刘婷
- 作品数：6 被引量：7H指数：1
- 供职机构：扬州大学生物科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金高等学校全国优秀博士学位论文作者专项资金更多>>
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- 表达破伤风毒素C片段的重组鼠伤寒沙门菌的构建与鉴定被引量：5
- 2005年
- 为构建表达破伤风毒素C片段基因的减毒鼠伤寒沙门菌,将编码破伤风毒素C片段的基因插入到asd+的组成型表达载体pYA3333,转化asd基因突变的E.coliX6212,获得重组质粒pYA3333-TetC,再将重组质粒通过电穿孔法转入宿主菌,构建成表达破伤风毒素C片段基因的平衡致死的鼠伤寒沙门菌X4550(pYA3333-TetC)。免疫印迹试验证实,该重组菌表达的蛋白与预期的目的蛋白一致。重组菌X4550(pYA3333-TetC)的稳定性试验表明,在体外培养100代后,随机挑选的重组菌落全部都能生长,重组菌X4550(pYA3333-TetC)的生长曲线测定表明,X4550(pYA3333-TetC)和X4550(pYA3333)的生长状态基本一致。动物试验证明,该重组菌是安全的,破伤风毒素攻击后能提供良好的保护作用。
- 刘婷焦新安潘志明张晓明黄金林
- 关键词：破伤风毒素鼠伤寒沙门菌
- 破伤风毒素C片段基因的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达
- 应用PCR技术直接从破伤风梭菌64008菌株基因组中扩增出大小为1356bp的破伤风毒素C片段基因,该片段是与靶细胞起结合作用的重链C端基因,经DNA序列测定分析,扩增出的基因与GenBank上登陆的序列AF154828...
- 刘婷焦新安潘志明张晓明黄金林
- 关键词：大肠杆菌克隆
- 文献传递
- 破伤风毒素C片段基因的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达
- 本研究对破伤风毒素C片段进行基因克隆、重组表达、蛋白纯化和免疫原性分析。应用PCR技术直接从破伤风梭菌64008菌株中扩增出大小为1356bp的破伤风毒素C片段基因,该片段是与靶细胞起结合作用的重链C端基因,经DNA序列...
- 刘婷焦新安潘志明黄金林
- 关键词：大肠杆菌克隆
- 文献传递
- 破伤风毒素C片段基因的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达
- 本研究对破伤风毒素C片段进行基因克隆、重组表达、蛋白纯化和免疫原性分析。应用PCR技术直接从破伤风梭菌64008菌株中扩增出大小为1356bp的破伤风毒素C片段基因,该片段是与靶细胞起结合作用的重链C端基因,经DNA序列...
- 刘婷焦新安潘志明黄金林
- 关键词：大肠杆菌克隆
- 破伤风毒素C片段基因的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达被引量：1
- 2007年
- 应用PCR技术直接从破伤风梭菌64008菌株基因组中扩增出1356bp的破伤风毒素C片段基因,该片段是与靶细胞起结合作用的重链C端基因,经DNA序列测定分析,扩增出的基因与GenBank上登陆的序列AF154828的同源性达到99.2%。将此基因克隆入大肠杆菌融合表达载体pET-30a(+),构建成重组表达质粒pET-TetC,并在大肠杆菌Rosetta(DE3)中表达,经SDS-PAGE蛋白电泳鉴定,表达产物约为50000的重组蛋白,其表达量占菌体总蛋白的33.5%,经免疫印迹试验证实该重组蛋白是破伤风毒素C片段抗原。动物试验证明,此重组抗原具有良好的免疫原性,能保护动物免受破伤风毒素的攻击。
- 刘婷焦新安潘志明张晓明黄金林
- 关键词：大肠杆菌克隆
- 破伤风毒素C片段基因的克隆及在大肠杆菌中的高效表达被引量：1
- 2007年
- 本研究对破伤风毒素C片段进行了基因克隆、重组表达、蛋白纯化和免疫原性分析。应用PCR技术直接从破伤风梭菌64008菌株基因组中扩增出大小为1356 bp的破伤风毒素C片段(TetC)基因,经DNA序列测定分析,扩增出的基因与GenBank上登录的序列AF154828的同源性达到99.2%。将此基因克隆至大肠杆菌融合表达载体pGEX-6P-1,构建成重组表达质粒pGEX-6P-1-TetC,并在大肠杆菌BL21中表达,重组蛋白的表达量占菌体总蛋白的21%。经SDS-PAGE蛋白电泳鉴定,表达产物为76 Ku左右的重组蛋白,经免疫印迹试验证实该重组蛋白是破伤风毒素C片段抗原。
- 程宁宁单艳菊潘志明刘婷耿士忠黄金林焦新安
- 关键词：破伤风毒素大肠杆菌基因克隆蛋白纯化
