宋蕾
- 作品数：34 被引量：126H指数：7
- 供职机构：第四军医大学西京脑科医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大鼠脑创伤后小胶质细胞激活的时程及形态变化研究被引量：11
- 2006年
- 目的探讨大鼠脑创伤后小胶质细胞激活的时程及形态变化。方法采用改良的Feeney等人的方法造成大鼠颅脑损伤模型,21只SD大鼠随机分为对照组和创伤组,后者根据伤后处死时间点不同,再分为伤后1h,6h,12h,24h,48h和72h组,每组动物3只,在伤后不同时间点处死动物,取伤区脑组织行抗OX-42免疫组织化学染色。结果正常大鼠脑内小胶质细胞一般为静息状态,OX-42为阴性,在切片上不易发现或细胞形态不清晰;伤后1h,小胶质细胞为轻度反应,OX-42浅染,细胞形态隐约可见,不规则;伤后6h,小胶质细胞反应明显,由静息状态变为早期反应状态,OX-42深染,细胞形态清楚;伤后12h,小胶质细胞反应达高峰,细胞形态更清楚,突起上可见到小棘;24h以后,反应减弱,OX-42浅染,细胞数量减少。结论大鼠脑创伤后小胶质细胞被激活,细胞形态发生改变,海马区亦有激活改变;反应的时程变化是伤后1h出现激活,6h反应明显,12h达高峰,以后逐渐减弱。
- 周杰章翔蒋晓帆高大宽常洪波梁景文宋蕾
- 关键词：脑创伤小胶质细胞免疫组织化学
- 靶向存活素基因短发卡RNA对人脑胶质母细胞瘤U251细胞在裸鼠体内生长的影响
- 2006年
- 目的观察靶向存活素基因的特异性短发卡 RNA(shRNA)对人脑胶质母细胞瘤 U251细胞裸鼠体内肿瘤生长和血管形成的影响。方法将 U251细胞、稳定转染存活素基因 shRNA 真核表达载体 pWH1-SR 的 U251细胞(U251-SR 细胞)、稳定转染空载体 pWH1的 U251细胞(U251-P 细胞),分别接种于15只裸鼠背部皮下,每组5只,观测肿瘤生长情况。采用免疫组化 SABC 方法检测存活素、增殖细胞核抗原(PCNA)以及第八因子相关抗原(FⅧRAg)在各组肿瘤标本中的表达;采用TUNEL 方法检测凋亡细胞,分别计算各组肿瘤标本的增殖指数(PJ)、凋亡指数(AI)以及微血管密度(MVD)。结果与 U251、U251-P 组相比,U251-SR 组裸鼠肿瘤形成时间延迟,肿瘤生长缓慢,肿瘤体积及重量均明显减小(P 均<0.01);肿瘤标本存活素蛋白表达明显下调;PI 和 MVD 明显减少,AI 明显升高(P 均<0.01)。结论靶向存活素基因的 shRNA 能够在裸鼠体内明显抑制 U251细胞的肿瘤生长和血管形成。
- 甄海宁章翔师长宏杨彤涛付洛安章薇王西玲高大宽胡世颉宋蕾
- 关键词：胶质瘤RNA干涉短发卡RNA
- 白藜芦醇对脑创伤后小胶质细胞激活的影响被引量：9
- 2007年
- 目的检测白藜芦醇治疗后大鼠脑损伤区激活小胶质细胞的形态及数量改变,以探讨白藜芦醇的脑保护机制。方法健康雄性SD大鼠75只,随机分为创伤组、对照组和治疗组,每组分伤后3、12、24、48和72h共5个时间点,各时间点每组5只动物,用改良Feeney自由落体法致伤动物。治疗组予以白藜芦醇(50mg/kg体重)腹腔注射,对照组给予等量生理盐水,创伤组未给予药物处理。分别于伤后各时间点麻醉动物,取伤区脑组织,用抗OX-42免疫组化法检测小胶质细胞变化。结果伤后早期小胶质细胞即被激活,在不同时间点小胶质细胞形态不同:正常大鼠脑内小胶质细胞处于静息状态,细胞形态不清晰;伤后3h,OX-42浅染,小胶质细胞形态可见;伤后12h,小胶质细胞反应明显,OX-42深染,细胞形态清楚;伤后24h,小胶质细胞反应达高峰,细胞形态清晰,突起上可见到小棘;48h以后,反应减弱,OX-42浅染,细胞数量减少。治疗组小胶质细胞数量明显减少(P<0.05),创伤组与对照组无明显差异(P>0.05)。结论伤后不同时间点激活小胶质细胞的形态和数目不同,白藜芦醇能抑制小胶质细胞的激活,具有脑保护作用。
- 周杰章翔蒋晓帆章薇高大宽常洪波宋蕾
- 关键词：白藜芦醇小胶质细胞脑保护
- 小鼠胚胎神经干细胞在猫全脑缺血再灌注损伤模型中的存活、迁移及分化被引量：4
- 2007年
- 目的观察小鼠神经干细胞在猫全脑缺血再灌注损伤模型中的存活、迁移及分化。方法参照四血管阻塞法建立猫全脑缺血再灌注损伤模型,将原代培养的小鼠神经干细胞移植入模型动物脑中。一个月后,以免疫荧光技术检测移植干细胞的存活、迁移及分化情况。结果缺血再灌注损伤模型制作成功7例,成功率70%;免疫荧光法检测小鼠神经干细胞移植到猫前脑后一个月仍有大量存活,部分细胞分化为神经元或神经胶质细胞,并向脑组织中迁移。结论小鼠神经干细胞在猫全脑缺血再灌注损伤模型中能够存活、迁移并分化。
- 林绿标章翔林旭妍李侠宋蕾梁景文
- 关键词：神经干细胞全脑缺血模型免疫荧光法
- 能全力在神经外科昏迷患者早期营养支持中的应用被引量：7
- 2002年
- 早期营养支持对神经外科昏迷患者的康复有着十分重要的作用。但在实际应用上,各单位尚存在不同的做法。许多人注重早期肠外营养,只是到昏迷患者的康复后期才采用肠内营养,且多是牛奶、混合奶等无渣全流食,这很容易导致患者出现腹胀、腹泻和便秘等不良反应。实际上,临床研究已证实,在早期应用肠外营养的同时酌情辅以肠内营养,对减少并发症、降低患者死亡率和缩短病程有很大益处。现今有多种肠内营养液可供选择,其中,能全力营养素完善、均衡,生物利用度高,已获得了广泛认可。从2001年1月至12月,我科对40例昏迷患者早期采用能全力进行鼻饲,收到了良好的效果,现报告如下。
- 覃仕英张永琴谢莉张红英蔡艳丽宋蕾
- 关键词：能全力神经外科早期营养支持昏迷肠营养
- RNA干扰基因敲除MAGE-1在恶性胶质瘤U87细胞中的初步研究被引量：6
- 2006年
- 目的:通过构建抑制MAGE-1的短片段双链核糖核酸(siRNA)表达载体,鉴定其在人恶性胶质瘤细胞U87细胞中对MAGE1基因表达的干涉作用。方法:化学合成2对编码短发夹RNA序列的靶向MAGE1基因核苷酸链,克隆至经BglⅡ、HindⅢ双酶切的pSUPER载体上,重组构建核糖核酸干扰(RNAi)质粒载体。利RTPCR、流式细胞术和荧光显微镜,检测经稳定转染后胶质瘤U87细胞中MAGE-1的表达,以了解siRNA的干效果。结果:重组构建的pSUPERMAGE1载体经双酶切、电泳及插入基因片段序列分析,表明寡核苷酸链成地插入至预计位点,且序列与预期完全一致。稳定转染后G418筛选出的U87多克隆细胞MAGE-1的表达RTPCR、流式细胞术和荧光显微镜检测,2对siRNA均有较明显的干扰作用。结论:载体的成功构建并能对U细胞中的MAGE1分子进行RNAi,为进一步研究MAGE1在肿瘤中的作用,分析基因功能,展开肿瘤基因治疗奠了基础。
- 程光章翔鲍炜张赟张新海曹卫东高大宽宋蕾
- 关键词：PSUPER核糖核酸干扰胶质瘤
- 小鼠脑Willis环的解剖及其对局灶性脑缺血模型的影响被引量：6
- 2006年
- 目的:研究小鼠W illis环的解剖结构,为不同种系小鼠局灶性脑缺血模型提供解剖学依据。方法:雄性昆明小鼠和Balb/C小鼠各20只,各随机等分成两组即分别为K1、K2、B1、B2组。K1和B1组经左心室灌注墨汁乳胶液约2m l,去骨取脑,观察颈内动脉及W illis环的结构。K2和B2组采用插线法制作永久性大脑中动脉栓塞(M CAO)模型,术后1h和24h观察并记录小鼠神经功能评分后,取脑并切成2mm厚片,2%TTC染色,运用图像分析系统对梗死体积进行统计分析。结果:昆明小鼠后交通动脉多发育良好,90%有完整的W illis环;而Balb/C小鼠后交通动脉多发育不良或缺失,90%W illis环不完整。昆明小鼠M CAO模型梗死灶仅波及大脑中动脉供血区,24h症状轻,生存率100%;而Balb/C小鼠M CAO模型梗死灶波及大脑中动脉和大脑后动脉供血区,24h症状重,病死率40%。结论:小鼠M CAO模型的梗死灶大小与W illis环的结构密切相关;昆明小鼠与Balb/C小鼠比较,更适宜制作永久性M CAO模型。
- 高大宽章翔蒋晓帆彭雅滨章薇王西玲宋蕾
- 关键词：小鼠
- 针对MAGE-1的pSUPERRNAi系统的构建
- 2006年
- 目的构建抑制MAGE-1的siRNA表达载体。方法化学合成2对编码短发夹RNA序列的、靶向MAGE-1基因的寡核苷酸链,各64个碱基,退火,克隆到经BglⅠ、HindⅢ双酶切的pSUPER载体上,重组构建RNAi质粒。通过双酶切鉴定及基因片段序列分析验证构建效果。结果重组构建的pSUPER-MAGE-1载体经双酶切电泳分析及插入基因片段序列分析,结果表明64个碱基成功插入到预计位点,并且序列完全一致。结论载体的成功构建,为进一步研究MAGE-1在肿瘤中的功能打下基础,可用于分析基因功能、肿瘤治疗等。
- 程光章翔张赟鲍炜曹卫东高大宽宋蕾
- 关键词：PSUPERSIRNARNAIMAGE-1
- 小鼠神经干细胞对胶质瘤趋向性实验研究被引量：4
- 2007年
- 目的探讨小鼠神经干细胞(NSCs)在体外和体内对胶质瘤细胞的趋向性。方法将原代培养6d的小鼠NSCs悬液离心、收集备用。制备C6胶质瘤细胞、3T3成纤维细胞爬片,随后与NSCs共同培养3d。用荧光染料Hoechst33342标记NSCs,借助立体定向技术于胶质瘤动物模型内接种NSCs,观察NSCs在胶质瘤动物模型脑内的分布情况。结果小鼠NSCs对C6细胞有明显的趋向性。体内实验见肿瘤组织内满布标记的NSCs。结论小鼠NSCs无论在体外或体内对胶质瘤细胞均有一定的趋向性。
- 姬西团章翔刘卫平费舟张剑宁蒋晓帆宋少军宋蕾梁景文
- 关键词：神经干细胞胶质瘤小鼠
- 大鼠弥漫性脑损伤后Homer1a及1b/c蛋白表达及意义被引量：3
- 2005年
- 目的研究大鼠弥漫性脑损伤后Homer1蛋白3种亚型表达规律及其意义。方法SD大鼠105只,体重(300±25)g,分为正常组、假手术组和弥漫性脑损伤(DBI)组,DBI组应用Marmarou大鼠DBI模型致伤,假手术组不予以自由落体打击,其余处理同DBI组,分别在损伤后30min及1、6、12、24、72、168h取大鼠主要脑区及核团进行Homer1a、1b/c蛋白分子的免疫组织化学和免疫印迹分析检测。结果两种检测方法均发现损伤组神经组织中Homer1a蛋白自伤后30min起表达,持续至伤后168h,而正常及假手术组未见该蛋白阳性表达,而Homer1b/c于正常组、假手术组及损伤组均可见明确的阳性表达。结论大鼠弥漫性脑损伤后Homer1a蛋白的表达于损伤前后有显著变化,而Homer1b/c于损伤前后无明显变化,提示Homer1a蛋白分子参与了神经元损伤修复过程。
- 史铁钧费舟章翔宋蕾王西玲梁景文
- 关键词：HOMER免疫印迹技术弥漫性脑损伤
