曾琴兵
- 作品数：6 被引量：13H指数：3
- 供职机构：郧阳医学院附属东风医院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金湖北省科技攻关计划湖北省教育厅重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重组人红细胞生成素促进体外培养的人骨髓间充质干细胞增殖被引量：1
- 2008年
- 为了观察重组人红细胞生成素(rhEPO)对人骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖活性的影响,抽取健康志愿者的骨髓液,贴壁培养获取第3代细胞,通过细胞形态特征、细胞表面抗原及诱导分化的方法进行MSCs鉴定;取经过鉴定的第3代MSC(P3-MSC)加入不同浓度rhEPO(0.5、1、5、10、50U/ml)后培养,应用细胞计数法及MTT法检测细胞增殖,用流式细胞术(FCM)分析细胞周期。结果发现:骨髓贴壁培养获取的第3代细胞同时表达CD105和CD90,不表达CD34和CD45,并可被诱导分化为脂肪、骨及软骨细胞,被鉴定为MSC。MTT结果显示EPO处理组的光密度值(OD)均高于对照组(p<0.05);50U/ml浓度EPO组作用最显著,细胞计数法获得的结果与其一致。FCM细胞周期分析表明,rhEPO能明显降低G0/G1期细胞比例,并提高S+G2/M期细胞比例,与对照组相比,差异均具有显著统计学意义(p<0.01)。结论:EPO能促进体外培养的人骨髓MSCs增殖,该效应与EPO调节其进入细胞增殖周期有关。
- 曾琴兵程范军张卫国唐俊明陈龙刘歧焕高清平王家宁
- 关键词：红细胞生成素间充质干细胞细胞周期
- 粒细胞集落刺激因子促进骨髓源间充质干细胞活性的机制被引量：3
- 2009年
- 本文旨在探讨粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor,G-CSF)促进骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)活性的机制。采用经典的全骨髓贴壁法培养MSCs,通过成骨、成脂肪等多向诱导分化以及流式细胞仪分析其表面标记(CD133、CD34、CD90、CD105)等鉴定MSCs特征;以第三代MSCs为实验材料,采用MTT法分析G-CSF(20μg/mL)对MSCs活性的影响。随后以50nmol/L wortmannin(磷酰肌醇-3激酶阻断剂)、50μmol/LPD98059(细胞外信号调节激酶阻断剂)、30μmol/LSB203580(丝裂原活化蛋白激酶阻断剂)、10μmol/LH89[蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)抑制剂]、20μmol/LY27632(Rho激酶特异抑制剂)、1μmol/Lrapamycin[雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)特异性阻断剂]、10mmol/L straurosporine[蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)阻断剂]、6nmol/LG0697(PKCα抑制剂)、50μmol/L Pseudo Z(PKCζ抑制剂)等分别处理MSCs,观察G-CSF影响MSCs活性的信号机制。结果显示,培养的第三代MSCs呈现出CD90、CD105强阳性,具有成骨、成脂肪等多向分化能力;G-CSF促进MSCs活性,H89、Y27632、PseudoZ不能抑制G-CSF对MSCs的激活作用,wortmannin、rapamycin、PD98059、SB203580、G0697部分抑制G-CSF对MSCs的激活作用,straurosporine可完全抑制G-CSF对MSCs的激活作用。以上结果提示,G-CSF激活MSCs效应与AKT-mTOR-PKC途径密切相关,且PKC处于中心环节。
- 陈龙程范军刘岐焕唐俊明曾琴兵孔霞郭凌郧王家宁
- 关键词：粒细胞集落刺激因子间充质干细胞蛋白激酶C
- 重组人促红细胞生成素促进体外培养的人骨髓间充质干细胞增殖被引量：4
- 2009年
- 目的观察重组人促红细胞生成素（rhEPO）对人骨髓间充质干细胞（MSCs）增殖的影响，并探讨其可能机制。方法抽取健康志愿者的骨髓液，采用贴壁培养法获取第3代MSCs（P3-MSCs），通过细胞形态特征观察、细胞免疫表型检测以及诱导分化的方法鉴定MSCs。取经过鉴定的P3-MSCs，分别与不同浓度（0．5、1、5、10、50IU／ml）rhEPO共培养，应用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞增殖；以过量特异性抗体封闭EPO受体（EPOR），再用MTT法观察P3-MSCs增殖情况；采用免疫荧光细胞化学染色法检测P3-MSCs的EPOR表达，用Western印迹检测增殖信号通路蛋白表达。结果贴壁培养获取的P3-MSCs同时高表达CD105和CD90，低表达CD34和CD45，并可被诱导分化为脂肪、成骨及软骨细胞。MTT结果显示，给予EPO后，MSCs的增殖明显增强，以浓度为10IU／ml者的作用最为显著；同时加入抗EPOR抗体封闭EPOR后，MsCs的增殖率明显降低（P〈0．01）。P3-MSCs的EPOR表达阳性；用10IU／ml EPO刺激4d后，EPOR、磷酸化蛋白酪氨酸激酶2（pJAK2）及磷酸化信号转导和转录因子-5（pSTAT-5）的表达均明显上调。结论EPO能促进体外培养的骨髓MSCs增殖，该效应经EPOR介导，并与JAK2-STAT5信号途径有关。
- 曾琴兵程范军陈龙唐俊明刘歧焕张卫国高清平王家宁
- 关键词：红细胞生成素骨髓间质干细胞
- 红细胞生成素对骨髓源间充质干细胞迁移的影响被引量：1
- 2008年
- 目的利用Transwell体外迁移体系初步探索EPO在骨髓源间充质干细胞（MSC）迁移中的作用及其信号传递机制。方法采用经典的全骨髓细胞贴壁法培养MSC，通过成骨、成脂肪等多向诱导分化以及流式细胞术分析其表面标志（CD133、CD34、CD90、CD105）等鉴定MSC特征；以第3代MSC为实验材料，利用Transwell体外迁移体系，先观察不同浓度的rhEPO对MSC迁移的影响，随后在50nm0L／L Wortmannin、50μmoL／LPD98059、10μmoL／LU73122、4μg／ml抗EPO—R IgG、30μmol/LSB203580、10mmol／L Straurosporine、6nmol/L G0697、50μmol/L Pseudo Z等不同的信号转导途径阻断剂的干预下观察EPO对迁移的影响。结果培养的MSC呈现出CD90、CD105强阳性，具有成骨、成脂肪等多向分化能力；MSC体外迁移能力随着rhEP0浓度（1、10、100、1000IU／ml）的递增而逐渐增强，并且rhEP0浓度在100U／ml时，MSC迁移到滤膜上的细胞数接近于峰值；Wortmannin、PD98059、抗EPO—RIgG、Straurosporine、G06976、Pseudoz对MSC迁移均有影响，其中U73122、抗EPO—RIgG、Straurosporine、PseudoZ对MSC迁移阻断的效应最显著。结论EPO—EPO—R所介导的MSC迁移与丝裂原活化蛋白激酶、磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C和蛋白激酶C-ζ（PKC-ζ）等信号传递途径有关，且PKC-ζ途径可能处于中心环节。
- 陈龙程范军唐俊明张卫国刘歧焕曾琴兵孔霞郭凌郧王家宁
- 关键词：间充质干细胞迁移蛋白激酶C信号转导
- 睾丸原发的NK/T细胞淋巴瘤1例报告并文献复习被引量：4
- 2009年
- 目的:探讨睾丸原发的NK/T细胞淋巴瘤的临床和病理特征及有效的诊治措施。方法:报道1例睾丸原发的NK/T细胞淋巴瘤,对手术标本行光镜观察、免疫组化检查及EB病毒DNA的PCR分析,并进行文献复习。结果:患者表现为无痛性左侧睾丸肿大,有向对侧睾丸、脾、中枢神经系统(CNS)等部位播散的自然倾向;肿瘤细胞免疫表型为CD56、CD45RO、CD3ε阳性,CD20、CD79α、CD5、Bcl-2、胎盘碱性磷酸酶(PLAP)均为阴性;PCR检测肿瘤细胞EB病毒DNA为阳性;病理诊断为左侧睾丸NK/T细胞淋巴瘤。结论:睾丸原发的NK/T细胞淋巴瘤罕见,病情进展快,应尽早行病理组织学、免疫组化、EB病毒相关检查及T细胞受体(TCR)基因重排研究以确定诊断,目前治疗效果差,需探索新的治疗策略以提高生存率。
- 曾琴兵程范军高清平朱正鹏刘岐焕鱼强吕建
- 关键词：淋巴瘤NK细胞T细胞睾丸CD56
- 以睾丸病变为首发的NK／T细胞非霍奇金淋巴瘤一例
- 2008年
- 患者，男，29岁。因左侧睾丸肿大不适伴发热半月余，于2007年2月2日入院。既往有肺结核病史。查体：轻度贫血貌。心肺未见异常。肝脾肋缘下未触及。左侧阴囊明显增大，皮肤无结节及溃烂，左侧睾丸肿大，约8cm×5cm×3cm，触诊表面光滑、无压痛、质地硬实；附睾肿大，约3cm×2cm×1cm，质软，无压痛。右侧睾丸、附睾触诊无异常。阴囊透光试验阴性。
- 曾琴兵程范军朱正鹏刘岐焕鱼强吕建
- 关键词：非霍奇金淋巴瘤NK/T细胞睾丸病变首发睾丸肿大透光试验阴性
