朱森林
- 作品数：38 被引量：126H指数：7
- 供职机构：中山大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金高等学校骨干教师资助计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 优化构建UreB/HpaA双价幽门螺杆菌减毒活菌疫苗的免疫保护作用被引量：18
- 2003年
- 目的 以减毒鼠伤寒沙门菌为载体 ,通过在UreB和HpaA间引入由 3个甘氨酸残基组成的三肽柔韧接头 ,构建成UreB/HpaA双价抗幽门螺杆菌 (Hp)活疫苗 ,并对照相应单价疫苗和空白载体研究其对C5 7BL/6小鼠的免疫保护效果。方法 用序列重叠延伸聚合酶链反应扩增带 3个甘氨酸残基柔韧接头的融合基因ureB/hpaA ,进一步以减毒鼠伤寒沙门菌SL32 6 1为载体构建UreB/HpaA双价活疫苗 ,观察其在小鼠体内的稳定性。用双价活疫苗株免疫Ⅱ级C5 7BL/6小鼠 1次 ,对照单价活疫苗和空白载体观察其在体内诱导的特异抗体反应和对小鼠的免疫保护作用。结果 测序结果显示 ,3个甘氨酸残基的编码序列GGTGGAGGC已成功地插入UreB/HpaA融合基因中。双价疫苗灌喂小鼠后 ,至少能在脾脏和回肠末段存留 10d。双价疫苗在小鼠体内诱导血清特异性IgG1和IgG2a水平明显升高。UreB/HpaA双价疫苗的免疫保护率为77.3% (17/2 2 ) ,而UreB疫苗和HpaA疫苗的免疫保护率分别为5 0 .0 % (12 /2 4 )和 4 3.5 % (10 /2 3)。结论 引入柔韧接头 ,优化构建表达UreB和HpaA的双价抗Hp活疫苗。UreB/HpaA双价活疫苗对Ⅱ级C5 7BL/6小鼠有更好的免疫保护作用。
- 朱森林陈旻湖陈洁焦志勇李国庆陈为彭晓忠胡品津
- 关键词：UREBHPAA免疫保护作用
- 表达ureB/hlyE融合蛋白的重组减毒鼠伤寒沙门疫苗菌预防幽门螺旋杆菌感染被引量：3
- 2005年
- 目的:建立表达幽门螺杆菌(H pylori)尿素酶B亚单位(UreB) 与血溶素E(hlyE)融合蛋白的减毒沙门疫苗菌,并利用H pylori小鼠感染模型,研究该疫苗菌对H pylori感染的免疫保护作用. 方法:利用分子克隆技术构建携带ureB/hlyE融合基因的重组原核表达质粒pTrc99A—ureB/hlyE,经PCR及酶切鉴定后测定其基因序列,并与GeneBank中相关序列进行同源性比较.pTrc99A—ureB/hlyE转化减毒伤寒沙门菌SL3261, 培养后筛选阳性菌落,抽提质粒进行PCR及酶切鉴定.表达的UreB/hlyE融合蛋白SDS—PAGE电泳和Western-blotting 进行鉴定,薄层扫描分析蛋白含量.实验小鼠随机分成4组, 分别灌胃给予生理盐水组、减毒鼠伤寒沙门菌SL3261组、携带pTrc99A—ureB的SL3261组、携带PTrc99A—ureB/hlyE 的SL3261组.免疫后4 wk,予H pylori 107 CFU/只进行攻击(生理盐水组不攻击).攻击4wk后处死动物,取胃组织分别行改良Giemsa染色及定量细菌培养,观察H pylori定植情况. 结果:核苷酸序列测定及同源性分析证实,原核表达质粒pTrc99A—ureB/hlyE中所含的H pylori—ureB及hlyE基因与GeneBank中的H pylori-ureB和hlyE基因同源性分别为97.42% (1 663/1 707)、99.78%(910/912).重组减毒沙门氏菌可表达约100 ku的融合蛋白UreB/hlyE,含量占全菌体蛋白含量的15%;表达的融合蛋白能与小鼠抗H pylori血清特异性反应,具有良好的免疫原性.动物实验证实,疫苗组同空白对照组和SL3261组相比,H pylori定植密度明显下降,有显著性差异(P<0.05).表达UreB/hly蛋白的疫苗株组同表达UreB蛋白的疫苗株相比,H pylori定植密度明显下降,差异有统计学意义(P<0.05). 结论:重组疫苗菌对小鼠H pylori感染具有一定免疫预防作用,hlyE可以增强疫苗株的免疫保护效果.
- 焦志勇陈旻湖朱森林李国庆胡品津
- 关键词：融合蛋白幽门螺旋杆菌感染HPYLORIHPYLORI尿素酶B亚单位生理盐水组
- 内皮素-1在脂多糖致大鼠门脉高压症中作用的体外研究被引量：2
- 2007年
- 目的:研究内皮素-1(ET-1)在脂多糖致门脉高压中的作用及其机制。方法:分离、纯化大鼠星状细胞,培养在胶原凝胶上,应用ET-1-ASON和LPS序贯共培养(实验组),以正义、错义ASON作为对照,检测凝胶收缩情况;应用放射免疫法检查培养上清液的ET-1浓度;免疫印迹法检测各组细胞α-actin表达情况;RT-PCR检测各组细胞ET-1表达情况。结果:实验组的孔胶原直径缩小至93.3%±3.8%,胶原直径较对照组大(P<0.05);实验组HSC培养基上清液ET-1为(49.8±7.4)ng/L,显著低于对照组(P<0.01);实验组HSC表达β-ac-tin较对照组弱;实验组HSC表达ET-1 mRNA显著低于对照组(P<0.01)。结论:ET-1在脂多糖致门脉高压中通过抑制星状细胞活化而起重要作用,ET-1-ASON在控制脂多糖致门脉高压中具有应用前景。
- 毕向军陈旻湖陈文红陈为王锦辉朱森林
- 关键词：脂多糖类内皮缩血管肽1寡核苷酸类反义
- 表达幽门螺杆菌NAP基因的减毒沙门菌疫苗株的建立被引量：2
- 2003年
- 目的 :建立表达幽门螺杆菌 (H .pylori)中性粒细胞活化蛋白(Hp NAP)的减毒沙门菌疫苗株。方法 :用PCR扩增Hp NAP基因 ,并克隆至原核表达质粒 pTrc99A中 ,经PCR及酶切鉴定后测定其基因序列 ,并与GenBank中相关序列的同源性进行比较。以重组质粒 pTrc99A NAP转化减毒伤寒沙门菌SL32 6 1,培养后筛选阳性菌落 ,抽提质粒进行PCR及酶切鉴定。表达的Hp NAP蛋白用SDS PAGE进行鉴定 ,用薄层扫描分析蛋白含量。结果 :核苷酸序列测定及同源性分析证实 ,克隆的Hp NAP基因与GenBank中相关序列的同源性为98% (397/40 2 ) ,氨基酸序列的同源性为 98% (131/133)。以重组质粒pTrc99A NAP转化的减毒沙门菌 ,可表达Mr 约15 0 0 0的Hp NAP蛋白 ,表达量约占菌体蛋白量的 37.5 %。结论 :建立了可表达Hp NAP基因的减毒鼠伤寒沙门疫苗株 ,为进一步研制Hp口服疫苗奠定了基础。
- 焦志勇陈旻湖朱森林李国庆陈洁胡品津
- 关键词：幽门螺杆菌减毒鼠伤寒沙门菌疫苗
- 幽门螺杆菌感染的免疫预防
- 2005年
- 陈旻湖朱森林
- 关键词：幽门螺杆菌感染免疫预防慢性活动性胃炎消化性溃疡
- PAX6在胃癌发病机制中的作用
- 一种在胃癌中高表达的潜在促癌基因(PAX6)，能够促进胃癌细胞的增殖以及抑制胃癌细胞的凋亡。并且发明了两对siRNA及慢病毒，可化学合成，具有沉默PAX6表达效率高，对胃癌有潜在治疗作用。
- 朱森林张译谢丹黄霖琳胡品津
- 文献传递
- 原发性胆汁性肝硬化患者肝脏和外周血自然杀伤细胞及其相关细胞因子的研究被引量：6
- 2009年
- 原发性胆汁性肝硬化（primary billiary cirrhosis，PBC）是一种自身免疫性疾病，肝内胆管是PBC时自身免疫攻击的靶目标，其发病机制尚不清楚。自然杀伤（NK）细胞在机体抗感染、抗肿瘤及免疫调节等方面发挥着重要功能；肝脏内50％的肝脏相关淋巴细胞是NK细胞，且这些NK细胞不参与淋巴细胞再循环。了解肝内NK细胞的变化特点有助于PBC发病机制的阐明。根据伦理学相关规定，不能与肝功能正常的肝穿刺组织比较。
- 唐映梅包维民夏华向尤丽英朱森林杨晋辉
- 关键词：原发性胆汁性肝硬化外周血自然杀伤细胞相关细胞因子肝硬化患者自然杀伤(NK)细胞
- 多组分重组减毒沙门疫苗菌对幽门螺杆菌感染的免疫保护作用被引量：7
- 2003年
- 目的 利用人类幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,Hp)感染的小鼠模型研究多组分重组减毒沙门疫苗菌对幽门螺杆菌感染的免疫保护作用。方法 将二级C5 7BL/ 6小鼠随机分成 6组 ,通过灌胃方法分别给予生理盐水 (A组 )、PBS(B组 )、减毒鼠伤寒沙门菌SL32 6 1(C组 )、重组减毒鼠伤寒沙门菌pTrc99A -ureB +pGSTag -katA(D组 )、重组减毒鼠伤寒沙门菌pTrc99A -ureB +pTrc99A -HPaA(F组 )及重组减毒鼠伤寒沙门菌 pTrc99A -ureB +pGSTag -katA +pTrc99A -HPaA(F组 )。免疫后 4周 ,予Hp进行攻击 (A组不攻击 )。攻击菌量 10 7CFU/只 ,灌胃 2次 ,每日 1。再 4周后处死动物 ,取胃组织分别行尿素酶试验、改良Giemsa染色及定量细菌培养 ,观察Hp定植情况。行HE染色观察胃粘膜组织炎症情况。取脾组织行淋巴细胞增殖试验。结果 A组小鼠Hp定植密度为 0 ,B组为 9 4 9× 10 6CFU/ g胃组织 ,C组为 1 4 2× 10 6CFU/ g胃组织 ,D组、E组和F组小鼠分别为 2 92× 10 5CFU/g、5 5 1× 10 5CFU/g和 2 16× 10 5CFU/g胃组织 ,C组、D组、E组和F组与A组和B组相比定植密度均明显降低 (P <0 0 5 )。免疫组与对照组胃粘膜均无明显炎症反应。免疫组脾淋巴细胞增殖试验阳性。结论 口服多组分重组减毒沙门疫苗菌对小鼠Hp感染具有一定免?
- 李国庆陈旻湖焦志勇陈洁朱森林陈为胡品津
- 关键词：幽门螺杆菌感染免疫保护作用
- 胶囊内镜在小肠疾病诊断中的价值被引量：10
- 2009年
- 目的探讨胶囊内镜对小肠疾病的诊断价值。方法2002年9月至2007年3月间对155例患者所进行的159例次胶囊内镜检查进行回顾性研究。记录胶囊内镜在胃和小肠的平均运行时间，评价患者的耐受性、胶囊内镜完成检查情况及胶囊内镜下病变的检出情况等。结果155例患者中，不明原因的消化道出血97例，腹痛42例，腹部不适6例，腹泻4例，体检6例。93．1％的患者（148／159）完成了全小肠摄影。所有患者在检查过程中未诉特殊不适。胶囊内镜胃内平均停留时间为65．5（1～335）min，小肠平均停留时间为282．2（45～524）min。胶囊内镜病变检出率为78．6％（125／159）。胶囊内镜发现血管病变43．4％（69／159），小肠炎性病变28．3％（45／159），黏膜下结节10．1％（16／159），小肠憩室8．2％（13／159），小肠肿物5．7％（9／159）以及小肠息肉、小肠异物、小肠寄生虫等。不明原因消化道出血病变检出率为89．7％（87／97），腹痛查因病变检出率为73．8％（31／42）。结论胶囊内镜检查安全性较高，患者容易接受。胶囊内镜对小肠疾病、尤其消化道不明原因出血者具有重要的诊断价值。
- 任明元刚朱森林曾志荣陈白莉陈旻湖胡品津
- 关键词：胶囊内镜小肠疾病胃肠出血
- 内皮素反义基因治疗门静脉高压症的研究被引量：1
- 2006年
- 目的研究内皮素-1反义寡核苷酸(ET1-ASON)在内毒素(LPS)致门静脉高压中的作用。方法应用 ET1-ASON 预处理后将 LPS 以1 mg/kg 体重腹腔注射大鼠,以正义、错义 ET1-ASON 和生理盐水作为对照,4 h 后检测大鼠 PVF、PVP、PVR 和 IVCP应用放射免疫法、RT-PCR 检测各组门静脉血和肝脏的 ET1表达情况。结果 ET1-ASON 处理组大鼠门静脉血浆和肝脏组织ET1表达减低;PVR 和 PVP 较对照组明显降低,PVF 无明显改变。结论 ET1-ASON 在内毒素致门脉高压中主要通过降低 PVR 起作用。
- 毕向军陈旻湖陈文红陈为王锦辉朱森林
- 关键词：内毒素内皮素-1反义寡核苷酸
