张颖妹
- 作品数:111 被引量:396H指数:14
- 供职机构:北京大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学理学化学工程更多>>
- 大鼠趋化素样因子1对主动脉平滑肌细胞的趋化作用和增殖促进作用被引量:6
- 2006年
- 目的:探讨大鼠趋化素样因子1(rat chemokine-like factor 1,rCklf1)对大鼠主动脉平滑肌细胞(aortic smooth muscle cells,ASMC)的趋化作用和促增殖作用。方法:将rCklf1真核细胞表达载体瞬时转染293T细胞,收获培养上清液,分析rCklf1对大鼠ASMC的趋化作用。同时,用3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四唑 (MTT)实验分析rCklf1真核细胞表达载体瞬时转染细胞上清液以及rCklf1在细胞内瞬时超表达对ASMC增殖的影响。结果:rCklf1真核细胞表达载体瞬时转染的293T细胞培养上清液对大鼠ASMC具有趋化作用,10倍稀释的转染上清液所趋化的细胞数是对照组的2.2倍,这种趋化作用可以被浓度为10μg/L的百日咳毒素(pertussis toxin, PTX)抑制。同时,rCklf1对ASMC有促增殖作用,10倍稀释的rCklf1真核细胞表达质粒瞬时转染上清液和rCklf1 在细胞内瞬时超表达均可以促进ASMC的增殖,光密度值分别为对照组的1.3和1.5倍。结论:rCklf1对大鼠 ASMC具有促增殖作用和依赖于Gi蛋白偶联受体(Gi protein coupled receptor,GiPCR)的趋化作用,可能参与动脉粥样硬化的病理过程。
- 娄雅欣刘雅楠宋泉声张颖妹
- 关键词:趋化因子类肌细胞平滑肌
- 人TFAR19的定点突变及其重组蛋白的表达、纯化和功能分析被引量:7
- 2000年
- 目的 :了解凋亡相关新基因TFAR19编码蛋白分子中潜在的Ser10 0 磷酸化位点与其促凋亡效应的关系。方法 :利用重叠延伸PCR定点突变技术构建TFAR19Ser10 0 →Ala10 0 突变体 ,用DNA测序技术验证 ,大肠杆菌表达 ,离子交换技术纯化重组突变蛋白 ,将其加入培养的白血病细胞株HL 6 0 ,通过PI染色 ,流式细胞仪分析 ,观察突变重组蛋白的促凋亡效应。结果 :构建成TFAR19Ala10 0 突变体 ,并经DNA测序所证实 ,在大肠杆菌中获得了高水平表达 ,Westernblot表明突变型重组蛋白与野生型具有相同的免疫学活性 ,流式细胞仪分析发现突变蛋白对撤除血清的HL 6 0细胞具有与野生蛋白相似的剂量依赖性促凋亡效应。结论 :TFAR19分子中潜在的Ser10 0 磷酸化位点对其促凋亡效应无影响 。
- 曹志敏张颖妹陈英玉马大龙
- 关键词:TFAR19点突变氧化磷酸化重组蛋白质
- 突变型[^(12)Asp]K-ras4B基因的致瘤作用及其机制的探讨被引量:1
- 2002年
- 背景与目的:有资料提示K-ras基因突变可能与子宫内膜癌的发生有关。本研究在发现子宫内膜腺癌HEC-1A细胞有K-ras基因第12密码子突变的基础上,探讨犤12Asp犦K-ras4B突变基因的致瘤性及其发生机制。方法:(1)用RT-PCR方法扩增犤12Asp犦K-ras4B基因全长cDNA,将此cDNA插入真核表达载体pcDI,构建pcDI-犤12Asp犦K-ras4B真核表达质粒;(2)观察真核表达质粒pcDI-犤12Asp犦K-ras4B转染前后细胞形态学改变,用MTT方法、3H掺入实验、集落形成实验检测转染前后细胞体外生长的变化,以及用转基因肿瘤细胞裸鼠异种接种成瘤实验,了解犤12Asp犦K-ras4B的致瘤作用。结果:(1)成功构建了真核表达质粒pcDI-犤12Asp犦K-ras4B。(2)通过转染前后细胞形态学变化、体外增殖变化、软琼脂集落形成实验以及裸鼠皮下转染细胞接种实验,证明犤12Asp犦K-ras4B基因具有致瘤作用。(3)将pCMV-RasN17质粒转染到pcDI-犤12Asp犦K-ras4B细胞,与未转染细胞比较,发现pcDI-犤12Asp犦K-ras4B细胞增生受到明显抑制。(4)分别将pCMV-RafS621A和pCMV-RafCAAX质粒转染到pcDI-犤12Asp犦K-ras4BNIH3T3细胞,与未转染的细胞比较,转染pCMV-RafS621A质粒的pcDI-犤12Asp犦K-ras4B细胞增殖受到抑制,与对照组比较差异显著(P<0.05);转染pCMV-RafCAAX质粒的pcDI-犤12Asp?
- 桂黎明魏丽惠张颖妹王建六王应陈英马大龙
- 关键词:RAS基因
- 人重组血管生成素在大肠杆菌的表达与鉴定被引量:5
- 1996年
- 利用PCR技术从人肝细胞文库中扩增出血管生成素(Ang)的cDNA,将其连入大肠杆菌表达载体后,在大肠杆菌成功地表达出人重组的Ang融合蛋白和Ang非融合蛋白,表达量占菌体蛋白的25%,有明显的促进新生血管生成作用和RNA酶及L929细胞粘附活性。
- 王露马大龙张颖妹袁勇宋泉声王玉刚李建远
- 关键词:血管生成素大肠杆菌RNA酶
- 人重组蛋白PDCD5在治疗自身免疫病中的应用
- 本发明提供一种人重组蛋白PDCD5在治疗自身免疫病中的应用。人重组蛋白PDCD5能够诱导CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞分化、抑制Th17细胞的分化、抑制炎症细胞因子IL-17A和TNF-α的产生,具有免疫抑制...
- 陈英玉马大龙肖娟宋泉声张颖妹许兰俊许冬
- 文献传递
- 人硫氧还蛋白存在不同的选择性剪切形式被引量:7
- 1998年
- 利用RT_PCR技术、基因克隆化和基因表达技术 ,首次在人胎肝细胞中发现了人硫氧还蛋白 (hTRX)的另外一种选择性剪切形式 (hTRXδ3) .经测序证实hTRXδ3缺失正常hTRX第 3外显子的 6 0bp ,无其他编码区域改变 ,其酶活性位点依然存在 .经大肠杆菌表达重组蛋白的活性分析 ,hTRXδ3依赖DTT催化胰岛素还原的活性明显低于完整的hTRX蛋白 .
- 王应王玉刚张颖妹袁勇马大龙
- 关键词:人硫氧还蛋白选择性剪切大肠杆菌
- 人类基因FAM96A及其蛋白质的应用
- 本发明公开了检测FAM96A-vl蛋白质表达的试剂在制备检测乳腺癌的检测剂中的应用,检测FAM96A蛋白质表达的试剂在制备检测上皮来源肿瘤预后的检测剂中的应用。也公开了FAM96A-vl基因所表达的蛋白质或该基因的激动剂...
- 王露金鹏王兰兰马大龙张颖妹宋泉声
- CTRP4蛋白质作为制备治疗炎症性疾病或自身免疫性疾病的药物的应用
- 本发明公开了一种CTRP4蛋白质作为制备治疗炎症性疾病或自身免疫性疾病的药物的应用。本发明的上述应用可以制备有效地治疗炎症性疾病或自身免疫性疾病的药物。
- 王露马大龙马壮那达翔王兰兰罗阳张颖妹
- 文献传递
- 人硫氧还蛋白及其变异体对TF-1和NFS60细胞的凋亡抑制和促增殖效应被引量:5
- 2000年
- 目的 :比较rhTRX与rhTRXδ3对细胞因子依赖株TF 1细胞、NFS6 0细胞撤除细胞因子所诱导凋亡的抑制及促细胞增殖作用。方法 :在大肠杆菌中克隆并表达重组hTRX和hTRXδ3,纯化rhTRX与rhTRXδ3蛋白 ,FACS检测凋亡细胞 ,MTT法检测细胞增殖。结果 :在依赖IL 3、GM CSF生长的TF 1细胞 (人红白血病细胞 )和依赖G CSF生长的NFS6 0细胞 (小鼠白血病细胞 )撤除细胞因子后 ,加入rhTRXδ3比加入rhTRX能更有效地抑制这两种细胞的凋亡并有促增殖的作用。结论 :重组hTRX和hTRXδ3有着不同的生物活性 。
- 王应狄春辉张颖妹宋泉声马大龙
- 关键词:硫氧还蛋白肿瘤细胞
- 人凋亡相关蛋白TFAR19在细胞凋亡过程中的核转位研究
- <正> TFAR19(TF-1 cell apoptosis related gene 19,TFAR19)是本研究室克隆出的一个拥有自己知识产权的人类新基因。最近,国际人类基因命名委员会建议命名为PDCD5(progr...
- 陈英玉孙荣华韩文玲张颖妹宋泉声狄春辉马大龙
- 文献传递