唐小千
- 作品数：101 被引量：109H指数：6
- 供职机构：中国海洋大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学核科学技术更多>>
- 迟缓爱德华氏菌感染和疫苗免疫后牙鲆的血细胞数量变化被引量：1
- 2017年
- 重组表达了牙鲆(Paralichthys olivaceus)T淋巴细胞表面标志分子CD3的蛋白,制备出其兔多克隆抗体(多抗),采用免疫双荧光流式细胞术,观察外周血白细胞中的T、B淋巴细胞并计算其比例。分别向牙鲆腹腔内注射107 CFU/mL的迟缓爱德华氏菌和其灭活疫苗,于0、1、3、5、7、9、14、21和28天后抽取外周血,用抗红细胞单抗的流式细胞术测定红细胞和白细胞的比例和浓度,提取外周血白细胞,用流式细胞术测定T、B淋巴细胞的比例。研究显示,CD3多抗和IgM单抗分别识别T、B淋巴细胞,二抗体无交叉反应,白细胞中T细胞占(7.49±1.5)%、B细胞占(14.64±1.8)%。感染和免疫后,牙鲆外周血红细胞浓度变化不显著,为(2.9±0.45)×10~9 cells/mL。感染组,白细胞浓度第3天显著上升,第14天达到最大值(4.7±1.7)×10~8cells/mL;T细胞比例第1天显著上升,第9天达到最大值(24.3±1.28)%;B细胞比例第1天显著升高,第21天达到最大值(40.9±1.52)%。免疫组,白细胞浓度第3天显著上升,第14天达最大值(7.1±1.8)×10~8cells/mL;T细胞比例第5天显著上升,第9天达最大值(20.5±1.12)%;B细胞比例第1天显著上升,第21天达到最大值(39.3±1.55)%。对照组,白细胞浓度为(6.9±1.6)×10~7cells/mL,T细胞比例为(8.05±1.38)%,B细胞比例为(13.77±1.56)%。研究结果表明,感染和免疫后牙鲆白细胞浓度、T、B细胞的比例均显著升高,感染组T、B细胞比例显著高于免疫组。本研究结果为血细胞作为牙鲆健康评估指标提供了数据资料。
- 甄梦晓邢婧绳秀珍唐小千战文斌
- 关键词：牙鲆免疫迟缓爱德华氏菌T淋巴细胞B淋巴细胞
- 培养条件对海豚链球菌的生长及其胞外产物蛋白组成的影响被引量：2
- 2016年
- 本文研究了培养条件对海豚链球菌（Streptococcus iniae）NUF849生长的影响,分析了不同培养条件下海豚链球菌胞外产物的蛋白组成变化。结果显示,海豚链球菌在28℃时生长状态最好,胞外产物最丰富,主要有92 kDa、88 kDa、68 kDa、62 kDa、57 kDa、50 kDa、46 kDa、42 kDa、38 kDa、37 kDa、36 kDa、30 kDa、27 kDa和24 kDa等蛋白条带,温度升高或降低皆使蛋白条带减少;相对于普通气体环境,5%~10%CO_2对海豚链球菌的生长无显著影响,但使胞外产物蛋白条带减少,92 kDa、88 kDa、62 kDa、37 kDa和27 kDa条带丰度升高;培养基含2‰葡萄糖和5‰NaCl时,海豚链球菌生物量最高,5‰和10‰葡萄糖均可增加胞外产物蛋白条带,提高68 kDa、57 kDa、37 kDa和27 kDa蛋白丰度,但20‰葡萄糖和高于10‰的NaCl会抑制海豚链球菌的生长并减少胞外产物蛋白丰度;培养基中添加二联吡啶（DPD）和FeCl_3时,海豚链球菌生长受到抑制,胞外产物蛋白条带较BHI培养基条件下明显减少。本文结果有助于认识海豚链球菌对外界环境条件的反应,为揭示其致病机理提供依据。
- 刘海波绳秀珍唐小千邢婧战文斌
- 关键词：海豚链球菌胞外产物蛋白组成
- 一种牙鲆迟缓爱德华氏菌病快速诊断试纸及其制备方法
- 本发明公开了一种牙鲆迟缓爱德华氏菌病快速诊断试纸及其制备方法。所述诊断试纸，包括载体板、样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述吸水垫、硝酸纤维素膜、样品垫位分别于所述载体板的上端、中部和下端；所述金标垫载有金标鼠抗牙...
- 战文斌王欣茹唐小千绳秀珍邢婧
- 文献传递
- 中国明对虾血蓝蛋白的组织器官分布特点被引量：1
- 2013年
- 本文对实验室前期研制的抗中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)血蓝蛋白单克隆抗体进行特性分析,并以该单抗为第一抗体,采用石蜡切片、免疫组化方法,研究了血蓝蛋白在中国明对虾鳃、心、胃、中肠、淋巴器官、卵巢和肝胰脏等组织器官中的分布特点。结果表明:血蓝蛋白在鳃丝小叶边缘的微血腔、心肌束间隙、淋巴器官的淋巴腔中以及肝小管中阳性信号较强;在卵巢卵母细胞之间的血窦、胃内壁环肌层结缔组织的血窦和中肠结缔组织血窦中有阳性信号。结论认为,中国明对虾血蓝蛋白阳性信号大多来自血淋巴而非实质组织,且在血淋巴含量多、血流量大的部位含量丰富,在某些血淋巴无法到达的部位(肝小管内壁)也有血蓝蛋白分布,血蓝蛋白含量的这种组织特异性与各组织器官的功能有着密切的联系。
- 卢君辉邢婧唐小千战文斌
- 关键词：中国明对虾血蓝蛋白单克隆抗体
- 兔抗对虾白斑症病毒(WSSV)独特型抗体的制备及其特性分析
- 以前期己制备的杭WSSV囊膜蛋白单克隆抗体4G9(Ab1)杂交瘤细胞生产小鼠腹水，腹水经辛酸-硫酸铵法、Protein G亲和层析法纯化后，用以制备兔抗血清，所得血清经纯化得到粗提的兔抗WSSV独特型抗体(Ab2)。采用...
- 韦秀梅绳秀珍唐小千邢婧战文斌
- 关键词：独特型抗体对虾白斑症病毒DOT-BLOT间接免疫荧光法
- 文献传递
- 一种牙鲆海豚链球菌GAPDH串联多表位多肽及其应用
- 本发明提供一种牙鲆海豚链球菌GAPDH串联多表位多肽及其应用，所提供的串联多表位多肽，是用多肽接头连接的四个抗原表位肽；其中四个抗原表位肽的氨基酸序列分别为SEQ ID NO:1‑4。所提供的串联多表位多肽，其一种具体的...
- 绳秀珍刘敏战文斌唐小千邢婧
- 文献传递
- 牙鲆T淋巴细胞表面标志分子CD8α抗体及其制备方法和应用
- 本发明涉及一种牙鲆T淋巴细胞表面标志分子CD8α抗体及其制备方法和应用，属于鱼类分子免疫学技术领域。上述牙鲆T淋巴细胞表面标志分子CD8α的多克隆抗体，是由氨基酸序列为：APRVIASTRSPSLT的牙鲆CD8α抗原表位...
- 邢婧田洪飞战文斌唐小千绳秀珍迟恒
- 鳗弧菌免疫诱导牙鲆IL-1β、IFN-γ和TNF-α基因表达变化被引量：1
- 2018年
- 黏膜免疫是鱼类免疫系统的重要组成部分。多聚免疫球蛋白受体(p Ig R)能够介导黏膜抗体的转运和分泌,而细胞因子IL-1β、IFN-γ和TNF-α对p Ig R表达具有调节作用。本研究利用实时荧光定量PCR技术(q PCR)测定了牙鲆(Paralichthys olivaceus)组织中TNF-α、IL-1β和IFN-γ基因的表达动态。结果显示:浸泡和腹腔注射两种免疫方式皆可诱导3种基因发生显著上调表达;3种基因的上调表达在96 h内先上升,后降低到对照组水平,其中IL-1β和IFN-γ的上调幅度高于TNF-α,免疫后在牙鲆组织内的表达量分别比对照组高10~60倍和6~30倍,而TNF-α仅比对照组高2~4倍;不同免疫方式诱导的牙鲆各组织中3种基因的应答表达存在差异,浸泡免疫对黏膜免疫组织皮肤和鳃中的基因表达影响较大,显著上调达到峰值的时间短且峰值高,而注射免疫对系统免疫组织脾、头肾以及肝脏中的基因表达影响较大,其中在脾和头肾中注射免疫引起的IL-1β和IFN-γ的变化分别比对照组高50~60倍和30倍,浸泡组比对照组分别高15倍和10倍;前肠、中肠和后肠中,两种免疫方式诱导的3种细胞因子的上调表达量相近或浸泡组稍低。这些结果为进一步研究鱼类细胞因子IL-1β、IFN-γ和TNF-α对p Ig R的表达调节提供了资料。
- 钱晓宇王占飞绳秀珍唐小千邢婧战文斌
- 关键词：牙鲆鳗弧菌白介素1Β多聚免疫球蛋白受体
- 实时荧光定量PCR检测克氏原螯虾体内白斑症病毒(WSSV)的动态变化被引量：6
- 2015年
- 本文建立了白斑症病毒（WSSV）实时荧光定量PCR标准曲线，结果显示其线性关系良好，利用建立的WSSV实时荧光定量PCR技术检测感染了WSSV后克氏原螯虾（Procambarus clarkii）组织内病毒数量的时序动态变化。注射WSSV粗提液感染克氏原螯虾，在感染后0h、3h、6h、12h、24h、36h、48h、60h和72h分别取螯虾鳃、血淋巴、心脏、附肢、造血组织和肌肉，提取组织DNA，实时荧光定量PCR测定WSSV浓度，发现感染后3h在附肢、鳃、血淋巴和造血组织中检测到病毒，12h时在各组织中皆检测到病毒，但浓度较低；24~48h内WSSV浓度呈指数增长，此时螯虾出现少量死亡；60~72h内WSSV数量缓慢增长达到平台期，螯虾累计死亡率快速升高。不同组织中的WSSV浓度有较大差异，附肢中浓度最高，血淋巴、鳃、心脏和造血组织稍低，肌肉中WSSV浓度最低；附肢中WSSV动态变化代表了WSSV增殖变化规律，是很好的病毒检测与病程进展评估材料。本文结果可为WSSV的早期诊断提供技术支持，为阐明WSSV感染增殖规律提供资料。
- 张玲唐小千绳秀珍战文斌
- 关键词：病毒增殖
- 菌苗浓度、浸泡时间及高渗处理对牙鲆免疫接种效果的影响研究
- 浸泡免疫是一种便捷有效的鱼类疫苗接种途径,而浸泡策略与参数的优选与优化可有效提升疫苗的接种效果.本论文以4种不同浓度的迟钝爱德华氏菌灭活菌苗(106,107,108,109CFU ml-1)对牙鲆进行3个不同时间长度的浸...
- 唐小千杜杨高迎丽战文斌
- 关键词：牙鲆免疫接种
