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朱宏伟
作品数:
3
被引量:2
H指数:1
供职机构:
长春生物制品研究所
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相关领域:
生物学
化学工程
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合作作者
王志武
长春生物制品研究所
周华
长春生物制品研究所
刘柱
长春生物制品研究所
盛君
长春生物制品研究所
张雪梅
长春生物制品研究所
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作者
3篇
周华
3篇
朱宏伟
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王志武
2篇
盛君
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万里
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刘柱
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姚为民
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赵大鹏
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王宣军
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张雪梅
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陈梅
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2篇
中国生物制品...
年份
1篇
2001
1篇
2000
1篇
1997
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3
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IL-2与绿脓杆菌外毒素A嵌合蛋白的研究
被引量:1
2000年
目的获得IL-2绿脓杆菌外毒素A嵌合蛋白,用于相关疾病的治疗。方法用PCR方法扩增分 离IL-2和PEA的基因,将IL-2基因的3’端与绿脓杆菌外毒素A基因的5’端连接后克隆至pBV220上,转化大肠杆菌 DH5a。挑取菌落培养,快速提取质粒进行酶切,并在温控条件下表达。结果经鉴定,获得重组质粒pBV/IL-2/ PEA。温控诱导表达后SDS-PAGE分析表明,在51 000处有蛋白表达带。以鼠抗人IL-2单克隆抗体经免疫印迹验 证,该表达蛋白为所设计的嵌合蛋白。结论本研究建立了一种制备IL-2/PEA嵌合蛋白的方法,该方法也可用于 表达其他蛋白。
刘柱
周华
姚为民
万里
张雪梅
王志武
石晓丽
郑辉
朱宏伟
盛君
周雪艳
陈宇
贺玉泉
周传开
关键词:
绿脓杆菌外毒素A
IL-2
基因重组
克隆
嵌合蛋白
IGF-1中试工艺的研究
盛军
赵大鹏
刘畅
王晓宇
蒙冲
戚凤春
万里
张雪梅
姚为民
王宣军
王志武
刘涛
朱宏伟
周华
刘延彬
王妍
该课题应用分子生物学技术构建了人肝脏cDNA文库,并从中分离、克隆了hIGF-Ⅰ基因组建了高效表达hIGF-Ⅰ的分泌型重组载体,筛选了高效表达hIGF-Ⅰ的工程菌株,并对工程菌株进行了全面鉴定。在此基础上,建立了独特的重...
关键词:
关键词:
IGF-1
中试工艺
人肝脏组织cDNA文库的构建及应用
被引量:1
1997年
用氯化铯-异硫氰酸胍超速离心法(CsCl2-GTC)提取肝检组织总RNA,用mRNA提取试剂盒分离mRNA。将分离得到的mRNA在逆转录酶存在的条件下,合成cDNA的第一链;在大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ和RNaseH存在的条件下,合成cDNA的第二链。在引物设计上,引进M13M4引物及EcoRⅠ酶切位点,同时含有Olygod(T)8。为了验证合成的cDNA文库的可靠性,我们设计了几对引物用于PCR扩增TPO和IGF-1基因。实验结果表明,PCR有效地扩增分离出TPO和IGF-1基因。经酶切鉴定和DNA序列分析证实,该序列与文献报道完全一致。该cDNA文库的构建成功,为今后分离和克隆肝细胞产生的细胞因子打下了基础;同时也为从分子水平上研究肝细胞的生物学功能提供了重要材料。
盛君
朱宏伟
赵大鹏
王志武
陈梅
刘柱
周华
王宣军
安伟
关键词:
CDNA
肝细胞
CDNA文库
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