- 下颌第二磨牙C形根管及根管充填的研究现状被引量：7
- 2007年
- 尼娜李良忠张成飞
- 关键词：下颌第二磨牙根管充填C形根管根管治疗失败根尖周病变根充材料
- 氟对人成骨细胞TM9SF1和Ras mRNA表达的影响被引量：5
- 2009年
- 目的探讨氟对体外培养人成骨细胞中TM9SF1、RasmRNA表达的影响。方法采用原代细胞培养的方法培养人成骨细胞。取早期引产胎儿的骨组织，胶原酶消化、分离成骨细胞，加入DMEM培养液进行传代培养。将传代后的人成骨细胞按染氟剂量不同分为0（对照）、2．5、5．0、10．0、20．0mg／L组。染氟培养10d后，光镜下观察氟对人成骨细胞形态的影响；实时定量（RT）PCR法检测不同染氟剂量对体外培养人成骨细胞TM9SFI、Ras mRNA的表达影响。结果光镜下对照组和2．5mg／L组人成骨细胞呈长梭形、三角形或不规则多边形，有突起伸出，胞质透亮、饱满，相邻细胞彼此贴靠；20．0mg／L组人成骨细胞呈长梭形或不规则多边形，细胞数目明显减少、体积变大，一些细胞胞质出现了多个小空泡及颗粒样物质。不同染氟剂量对人成骨细胞TM9SF1 mRNA表达的影响，组间比较差异有统计学意义（F=322．82，P〈0．01）；其中2．5mg／L组（9326．0＋115．97）表达最高，随着染氟剂量增加，TM9SFImRNA表达降低，5．0、10．0、20．0mg／L组（6495．0±323．9、4387．5＋545．2、5962．5＋536．7）与对照组（9221．0＋107．5）比较，差异有统计学意义（P均〈0．01）。不同染氟剂量对人成骨细胞RasmRNA表达的影响，组间比较差异有统计学意义（F=703．28，P〈0．01）；其中对照组表达最高，随着染毒剂量的增加，RasmRNA表达减少，2．5、5．0、10．0、20．0mg／L组（6144．5±270．82、5603．5＋88．39、3181．0±159．81、4067．5±37．4）与对照组（6571．0±196．58）比较，差异有统计学意义（P均〈0．01）。结论氟影响人成骨细胞TM9SF1、RasmRNA的表达，表达量的高低与染氟剂量有关。
- 李良忠张宏印钟近洁周婷婷刘岳强刘开泰
- 关键词：氟化钠成骨细胞MRNARASMRNA
- 氟对成骨细胞中微小染色体维系蛋白3表达的影响被引量：3
- 2007年
- 目的探讨氟对体外培养成骨细胞中微小染色体维系蛋白3（minichromosome maintenance deficient3，MCM3）表达的影响。方法采用免疫组织化学技术、原位杂交技术以及SYBR GreenI嵌合荧光实时定量PCR（realtime RT-PCR）方法，检测不同剂量氟（0、5、10、20、40mg／L，处理10d）对体外培养成骨细胞中MCM3表达的影响。结果0、5、10、20、40mg／L各组细胞中均有MCM3蛋白及其mRNA表达，主要在细胞核中表达，与对照组比较，染氟实验组阳性表达强度高于对照组，阳性细胞数多于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05），其中10mg／L组阳性表达高于其他实验组（P〈0．05），呈现双向作用。real time RT-PCR检测显示，各组均可检测到MCM3mRNA．相对定量比由对照组到高剂量组约为102：259：145：135：100：染氟实验组中5、10、20mg／L组表达量高于对照组和40mg／L组，以5mg／L组表达量最高，随着染氟剂量增加，基因表达量降低。结论不同剂量氟对成骨细胞中MCM3表达的影响不同，低剂量氟可以促进MCM3的表达，随剂量增加氟的促进作用减弱。
- 钟近洁许永华姚华刘开泰李良忠许琴
- 关键词：氟成骨细胞
- Ⅸ型胶原的研究进展
- 2005年
- Ⅸ型胶原是一种由a1、a2和a3 3个不同的链通过链间的二硫键连接而成的三聚体形式的胶原蛋白分子.对经胃蛋白酶处理过的组织的提取物和小的蛋白聚糖进行的蛋白研究表明在软骨中存在特殊的胶原成分.通过分离Ⅸ型胶原多肽链及其编码的cDNA序列[1],构建了Ⅸ型胶原的结构模型,并且表明Ⅸ型胶原不同于经典的纤维性胶原(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型胶原).Ⅸ型胶原主要存在于透明软骨、玻璃体、腰椎间盘中,与腰椎间盘疾病、多发性骨骺发育不良及周围神经系统发育有相关性,而其与口腔颌面部软骨疾病的关系至今未见报道.本文就其研究进展作一综述.
- 曹冲李良忠
- 关键词：多发性骨骺发育不良腰椎间盘疾病CDNA序列神经系统发育透明软骨
- 正畸与义齿修复在伴有牙列缺损的成人错畸形中的联合应用被引量：14
- 2007年
- 目的:探讨伴有牙列缺损的成人错畸形的综合治疗方法。方法:回顾性分析16例接受正畸与义齿修复联合治疗患者的临床资料,16例患者先经牙体牙髓科、牙周科、颌面外科等前期综合治疗,再用正畸方法对缺损的牙列进行调整,创造良好的牙列及基本条件后,以修复的方法完成治疗。结果:16例患者经正畸与义齿修复联合治疗,恢复了牙列的完整及功能,取得了良好的临床效果。结论:对伴有牙列缺损的成人错畸形采用正畸和修复等多学科的联合治疗,才可以应对现代人们对口腔健康功能和美观的更高要求。
- 赵晓静李良忠丁锐
- 关键词：正畸错(牙合)畸形
- HPV感染及p16、Bcl-2、C-erbB-2、PCNA异常表达与涎腺肿瘤发生关系的研究
- 目的：探讨人乳头状瘤病毒HPV感染及抑癌基因P16、细胞凋亡抑制基因Bc1-2、原癌基因C-erbB-2、增殖细胞核抗原PCNA在涎腺肿瘤中的异常表达与肿瘤发生的生物学特征及临床病理间关系，为涎腺肿瘤的有效防治提供科学依...
- 李良忠
- 关键词：涎腺肿瘤人乳头状瘤病毒
- 文献传递
- 实时定量PCR检测氟对软骨细胞COLⅨA3基因表达的影响被引量：2
- 2007年
- 目的:探讨氟对体外培养软骨细胞中COLⅨA3基因mRNA的表达影响。方法:采用SYBR GreenⅠ嵌合荧光法进行实时定量PCR的方法,检测不同剂量氟对体外培养软骨细胞中COLⅨA3基因mRNA的表达影响,染氟剂量分别为0、5、10、20、40mg/L,染氟10d。结果:实时定量PCR检测显示各组均可检测到COLⅨA3mRNA,相对定量比由对照组到高剂量组约为:100:134:200:104:129,染氟实验组中5mg/L、10mg/L组表达量高于对照组和40mg/L组,且以10mg/L组表达量最高,是对照组的2倍。随着染氟剂量增加,软骨细胞COLⅨA3基因mRNA表达量降低。结论:不同剂量氟对软骨细胞中COLⅨA3基因mRNA表达的影响不同,低剂量氟可以促进COLⅨA3基因mRNA的表达,随剂量增加氟的促进作用减弱。
- 李良忠刘继文许永华刘开泰钟近洁许琴
- 关键词：实时定量PCR氟化钠软骨细胞
- 氟对体外培养软骨细胞超微结构的影响被引量：5
- 2009年
- 目的观察氟化物对体外培养乳鼠软骨细胞超微结构的影响。方法采用细胞培养的方法,原代培养昆明乳鼠软骨细胞,传第3代后按染氟剂量不同分为0(对照)、5、10、20、40mg/L组,染氟培养10d后,制备乳鼠软骨细胞超薄切片,透射电镜下观察软骨细胞的超微结构改变。结果电镜下5、10mg/L组软骨细胞增殖,双核细胞数量增多,细胞器发达,可见囊池扩张;20、40mg/L组细胞表面微绒毛减少,部分细胞染色质固缩,并凝结成块状,聚集在核膜周边,核基质密度下降,核膜迂回曲折,胞浆内线粒体空泡化,有些细胞胞浆内可见大量的囊泡,泡内含有电子致密物质;在40mg/L组中可见到凋亡细胞。结论高氟可以引起乳鼠软骨细胞超微结构的损伤。
- 李良忠张宏印刘开泰
- 关键词：氟软骨细胞超微结构
- 乳鼠软骨细胞体外培养及生物学特性研究
- 2006年
- 目的:研究体外培养乳鼠胸骨剑突软骨细胞的原代培养方法,探讨该方法应用的可行性和应用价值.方法:采用胶原酶消化法分离培养乳鼠胸骨剑突软骨细胞,以含20%胎牛血清的高糖DMEM培养液进行培养,并进行细胞接种与传代,用倒置显微镜、电镜及组织学方法观察细胞形态、超微结构.细胞采用ABC法进行Ⅱ型胶原免疫组化染色以及细胞形态观察鉴定软骨细胞起源.结果:(1)原代培养软骨细胞48 h后,大量细胞贴壁生长,呈圆形、长梭形或有2～3个突起,胞质透亮、饱满,7 d后细胞铺满整个培养皿底面.(2)原代软骨细胞呈圆形或多角形,第4代有一半变成梭形,第5代绝大部分变为长梭形;原代软骨细胞胞浆内粗面内质网和线粒体丰富,第3代软骨细胞生长增殖能力强于原代,第5代增殖能力明显减弱.结论:体外培养的乳鼠剑突软骨细胞保持了其体内的基本特征,采用胶原酶消化法分离培养软骨细胞是一种可靠、简便、快速的细胞原代分离培养方法.第3代软骨细胞适合用于软骨组织工程及学术研究.
- 李良忠张东辉许永华钟近洁李建瑛刘开泰
- 关键词：软骨细胞胶原酶原代培养
- 培养原代小鼠组织细胞检验细胞实验室技术操作规程被引量：1
- 2007年
- 目的通过培养小鼠原代组织细胞,检验本科室己建立的一套细胞实验室技术操作规程能否满足细胞培养要求。方法培养小鼠原代成骨细胞、软骨细胞、心肌细胞、肝细胞、肺部细胞、脑部细胞、骨髓间充质细胞和胚胎成纤维细胞。计算原代培养成活率、传代成活率、冷冻及复苏成活率。结果成骨细胞、软骨细胞、心肌细胞、肝细胞、肺部细胞、脑部细胞、骨髓间充质细胞、胚胎成纤维细胞原代培养成活率分别为89%、96%、100%、100%、100%、80%、100%和90%;传代成活率分别为76%、93%、100%、92%、100%、66%、80%和92%;冷冻及复苏成活率分别为100%、100%、100%、100%、100%、100%、100%和100%。结论通过计算KM小鼠8种组织细胞原代培养、传代、冷冻与复苏的成活率,证明现有的细胞室技术操作规程基本上能够保证成功培养出常规原代细胞,并能传代、冷冻和复苏。
- 张东辉许永华钟近洁李良忠李建瑛祝湘许琴是文辉
- 关键词：小鼠细胞原代培养
