曾锦绣
- 作品数：2 被引量：16H指数：2
- 供职机构：华南农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金教育部高等学校骨干教师资助计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 昆虫抗真菌肽Thanatin-CAD双价基因的合成、克隆及其表达被引量：12
- 2003年
- 为促进昆虫抗菌肽基因在转基因抗病育种和生物工程制药的应用,通过设计嵌合引物结合分段PCR的方法将抗真菌肽Thanatin基因与Cecropin AD基因(CAD基因)融合拼接为Thanatin-CAD双价基因,采用T-A克隆法将其克隆至pGEM-T Easy载体,进行测序,结果证实与预期设计的完全一致;然后再将其亚克隆至表达载体pET-21d中,用IPTG诱导含重组表达质粒的菌株,对表达产物进行生物活性测定,初步结果显示Thanatin-CAD双价基因的融合表达产物对受试细菌无抑菌活性,但对部分病原真菌有较强的抑菌作用。
- 黄亚东曾锦绣温硕洋王艳李校坤钟仰进曹阳
- 关键词：昆虫抗真菌肽基因合成基因克隆融合基因病原真菌抑菌作用
- 昆虫抗真菌肽Thanatin基因的合成及原核表达被引量：7
- 2002年
- 斑腹刺益蝽 (Podisusmaculiventris)抗真菌肽Thanatin是目前发现的 6种昆虫抗真菌肽之一 ,对真菌具有广谱的免疫诱导杀菌活性 ,由 2 1个氨基酸残基组成 ,对革兰氏阳性和阴性细菌也有一定的杀菌作用。根据已报道的抗真菌肽Thanatin基因的氨基酸序列 ,推导出cDNA序列 ,采用基因片段合成结合PCR扩增的策略 ,获得大量完整的Thanatin基因片段 ,通过T A克隆法克隆至pGEM TEasy载体 ,进行测序 ,结果证实合成的Thanatin基因与预期设计的完全一致。然后将其亚克隆至表达载体pET 2 1d中。经IPTG诱导表达后 ,采用RNA DNA点杂交和RT PCR检测具Thanatin基因插段的RNA转录表达活性 ,初步结果显示该融合表达产物对烟曲霉菌 (Aspergillusfumigatus)和绿色木霉菌 (Trichodermariricle)
- 黄亚东王艳温硕洋曾锦绣曹阳李校坤钟仰进
- 关键词：昆虫抗真菌肽基因表达抑杀作用
