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应用实时荧光PCR技术检测金黄色葡萄球菌肠毒素基因被引量：2: 2012年; 目的:建立一种简便、特异的荧光PCR检测方法,用于金黄色葡萄球菌肠毒素的检测。方法:按金黄色葡萄球菌SEA～SEE型肠毒素基因序列设计引物,在普通PCR检测体系中,加入SYBR Green I荧光染料,建立荧光PCR检测体系。结果:46株金黄色葡萄球菌中检出22株携带肠毒素基因,阳性率为47.83%。以SEA、SEB检出率较高,分别为31.82%和27.27%;不同来源的分离株携带肠毒素基因的比例不同,同时携带2种及以上毒素基因的菌株占27.27%。结论:荧光PCR检测金黄色葡萄球菌肠毒素的方法具有快速、敏感、特异性高的特点,适用于肠毒素基因的分型与分布的研究,适合基层疾控部门使用。; 葛小萍陈棋炯孙永祥傅丹青丁水军戴城钢; 关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素荧光PCR

方阵式荧光PCR在从业人员肠道致病菌筛查中的应用被引量：2: 2014年; 目的利用荧光PCR检测技术和方阵原理相结合,建立方阵式荧光PCR检测从业人员肠道致病菌的方法。方法采集从业人员肛拭子样品经增菌培养后,把待检样品排成方阵,对方阵中的每排、每列样品分别混合为一个新的样品,对混合样品进行沙门菌、志贺菌双色荧光PCR检测,检出的疑似阳性样品用传统的分离培养法进行培养鉴定。结果荧光PCR与方阵相结合,比传统培养法灵敏度高、特异性强,而且能快速准确定位疑似阳性样品,操作简便快捷。结论方阵式荧光PCR快速、灵敏度高、特异性强,可提高从业人员带菌检出率并大大降低工作强度,此方法可用于从业人员体检的快速诊断和肠道传染病的初筛,同时值得在大样本量的检测工作中推广。; 丁水军陈棋炯孙永祥傅丹青张金芳; 关键词：荧光PCR 肠道致病菌

金黄色葡萄球菌食物中毒菌株的肠毒素基因分型与脉冲场凝胶电泳分型研究被引量：4: 2013年; 目的对一起食物中毒中分离到金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)进行肠毒素基因分型和脉冲场凝胶电泳法(PFGE)分型。方法采用mini-VIDAS全自动荧光免疫分析仪对菌株进行肠毒素检测,对产肠毒素的菌株进行PCR基因分型与PFGE同源性分析。结果从被检样品中共分离到22株金黄色葡萄球菌,肠毒素初筛均为阳性,基因分型检测均为SEA。PFGE分型结果显示22株可分为3个型,P1型为19株,P2型2株,P3型1株。结论根据实验室检测结果分析这是一起产肠毒素SEA的金黄色葡萄球菌引起的食物中毒。PFGE分型结果显示有3个型,P1型占主导。; 戴城钢孙永祥傅丹青陈棋炯丁水军张金芳; 关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素脉冲场凝胶电泳基因分型

萧山区2007年-2010年宋内志贺菌的病原分子生物学特征被引量：1: 2013年; 目的:了解2007年-2010年萧山区分离的宋内志贺菌的病原分子生物学特征,并分析其流行规律。方法:对130株宋内志贺菌进行生化反应和血清分型鉴定,利用PCR方法检测侵袭性质粒抗原H(ipaH)基因。使用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行同源性分型分析,并使用BioNumerics进行聚类分析以确定菌株间的亲缘关系。结果:130株菌株均为宋内志贺菌,均具有ipaH基因。PFGE分型将菌株分成90个型别,相似性72.4%～97.9%,主要分为A、B、C三个克隆群。结论:PFGE分型结果表明2007年-2010年萧山区的宋内志贺菌来源具有多样性,A、B、C三个克隆群的菌株占据主导地位,应引起重视。; 丁水军陈棋炯汪皓秋孙永祥傅丹青; 关键词：宋内志贺菌 IPAH基因脉冲场凝胶电泳

萧山区2011-2014年游泳场所水质监测结果分析被引量：8: 2016年; 目的了解杭州市萧山区游泳场所水质卫生状况,为提高其卫生质量,保障游泳人群健康提供科学依据。方法水样按照GB/T 18204-2000《公共场所卫生标准检验方法》检验,检验结果根据GB 9667-1996《游泳场所卫生标准》进行评价。结果萧山区2011-2014年游泳池水质监测总合格率为75.8%,各年度合格率分别为77.6%、78.5%、84.4%和61.5%。游泳池水各检测指标总体合格率从高到低依次为浑浊度(99.8%)、p H值(99.6%)、大肠菌群(98.9%)、细菌总数(96.2%)、尿素(89.4%)和游离性余氯(86.8%)。各年度浸脚池水游离性余氯合格率分别为92.9%、76.5%、90.7%和95.3%。酒店内设、居民区所设、体育/健身中心3种不同类型游泳池水合格率差异具有统计学意义。结论杭州市萧山区游泳场所水质卫生还需提升,游泳场所应科学使用消毒剂、定期换水;卫生监督机构加强培训与监管,保障游泳人群健康。; 葛小萍陈棋炯傅丹青张金芳丁水军孙永祥; 关键词：游泳场所水质监测

金黄色葡萄球菌肠毒素基因的检测与分型被引量：12: 2011年; 目的:了解不同来源的金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)分离株产肠毒素的情况,以及主要肠毒素SEA、SEB、SEC、SED、SEE基因携带状况。方法:采用小型VIDAS全自动荧光酶标免疫法对46株分别从医院消毒监测样品、公共场所监测样品、食品监测样品以及食物中毒病人粪便和呕吐物中分离到的SA菌株进行肠毒素检测,再采用PCR技术对产肠毒素的菌株进行基因分型。结果:46株SA菌株中,携带肠毒素的为22株,检出率为47.83%。其中以SEA、SEB检出率较高,分别为31.82%和27.27%。不同来源SA分离株携带肠毒素基因的比例不同,24株来自医院消毒监测样品分离株中检出率为41.67%(10/24);4株来自公共场所监测样品分离株中检出率为50.00%(2/4);12株来自食品监测样品分离株中检出率为33.33%(4/12);6株食物中毒样本分离株中检出率为100%(6/6)。结论:46株SA分离株中产肠毒素为22株,比例较高,而且携带肠毒素基因的类型较多。试验表明,VIDAS与PCR技术应用于检测SA分离株中肠毒素基因简单、快速,适合基层疾控部门应用。; 傅丹青陈棋炯丁水军戴城钢; 关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素基因分型 PCR

48株金黄色葡萄球菌的肠毒素分布及其耐药性研究被引量：17: 2005年; 目的:研究48株金黄色葡萄球菌的肠毒素分布及其耐药性。方法:用VIDAS全自动免疫分析仪测定肠毒素,用K-B法进行药敏试验。结果:48株金黄色葡萄球菌有27株产生肠毒素,占56.2%。在药敏试验中48株金黄色葡萄球菌100%对万古霉素和氟哌酸敏感,97.9%对复方新诺明敏感,95.8%对苯唑青霉素和庆大霉素敏感,89.6%对氯霉素敏感,85.4%对四环素和克林霉素敏感,85.4%对青霉素G耐药,35.4%对红霉素耐药。结论:本次实验中的48株金黄色葡萄球菌产肠毒素的菌株占27株,比率是比较高的。48株金黄色金黄色葡萄球菌对10种抗生素敏感率较高。; 赵建丁水军陆扁傅丹青; 关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素耐药性

营养琼脂斜面法在沙门菌“H”抗原位相变异中的应用被引量：4: 2009年; 在不同浓度的营养琼脂上作沙门菌"H"抗原位相变异试验,并与GB/T 4789.4-2008中"玻管法和简易平板法"相比较,发现应用50%浓度的普通营养琼脂制成的斜面培养基,"H"抗原位相变异试验中一次诱导成功率较高。; 傅丹青孙永祥丁水军; 关键词：沙门菌

实时荧光PCR技术在预防性健康检查沙门菌与志贺菌检测中的应用被引量：6: 2015年; 目的将实时荧光PCR技术应用于食品及公共场所从业人员肛拭标本的沙门菌与志贺菌检测,评价其作为快速检测方法的适用性。方法采集肠道门诊粪便与肛拭标本分别利用实时荧光PCR法与传统培养法进行平行对照实验,验证实时荧光PCR法的灵敏度与特异度;然后将此法与列联表结合应用于从业人员肛拭标本的检测。结果 515份肠道门诊标本的检测结果表明,实时荧光PCR法阳性率高于培养法(P<0.05),沙门菌与志贺菌的灵敏度均为100.00%,特异度分别为98.98%、97.02%。检测2013年采集的从业人员肛拭标本21 590份,检出沙门菌18株,阳性率为0.83‰;未检出志贺菌。实时荧光PCR法检出率高于2014年同期传统培养法检出率。结论实时荧光PCR技术有助于提升预防性健康检查中沙门菌与志贺菌的检出率,而且特异度强、灵敏度高,兼具时效性与客观性,适合基层实验室对从业人员进行沙门菌与志贺菌的快速筛查。; 陈棋炯丁水军孙永祥傅丹青张金芳葛小萍; 关键词：快速筛查沙门菌志贺菌

福氏志贺菌4c亚型的分子生物学特征分析: 2008年; 目的了解杭州地区2003—2007年从爆发和散发细菌性痢疾患者中分离之福氏志贺菌4c亚型（F4c）菌株的分子生物学特征。方法对24株F4c菌株以生化反应和血清分型进行鉴定，利用PER法检测侵袭性质粒抗原H基因（ipaH）及脉冲场凝胶电泳（PFGE）进行分型分析。结果24株菌株全部为F4e，均具有ipaH毒力基因。用PFGE分型方法将24株菌株分成17种不同的带型，Dice系数为0．71～1．00。2005年、2006年、2003年三次爆发（分别简称为爆发1、2、3）中各自分离到的菌株基因型紧密相关。三次爆发中的部分菌株可能存在一定的相关性（Dice系数〉0．8）。散发菌株和爆发1、3菌株间的距离较远（Dice系数〈0．8），和爆发2菌株间可能存在一定的相关性（Dice系数〉0．8）。结论F4c菌株具有ipd／毒力基因，PFGE提示杭州地区近年F4c三起爆发菌株可能属共同的克隆群。; 丁水军孙永祥汪皓秋傅丹青戴城钢; 关键词：志贺菌脉冲场凝胶电泳

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傅丹青

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