战晓微 作品数:10 被引量:75 H指数:5 供职机构: 沈阳农业大学植物保护学院 更多>> 发文基金: 质检公益性行业科研专项项目 国家质检总局科技计划项目 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 医药卫生 理学 更多>>
食源性病原菌耐药性多重PCR检测及其溯源研究 本文利用纸片扩散法、PCR-琼脂糖凝胶电泳法、PCR-变性高效液相色谱(Denaturing High Performance Liquid Chromatography, DHPLC)法、实时荧光PCR法以及基质辅助激... 战晓微关键词:金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 耐药性 文献传递 食源性致病菌沙门氏菌MALDI-TOF MS溯源分析 被引量:17 2013年 利用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)检测食源性致病菌沙门氏菌属细菌。通过MALDI-TOF MS主成分分析及聚类分析等方法,对不同血清型、不同地区来源及不同宿主的74株沙门氏菌进行溯源研究。结果显示74株沙门氏菌中相同宿主或地区来源的菌株MALDI-TOF MS肽指纹图谱相似性较好,相同宿主或地区来源的沙门氏菌菌体蛋白表达更为相似。表明沙门氏菌分离宿主及地区来源可能影响沙门氏菌的菌体蛋白表达,MALDI-TOF MS可作为沙门氏菌检测和溯源分析的工具。 郑秋月 战晓微 徐杨 傅俊范关键词:沙门氏菌 沙门氏菌MALDI-TOF-MS检测方法的建立 被引量:26 2011年 建立利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对食品中沙门氏菌的快速检测方法。从食品中分离出可疑沙门氏菌,利用不同培养基分离纯化,通过MALDI-TOF-MS法进行鉴定,并与其他检测方法比较。MALDI-TOF-MS对野生沙门氏菌株的鉴定结果与传统鉴定结果一致,说明本试验建立的方法对于沙门氏菌的鉴定准确性较高。MALDI-TOF-MS方法检测食品中沙门氏菌快速准确且操作简单,可发展成为食品检验沙门氏菌的重要辅助工具。 战晓微 傅俊范 郑秋月 王长文 曹际娟关键词:沙门氏菌 沙门氏菌MALDI-TOF MS分型方法建立 被引量:12 2014年 沙门菌(Salmonella)是一种重要的食源性致病菌,其抗原结构复杂,根据Kauffmann-White抗原表中O抗原和H抗原分型,沙门菌具有2 500多个血清型。沙门菌在不同地区分布不同的菌型,地区分布差异大,目前全球已知有2 489个不同血清型,分属于46个O群。截止2000年底,中国只检出292个血清型,分属于35个O群[1]。 郑秋月 战晓微 肖珊珊 曹际娟关键词:沙门菌 食源性MRSA氨基糖苷类耐药基因多重PCR方法建立 2015年 目的:了解食源性金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)及对氨基糖苷类庆大霉素、卡那霉素抗生素的耐药性情况,并建立快速检测鉴定金黄色葡萄球菌耐药性多重PCR方法。方法:对金黄色葡萄球菌进行增菌培养,并提取DNA作为模板,以nuc基因作为菌属鉴定基因,mec A基因作为MRSA检测基因,aac A-aph D及aph(3')-Ⅲa基因作为耐氨基糖苷类庆大霉素、卡那霉素的检测目的基因,建立四重PCR检测方法并进行特异性及灵敏度评价;利用所建立的方法检测72株食品及食物中毒患者来源的金黄色葡萄球菌。结果:成功建立四重PCR检测方法,且72株金黄色葡萄球菌均有nuc基因检出,mec A基因与MRSA检测符合率达100%,aac A-aph D、aph(3')-Ⅲa基因与庆大霉素、卡那霉素耐药菌株的符合率达95.12%。结论:本实验所建立的多重PCR方法灵敏度高、特异性好,可以快速检测出MRSA,并对氨基糖苷类庆大霉素、卡那霉素耐药菌株检测具有较高的准确率。 战晓微 郑秋月 傅俊范 徐君怡 陈璐 董姝君关键词:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 氨基糖苷类 耐药基因 食源性MRSA双色荧光PCR检测方法建立 被引量:3 2015年 目的建立快速检测食源性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)Taqman探针双色荧光PCR方法。方法根据金黄色葡萄球菌种属鉴定nuc基因和MRSA决定因子mec A基因,设计合成引物探针,建立双色荧光PCR扩增体系。利用所建立的方法检测特异性及灵敏度。将金黄色葡萄球菌依次传代培养,检测不同代次的菌株验证方法的稳定性,并对实际样品分离株进行检测验证方法的可行性与实用性。结果该方法可准确并特异性检测出MRSA和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(methicillin-susceptible Staphylococcus aureus,MSSA),检测MRSA的nuc基因和mec A基因的灵敏度可达2.7×103 CFU/m L,不同代次的菌株的检测结果一致。结论本实验所建立的双色荧光PCR检测方法具有良好的特异性、灵敏度及稳定性,可用于快速检测食源性MRSA。 郑秋月 战晓微 那晗 徐君怡 曹际娟关键词:食源性 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性及SCCmec基因分型研究 被引量:7 2014年 目的了解大连地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药性及其葡萄球菌盒染色体SCCmec的基因型特点。方法采用纸片扩散法检测MRSA对抗菌药物的耐药性;聚合酶链反应(PCR)对SCCmec进行基因分型。结果分离出的38株MRSA菌株均具有多重耐药性,但对万古霉素和氯霉素较为敏感。SCCmec基因型以Ⅱ型最为常见,占86.84%;其次为Ⅲ型,占10.53%;未定型的占2.6%。结论大连地区分离出的MRSA具有多重耐药的特征,SCCmec基因型以Ⅱ型为主。 战晓微 郑秋月关键词:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 耐药性 聚合酶链反应 食源性金黄色葡萄糖球菌耐氨基糖苷类药物基因的多重PCR快速检测技术 被引量:8 2015年 为研究食源性金黄色葡萄球菌中MRSA及对氨基糖苷类庆大霉素、卡那霉素抗生素的耐药性情况,并建立快速检测鉴定金黄色葡萄球菌耐药性多重PCR方法。对金黄色葡萄球菌进行增菌培养,并提取DNA作为模板,以nuc基因作为菌属鉴定基因,mecA基因作为MRSA检测基因,aac(6')-aph(2'')及aph(3')-Ⅲa基因作为耐氨基糖苷类庆大霉素、卡那霉素和妥布霉素的检测目的基因,建立四重PCR检测方法并进行特异性及灵敏度评价;利用所建立的方法检测19株金黄色葡萄球菌的分离株。结果表明:对19株金黄色葡萄球菌分离株的PCR检测结果与纸片扩散法的检测结果一致。所建立的多重PCR方法灵敏度高、特异性好,可以快速检测出MRSA,并对氨基糖苷类庆大霉素、卡那霉素、妥布霉素耐药菌株检测具有较高的准确率。 战晓微 郑秋月 傅俊范 徐扬 那晗关键词:MRSA 氨基糖苷类抗生素 多重PCR MALDI-TOF MS方法快速鉴定大肠杆菌及ESBLs菌株检测探索研究 被引量:4 2015年 目的研以基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)方法检测大肠杆菌,并利用MALDI-TOF MS方法鉴别ESBLs菌株及聚类分析法区分不同分型的ESBLs菌株,探索MALDI-TOF MS方法鉴定大肠杆菌及ESBLs菌株的可行性。方法利用MALDI-TOF MS采集47株大肠杆菌分离株的质谱数据,生成肽指纹图谱,并利用biotyper软件进行菌种鉴定,同时研究其耐药性鉴定结果,并利用聚类分析法研究大肠杆菌ESBLs菌株,最终确定MALDI-TOF MS对大肠杆菌菌种鉴定及ESBLs菌株鉴别的可行性。结果 MALDI-TOF MS方法鉴定大肠杆菌的结果与传统方法及PCR方法检测结果均符合,经MALDI-TOF MS鉴定方法提示为ESBLs菌株的10株大肠杆菌中有9株为ESBLs菌株,且聚类分析法对OXA型ESBLs大肠杆菌具有较好的鉴别能力。结论MALDI-TOF MS方法可以快速、准确地鉴定大肠杆菌,对ESBLs菌株具有一定的筛选鉴别能力。 战晓微 杜影 王宏伟 吴远高 郑秋月关键词:大肠杆菌 超广谱Β-内酰胺酶 食品中鲍鱼过敏源基因成分的检测 被引量:2 2015年 目的本文建立食品中鲍鱼过敏源基因成分实时荧光PCR检测方法。方法采用蛋白酶K消化法提取鲍鱼肌肉组织中基因组DNA,针对鲍鱼管家基因16S r RNA基因设计特异性引物和探针,确定实时荧光PCR反应体系和反应条件,建立了鲍鱼过敏源基因成分实时荧光PCR快速检测方法。选用鱿鱼、海参等海产品进行特异性试验;采用添加方法制备灵敏度试验样品,分别制备了鲍鱼过敏源基因成分含量分别为100%、10%、1%、0.1%、0.01%、0.001%的样品。结果对非鲍鱼类食品进行检测,结果显示出良好的特异性;灵敏度试验表明,本文建立方法的最低检测下限为0.01%。结论本文建立了特异性好,灵敏度高的鲍鱼过敏源基因成分检测方法。 徐杨 孙瑶 杜影 战晓微 郑秋月关键词:食品