冷超粮
- 作品数：63 被引量：464H指数：10
- 供职机构：南阳师范学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生理学更多>>
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白B表位诱导中和抗体能力的研究被引量：13
- 2011年
- 为证实GP5蛋白B表位是否具有诱导抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)中和抗体的能力,本实验合成了PRRSV CH-1a株和高致病性PRRSV(HP-PRRSV)HuN4株B表位的短肽,分别免疫家兔制备两份特异性多肽抗血清。此外,将12头PRRSV及其抗体均为阴性的健康仔猪以HP-PRRSV HuN4疫苗毒株(HuN4-F112)进行基础免疫,然后用强毒株(HuN4-F5)进行多次接种,制备猪高免血清。间接免疫荧光检测(IFA)结果显示,两份多肽抗血清均能与PRRSV经典株和变异株发生特异性反应,IFA抗体效价无差异,表明两份血清没有显著差异。病毒中和试验结果表明,两份多肽抗血清均不具有中和PRRSV活性。间接ELISA和病毒中和试验结果表明,猪高免血清中针对B表位肽的ELISA抗体水平与血清抗PRRSV中和抗体之间没有正相关关系,而且B表位肽不能抑制中和抗体。以上结果表明HP-PRRSV B表位不能诱导产生中和抗体。
- 冷超粮安同庆陈家锃宫大庆李登云杨永倩彭金美张祎郭娟娟吴江童光志田志军
- 关键词：GP5中和抗体
- 1株猫源铜绿假单胞菌的分离鉴定及全基因组分析被引量：3
- 2022年
- 为了探究浙江大学教学动物医院就诊患猫鼻窦炎眶内感染的病原菌特点,试验采集患猫额窦、鼻腔、鼓泡部位的内容物,采用细菌分离纯化、16S rDNA基因序列分析对分离菌株进行鉴定;通过药敏试验、小鼠致病性试验、全基因组序列分析对分离菌株进行耐药性、致病性分析和遗传进化分析。结果表明:仅从患猫鼓泡内容物中分离得到1株铜绿假单胞菌,命名为ZJU2021。ZJU2021属于多重耐药菌株,对左氧氟沙星、氨曲南、多黏菌素B等5种药物敏感,而对美罗培南、万古霉素、多西环素等30种药物耐药。ZJU2021菌株基因组全长为6868280 bp,含有6426个基因;其中氨基糖苷类、氟喹诺酮类、β-内酰胺类等药物相关耐药基因48个;抗生素抗性基因61个,形成抗生素外排、抗生素靶向、抗生素灭活等耐药机制;毒力因子编码基因687个,其产物主要关于抗菌活性、铁摄取、调控系统、毒性蛋白等。ZJU2021毒力基因toxA和exoT与GenBank中的铜绿假单胞菌相应基因核苷酸相似性高于99%,其中toxA与从天津包装饮用水中分离的铜绿假单胞菌TJ2019-022株(登录号为CP065865.1)位于同一分支上,且二者构成独立分支;exoT基因与北京、兰州等地分离的人源铜绿假单胞菌处于同一分支。说明本次分离得到的菌株具有较强的致病性,其耐药基因在人与动物之间的传播会造成严重的公共卫生安全问题,因此临床上应加强人兽共患细菌性疾病的监测。
- 李慧敏李培德潘嘉臻马晓丹马晓丹任大喜王华南
- 关键词：铜绿假单胞菌药敏试验全基因组分析毒力基因
- 可视化检测Hobi‑like瘟病毒的反转录环介导等温扩增引物、试剂盒和检测方法
- 本发明属于病毒检测技术领域，具体涉及一种可视化检测Hobi‑like瘟病毒的反转录环介导等温扩增引物、试剂盒和检测方法。本发明合成特异性LAMP引物上游内引物FIP、下游内引物BIP、上游外引物F3和下游外引物B3，所述...
- 史鸿飞阚云超姚伦广唐存多焦铸锦冷超粮冀君岳超马娜
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(HuN4-F112株)诱导特异性IFN-γ^+T细胞反应的研究被引量：3
- 2012年
- 为研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)活疫苗(HuN4-F112株)诱导的特异性IFN-γ+T细胞反应与其保护作用的相关性,本研究将25头45日龄PRRSV阴性健康仔猪随机均分为5组,第1～3组分别于0 d、7 d、14 d免疫HuN4-F112疫苗(1头份/头,106.0TCID50),第4组为攻毒对照组,第1～4组于21 d用PRRSV强毒株HuN4-F5攻毒(3 mL/头,104.0TCID50),第5组为空白对照组。疫苗免疫后1周～2周产生部分保护,3周产生完全保护,第1～4组保护率分别为5/5、2/5、2/5和0/5。中和抗体检测显示免疫组免疫后7 d和14 d所有猪只均未检测到中和抗体,免疫后第21 d第1组4头猪检测到低效价(≤1∶8)的中和抗体。疫苗免疫后血清中IFN-γ含量略有升高,但变化不大,整体都处于较低的水平。采用酶联免疫斑点技术(ELISpot)检测PRRSV特异性IFN-γ+T细胞反应。免疫组免疫后7 d、14 d、21 d百万外周血单个核细胞中IFN-γ+T细胞频数分别为0±0、0±2、5±8,组间和组内统计分析显示差异不显著。结果表明在HuN4-F112株疫苗早期保护中,IFN-γ参与的特异性细胞免疫反应较弱,在早期免疫阶段难以发挥主要作用。本研究为了解PRRSV疫苗免疫保护机制提供参考,同时,也提示需要采用更多的指标和方法来评价该疫苗诱导的免疫反应。
- 吴玉全孟甄祥杨永倩陈家锃吴江冷超粮孙艳彭金美安同庆童光志田志军
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征酶联免疫斑点技术Γ干扰素
- 一种牛多杀性巴氏杆菌的环介导等温扩增检测引物组合物、检测盒及其应用
- 本发明涉及一种牛多杀性巴氏杆菌的环介导等温扩增检测引物组合物、检测盒及其应用，属于细菌检测技术领域。一种牛多杀性巴氏杆菌的环介导等温扩增检测引物组合物，由正向内引物FIP、反向内引物BIP、正向外引物F3和反向外引物B3...
- 史鸿飞阚云超姚伦广唐存多焦铸锦冷超粮冀君岳超马娜
- 文献传递
- 两株猪细环病毒的全基因组序列分析
- 2022年
- 为了研究猪细环病毒(Torque teno sus virus,TTSuV)的流行及遗传变异情况,试验采用PCR方法对从河南省南阳市某规模化养猪场采集的疑似TTSuV阳性猪的淋巴结、肺脏、血清等样品进行检测,并对TTSuV1阳性样品进行全基因组序列测定、同源性分析、遗传进化分析和基因重组分析。结果表明:试验成功从样品中鉴定出2株TTSuV1毒株,其全基因组序列长度分别为2906,2920 bp,分别命名为HeN1-A9株和HeN1-A11株。两毒株与GenBank中TTSuV1型参考毒株的同源性为68.8%~96.0%,与GenBank中TTSuVk2型参考毒株同源性为46.8%~47.6%,两毒株之间的同源性为86.4%。基于TTSuV1全基因组序列构建的遗传进化树分析,两毒株均属于TTSuV1c亚型;而基于TTSuV1第3段基因组序列构建的遗传进化树分析,两毒株均属于TTSuV1b亚型。两毒株均是重组毒株,以西班牙的G21株(GU570201)为亲本毒株,我国的LNJZ株(KT968712)提供重组片段,重组位点分别位于基因组2195~2530 bp和2147~2650 bp处,重组区域为ORF1与ORF3的重叠部分。说明我国已出现新型重组的TTSuV毒株。
- 袁志乔翟洪月丁雨善马玉静李慧敏张艺艺鲍印李娜冷超粮
- 关键词：流行性基因重组
- 2014年~2019年PRRSV主要流行毒株在我国的变化被引量：45
- 2020年
- 为了研究2014年至2019年PRRSV在我国的流行变化情况,本研究分别检测了2014年6月~2019年8月全国17个省、市和自治区及某大型养猪集团2007份和338份疑似PRRSV感染的病料。结果显示,共检出PRRSV阳性病料650份,测定了486株ORF5基因、441株nsp2基因和122株全基因组序列。遗传演化分析显示,2014年~2019年共检测到6种基因亚型的PRRSV,分别是I型PRRSV、HP-PRRSV、NADC30-like PRRSV、NADC34-like PRRSV、QYYZ-like PRRSV和RespPRRS MLV-like PRRSV。经统计分析显示,2016年以前除检测到1株NADC30-like PRRSV外,其余全部是HP-PRRSV;2016年后HP-PRRSV检出比率逐渐降低,NADC30-like PRRSV检出比率逐渐升高,且2016年后已超过HP-PRRSV,成为我国主要的流行株。QYYZ-like PRRSV的检出数量增多,其广泛流行于我国的华南地区。其它类型的PRRSV检出比率较低,呈现散发或局部流行。此外,近年来,PRRSV的细胞嗜性已经发生明显变化,绝大多数的病毒株无法在体外分离培养。因此,我国养殖企业针对PRRSV流行株的变化应及时调整防控策略,同时加大对PRRSV生物学特性变化机制的研究。本研究对了解我国PRRSV的流行状况及防控具有重要的指导意义。
- 张洪亮张文立许浒宋帅杰赵静相丽润冷超粮李真刘春晓汤艳东陈家锃彭金美王倩安同庆童光志蔡雪辉田志军
- 关键词：PRRSV细胞嗜性
- 一种基于人结直肠癌相关基因SEPT9甲基化检测的聚合酶螺旋扩增引物组和检测试剂盒
- 本发明提供一种基于人结直肠癌相关基因SEPT9甲基化检测的聚合酶螺旋扩增引物组、试剂盒及检测方法。本发明针对人结直肠癌基因组中SEPT9基因的启动子V2区域设计了一对用于人结直肠癌特异性甲基化检测的PSR引物和试剂盒。用...
- 冀君许鑫胡雯王雪雨冷超粮史鸿飞阚云超姚伦广
- 文献传递
- 一种猪流行性腹泻病毒的检测引物和荧光定量RT-PCR检测方法
- 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种猪流行性腹泻病毒的检测引物和荧光定量RT-PCR检测方法。本发明检测上游引物QPEDV-F，序列为：CTTCCCAGCGTAGTTGAG；下游引物QPEDV-R，序列为：TTGCC...
- 冷超粮翟洪月阚云超姚伦广王丛丛王娇玲冷玉敏史鸿飞冀君唐青海
- 文献传递
- 一株不能被高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)疫苗抗血清中和的HP-PRRSV的分离鉴定被引量：5
- 2014年
- 为监测猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的遗传变异及流行情况，本研究采用猪肺泡巨噬细胞培养分离PRRSV野毒株，从某疑似猪繁殖与呼吸综合征发病猪场的发病猪肺脏病料中分离了一株PRRSV，命名为HEL-12。并将该病毒测序分析，其基因组序列已提交到NCBI （序列号：KJ019330）。基因序列比对显示，该分离株与经典株相比其NSP2蛋白存在HP-PRRSV 30个氨基酸缺失的典型特征，与HP-PRRSV代表株JXA1和HuN4株的同源性仅为97.3 %，其变异主要位于基因组编码的结构蛋白GP2～GP5和非结构蛋白NSP2。血清中和试验表明10份HP-PRRSV疫苗抗血清均不能中和该病毒株，表明HEL-12的抗原发生了较大变异，是一株新的HP-PRRSV变异株。本研究表明，PRRSV一直处于不断变异中，需要对其遗传变异持续监测。
- 陈家锃白云常丹张秋月王倩冷超粮张武超赵鸿远叶超李琳田志军彭金美安同庆童光志
- 关键词：病毒中和试验
