）％，P均〈0．05）]；TRALI组组织含水量和MPO活性明显高于正常对照组（P均〈0．05）。结论TRALI大鼠肺组织中ICAM-1蛋白、ICAM-1mRNA的表达升高，肺组织PMN浸润增加，提示ICAM-1参与了PMN与内皮细胞的黏附和聚集，表明ICAM-1和PMN可能在TRALI的炎症反应过程中发挥重要作用。
- 涂玲魏明刘佳梁颖红龚艳杰张宜花杨璐
- 关键词：急性肺损伤输血相关性细胞间黏附分子-1SD大鼠
- 肺癌患者外周血CEA mRNA、CK19 mRNA和CK20 mRNA的表达被引量：1
- 2014年
- 在肿瘤的治疗中,目前困扰临床医生的主要问题仍是肿瘤的复发与转移。为此本研究采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术对不同临床分期和类型的肺癌患者外周血CEA mRNA、CK19 mRNA和CK20 mRNA的表达水平进行检测,探讨其对肺癌微转移诊断和监测的临床意义。1对象与方法 1.1研究对象肺癌患者60例,男46例,女14例。平均年龄57.8岁,均经病理组织切片确诊。其中小细胞肺癌10例,
- 魏明涂玲梁颖红刘佳张俊华龚艳杰
- 关键词：肺癌聚合酶链反应
- 反义抑制miRNA-155对皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖、凋亡及侵袭力的影响被引量：1
- 2017年
- 目的观察转染反义微小核糖核酸(miRNA)-155对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭力的影响。方法采用脂质体介导对皮肤鳞状细胞癌A431细胞转染miRNA-155无义序列(阴性对照组)、转染反义miRNA-155(转染组),空白对照组细胞不作处理。实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测转染后A431细胞miRNA-155的相对表达水平;采用四甲基偶氨唑盐(MTT)检测转染后皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖活性;采用流式细胞术(FCM)检测转染后皮肤鳞状细胞癌A431细胞周期改变和凋亡变化;采用Transwell法检测侵袭力与细胞迁移能力。结果转染组A431细胞中miRNA-155 mRNA的相对表达水平低于空白对照组和阴性对照组(F=634.57,P<0.01),但空白对照组和阴性对照组比较差异无统计学意义。转染72 h后,转染组较空白对照组和阴性对照组细胞存活率明显降低,转染120 h降低最为明显(P<0.05)。转染组G_0/G_1期细胞增多,S期细胞减少,整体细胞增殖指数降低,A431细胞凋亡率、细胞迁移和侵袭力升高(P<0.05),但各组G_2/M期细胞周期变化、后2组A431细胞凋亡率、细胞迁移和侵袭力差异无统计学意义。结论皮肤鳞状细胞癌A431细胞转染反义miRNA-155可减少miRNA-155的表达,有效抑制A431细胞增殖,促进其凋亡。miRNA-155可能成为治疗皮肤鳞状细胞癌基因表达调控的新靶点。
- 时磊魏明
- 关键词：皮肤肿瘤
- 微小核糖核酸-146a对寻常型银屑病患儿CD4＋T细胞的调控作用及其临床意义被引量：4
- 2016年
- 目的：探讨微小核糖核酸（miRNA）-146a在寻常型银屑病患儿外周血CD4＋T淋巴细胞的调控机制。方法采用实时荧光定量PCR检测2013年10月至2015年12月就诊于本院皮肤性病科门诊的寻常型银屑病患儿30例和30名正常对照儿童外周血CD4＋T淋巴细胞miRNA-146a表达水平，免疫磁珠法分选外周血CD4＋T淋巴细胞，将分离的细胞分为对照组、miRNA-146a模拟体组和miRNA-146a抑制物组，并进行细胞培养；流式细胞术检测辅助性T细胞Th1数量，免疫印迹法和荧光定量PCR分别检测IFN-γ受体α（IFN-γRα）蛋白和mRNA的表达，酶联免疫吸附试验检测血浆和体外细胞培养上清液干扰素（IFN）-γ表达水平。结果寻常型银屑病患儿外周血CD4＋T淋巴细胞miRNA-146a与血浆IFN-γ表达较正常对照组升高[（2.43±0.94）vs（1.05±0.23），（27.69±7.64）ng/L vs（9.75±2.81）ng/L]，均P〈0.01，且miRNA-146a的表达与血清IFN-γ呈正相关（r=0.837，P〈0.01）。体外CD4＋T淋巴细胞培养结果显示，与对照组比较，miRNA-146a模拟体组Th1数量、培养液上清IFN-γ水平显著增加，IFN-γRα蛋白表达降低，均P〈0.01。miRNA-146a抑制物可有效地阻断miRNA-146a对Th1细胞的调控作用。结论 miRNA-146a通过影响Th1细胞的分化和功能参与对寻常型银屑病患儿外周血CD4＋T淋巴细胞的调控，在寻常型银屑病发病过程中可能发挥着一定的作用。
- 涂玲刘佳龚艳杰魏明梁颖红张宜花
- 关键词：微小核糖核酸T淋巴细胞细胞因子
- 髓源树突状细胞对Ⅱ型胶原诱导关节炎小鼠CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞的影响被引量：1
- 2023年
- 目的研究髓源树突状细胞(BMDCs)对Ⅱ型胶原诱导关节炎(CIA)小鼠CD4+CD25+调节性T细胞(Treg细胞)的影响及作用机制。方法从40只雄性BALB/c小鼠中,随机选择10只颈椎脱臼法处死,收集来自骨髓的单核细胞,用白细胞介素(IL)-4、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)及脂多糖(LPS)分别诱导使其成为未成熟树突状细胞(imDC)及成熟树突状细胞(mDC),同时应用流式细胞术对细胞表型进行分析,采用免疫印迹法(Western blotting)检测共刺激分子CD80、CD86和主要组织相容性复合体(MHCⅡ)蛋白表达。另取上述小鼠30只,采用Ⅱ型胶原免疫,建立类风湿关节炎(RA)小鼠模型。在免疫之后第6天,按照随机数字表法把小鼠分为空白对照组(10只)、imDC组(10只)和mDC组(10只),分别沿小鼠尾静脉注射磷酸盐缓冲液(PBS)、imDC和mDC;于免疫之后第7天对3组小鼠进行免疫强化操作,于免疫强化之后第21天检测3组小鼠的关节变形情况,并测定关节炎指数(AI)评分;酶联免疫吸附试验(ELISA)及Western blotting测定小鼠血清转化生长因子(TGF)-β和IL-10的表达,流式细胞术检测小鼠脾脏组织Treg细胞比例。结果髓源单核细胞经IL-4+GM-CSF诱导后,其共刺激分子CD80、CD86、MHC-Ⅱ表达率分别为36.80%±5.86%、32.80%±6.42%、56.80%±5.36%,即为imDC;经IL-4+GM-CSF+LPS诱导后,其共刺激分子CD80、CD86、MHC-Ⅱ表达率分别为90.03%±7.38%、89.87%±7.10%、93.03%±7.76%,即为mDC;结果表明,树突状细胞(DC)成功诱导分化为imDC和mDC。强化免疫后第21天,imDC组AI评分[(7.28±1.45)分]显著高于mDC组[(13.78±2.14)分]和空白对照组AI评分[(12.31±1.83)分],差异有统计学意义(P<0.05);imDC组血清IL-10和TGF-β[(11.32±2.17)pg/mL和(27.15±4.71)pg/mL]显著高于mDC组[(5.47±1.83)pg/mL和(11.64±2.67)pg/mL]及空白对照组[(4.96±1.79)pg/mL和(12.06±2.25)pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05);imDC组脾脏Treg细胞比例(4.62%±1.03%)显著高于mDC组(3.05%
- 龚艳杰魏明
- 关键词：胶原诱导树突状细胞
