张烁
- 作品数:4 被引量:10H指数:2
- 供职机构:华南农业大学兽医学院人兽共患病防控制剂国家地方联合工程实验室更多>>
- 发文基金:国家肉鸡产业技术体系建设专项广东省科技计划工业攻关项目广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 鸡α干扰素基因真核表达载体pCAGGS-IFN-α的构建及其在293T细胞中的表达被引量:2
- 2014年
- 为了构建鸡α干扰素基因真核表达载体,试验采用RT-PCR方法从鸡胚成纤维细胞中扩增α干扰素基因序列,将扩增产物定向插入到pMD18-T克隆载体中,进行序列测定;测序正确的质粒经EcoRⅠ和SacⅠ双酶切,将目的基因片段定向克隆到真核表达载体pCAGGS中,构建重组质粒pCAGGS-IFN-α;将重组质粒转染293T细胞,使用间接免疫荧光、Western-blot等方法检测目的蛋白。结果表明:已成功扩增出582 bp大小的鸡α干扰素基因片段,测序结果与GenBank报道的序列基本一致。说明阳性重组质粒pCAGGS-IFN-α真核表达载体构建成功,能正确表达鸡α干扰素。
- 龚浪林宏文崔进宋亚芬张烁邢凯祥李梦徐成刚焦培荣廖明
- 关键词:真核表达
- 鸽TLR7基因的克隆、鉴定及表达分析被引量:3
- 2014年
- 【目的】克隆鸽Toll样受体(Toll-like receptor 7,TLR7)全基因,预测其主要功能区域并分析在鸽的各种组织中的表达情况.【方法】通过RT-PCR、RACE、相对荧光定量PCR、生物信息学软件分析方法进行研究.【结果和结论】研究发现鸽TLR7基因cDNA全长3 516 bp,ORF全长3 175 bp,编码1 048个氨基酸.其蛋白结构主要由胞外的富含亮氨酸的结构域(LRRs)、跨膜域(TM)和胞内的Toll/白介素-1受体结构域(TIR)3部分构成.鸽TLR7基因编码的氨基酸序列与鸿雁Anser cygnoides、绿头鸭Anas platyrhynchos、鸡Gallus gallus和麻雀Taeniopygia guttata的相似性均高于78%,与哺乳动物的相似性约为60%,与鱼类的相似性低于55%.鸽TLR7基因在小肠、脾脏、肾脏、肝脏中表达量较高,而在大脑、肺脏、气管、心脏、胰腺、肌肉、皮肤中表达量相对较低.该研究克隆了鸽TLR7全基因,并预测其主要功能区域.
- 韩翡焦培荣韦良孟何静宋亚芬康银峰崔进张烁廖明任涛
- 关键词:受体表达
- 不同致病性的H5N1高致病性禽流感病毒诱导番鸭的免疫反应
- 从2002年起,H5N1禽流感病毒开始对水禽产生致病性,这是极不寻常的,是对正常的生态环境的破坏.2005年,在中国西部的青海省青海湖爆发的H5N1禽流感可以对多种水禽致死.流感病毒的致病性是由多种因素决定,主要取决于病...
- 韦良孟宋亚芬曹蓝袁润余龚浪崔进张烁焦培荣廖明
- H6N6亚型禽流感病毒广东分离株分子遗传演化分析被引量:5
- 2014年
- 2010年至2011年在中国广东地区活禽交易市场进行流行病学调查时,在鸭咽和泄殖腔拭子中分离到2株H6N6亚型禽流感病毒,分别命名为A/Duck/Guangdong/C45/2010(H6N6)、A/Duck/Guangdong/C120/2011(H6N6)。应用RT-PCR分别对2株毒株的8个基因片段进行了克隆、测序与分析,结果表明:2毒株的HA裂解位点附近的氨基酸序列为P-Q-I-E-T-R-G,只有1个碱性氨基酸,符合低致病性禽流感病毒HA裂解位点附近的氨基酸序列特征;与2毒株HA基因相似性最高的毒株为A/Duck/Guangxi/GXd-5/2010(H6N1),与NA基因相似性最高的毒株分别为A/Duck/Fujian/3242/2007(H6N6)和A/Duck/Fujian/6159/2007(H6N6)。全基因组分子遗传演化分析表明,2毒株的8个基因片段均属于欧亚谱系的禽源演化分支;但HA基因属于ST2853-like分支,NP基因属于HN573-like分支,PB2、PB1、PA、M和NS基因属于ST339-like分支,说明本研究中的2株病毒为不同基因群间基因交换的重组病毒。因此,有必要加强H6亚型禽流感病毒流行病学调查以便及时关注其遗传变异与致病性进化,为中国禽流感的预防与控制提供数据支持和理论指导。
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- 关键词:禽流感病毒