汤华
- 作品数：9 被引量：48H指数：5
- 供职机构：上海医科大学更多>>
- 发文基金：美国中华医学基金会项目国家自然科学基金更多>>
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- 反义寡核苷酸抑制人急性早幼粒细胞白血病细胞增殖和蛋白表达
- 2001年
- 目的 :研究反义寡核苷酸 (antisenseoligonucleotides)对人体引起急性早幼粒细胞白血病的HL 6 0细胞增殖和蛋白质表达的抑制作用。方法 :设计和合成了不同序列、长度和核苷酸磷酸根上有无修饰的多种脱氧寡核苷酸片段 ,进行了对HL 6 0细胞的生长抑制和蛋白表达的抑制试验 ,也测定了它们对人体正常淋巴细胞的毒性。结果 :发现互补于C mycmRNA的 2个区域的反义寡核苷酸序列 (5′ 4 4 6 1和 5′ 556 576 )有较好的抑制效率 ,在一定时间内 ,HL 6 0细胞增殖抑制分别达到 59.5%和6 2 .7% ,并且它们对人体正常淋巴细胞无毒性作用。结论 :我们新设计的互补于 5′ 4 4 6 1序列片段对HL 6 0细胞增殖有抑制作用 ,有望发展成抑制HL 6 0细胞增殖的核酸药物。
- 裘慕绥陈健王德宝单易非汤华高红阳
- 关键词：反义寡核苷酸细胞增殖
- 亚硝胺诱发大鼠肝癌不同细胞组分中三类蛋白激酶的变化被引量：10
- 1994年
- 作者研究了正常大鼠肝三个亚细胞组分中酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）、蛋白檄酶Ａ（ＰＫＡ）和蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）的活力和亚硝胺诱发大鼠肝癌后这些蛋白激酶的变化。发现正常鼠肝中的ＴＰＫ的活力为胞核＞膜性结构＞胞液，ＰＫＡ为胞液＞膜结构＞胞核，而ＰＫＣ则为膜结构＞胞液＞胞核。在胞液的三类蛋白激酶中，ＰＫＣ＞ＰＫＡ＞ＴＰＫ；膜结构为ＰＫＣ＞ＴＰＫ＞ＰＫＡ；而胞核却以ＴＰＫ特别高，ＰＫＡ和ＰＫＣ的含量甚微。ＤＥＮ诱发大鼠肝癌１８周后，膜性和胞核ＴＰＫ升高，尤以膜性ＴＰＫ升高明显。但膜性ＰＫＡ则降低而胞核ＰＫＡ升高，胞液中ＴＰＫ和ＰＫＡ均无明显变化；而ＰＫＣ和ＴＰＫ相反，胞液中显著升高，膜性及胞核变化不大。其中ＰＫＣ的增高不是激活剂含量上升的结果。
- 汤华陈惠黎
- 关键词：亚硝胺肝肿瘤细胞蛋白激酶
- 大鼠诱发肝癌过程中N乙酰氨基葡萄糖转移酶V的高效液相层析测定被引量：7
- 1993年
- 提纯人血浆运铁蛋白(Tf),经链霉蛋白酶水解,再经肼解法制备Tf中的二天线N糖链,后者经还原末端的氨基吡啶(PA)化进行荧光标记,再切除外链的唾液酸和半乳糖残基,获得Gn_2Man_3Gn_2-PA荧光标记糖链,以此制备的糖链为受体底物,UDP-GlcNAc为供体底物,用反相HPLC分离底物和产物,建立了N乙耽氨基葡萄糖转移酶V(GnT-V)的测定法。用GnT-V作为肿瘤生化标志物,观察到在二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌的过程中,此酶在诱癌第4周轻度上升,第6周恢复,第10周后持续升高,至18周达正常鼠肝的20倍以上,与病理学上的癌变期相一致。
- 顾建新孟宪旺任建新汤华陈惠黎
- 关键词：肝肿瘤
- 视黄酸对人肝癌细胞的逆转作用——生物学研究被引量：16
- 1990年
- SMMC-7721人肝癌细胞株在10μmol/L的视黄酸(又称维甲酸,Retinoic Acid,RA)处理后,增殖明显受到抑制。RA作用后的细胞~3H-TdR总参入量明显下降,而单个细胞的~3H-TdR参入率却变化不明显。流式细胞仪分析表明该细胞株G_0/G_1、S及G_2+M期的百分率分别为49.6％、16.7％、33.7％,而RA处理3天的细胞则相应地为59.1％、15.4％、25.5％。经RA处理3天后,细胞染色体的主流范围由对照细胞的48—56转变为44—50,其中二倍体细胞数由4％上升至15％。
- 艾兆伟查锡■汤华陈惠黎
- 关键词：视黄酸肝癌细胞株药理学
- 化学诱发大鼠肝癌的亚细胞组分中两类丝氨酸蛋白激酶的动态变化
- 1994年
- 用二乙基亚硝胺（ＤＥＮ）诱发大鼠肝癌，隔周测定肝脏胞液、膜性和胞核中的蛋白激酶Ａ（ＰＫＡ）和蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）的活力。发现胞液ＰＫＡ在诱癌过程中活力改变不大，胞液ＰＫＣ则逐步增高，在第１３周和２０周形成两个活力高峰。膜性ＰＫＡ和ＰＫＣ都呈双相变化，即在癌前期（１０－１４周）增加，癌形成期（１７－２０周）反而降至正常以下，胞核ＰＫＡ和ＰＫＣ也都在癌前期升至高峰，而癌形成期则低于癌前期，但仍高于正常（ＰＫＡ）或接近正常（ＰＫＣ）。因只有膜性ＰＫＣ在大鼠老化时降低，故这些变化不是鼠龄变化的结果，而是ＤＥＮ诱癌所引起，其变化机理可能与下降调节、细胞内转位或两型同工酶相反的升降变化有关。
- 汤华陈惠黎
- 关键词：肝癌亚细胞组分丝氨酸蛋白激酶
- 核酶的抗病毒作用研究被引量：1
- 1994年
- 自然界核梅(Ribozyme)的发现已近10年,通过对其结构功能关系的研究,能够找出不同核酶的结构功能区域及其必需基因,同时进行分子改造,获得新的、高效的切割靶序列的核酶。本文简述了核酶的种类及两种目前常用于分子间切割核酶的分子结构,及其应用于抗病毒研究的近况。
- 汤华
- 关键词：核酶抗病毒
- 反义核酸对人白血病HL—60细胞中c—myc基因表达的抑制被引量：5
- 1997年
- 研究两个反义核酸（18mer，21mer）对人白血病HL—60细胞中c－myc基因表达的抑制作用。用HL－60活细胞计数，RNA含量的RT－PCR测定和c－myc基因蛋白的免疫组化染色检查。结果：两个反义寡核苷酸都能抑制HL－60细胞的增殖，增殖抑制率为11％～75％。反义核酸还抑制c－mycmRNA和Myc蛋白的表达，而对c－mcy基因正常表达的红白血病细胞K562的增殖和PHA刺激的人淋巴细胞的增殖没有影响。结论：反义寡核苷酸能抑制c－myc基因的过度表达。
- 汤华单易非高红阳周静芳
- 关键词：白血病反义核酸HL-60细胞C-MYC基因
- 反义寡核苷酸对HL60细胞c-myc基因表达的抑制和诱导分化作用被引量：5
- 1998年
- 目的研究ｃｍｙｃ反义寡核苷酸对ＨＬ６０细胞中ｃｍｙｃ基因的表达及ＨＬ６０细胞分化的影响。方法采用针对原癌基因ｃｍｙｃ的ｍＲＮＡ５’非翻译区的一个１８ｂｐ的反义寡核苷酸５’ｄ（ＣＴＴＣＴＣＧＡＧＧＣＡＧＧＡＧＧＧ）３’与人早幼粒白血病细胞系ＨＬ６０细胞共培养５ｄ，检测ｃｍｙｃｍＲＮＡ量的变化及其对ＨＬ６０细胞分化的影响。结果用ＮｏｒｔｈｅｒｎＢｌｏｔ检测出ＨＬ６０细胞ｃｍｙｃｍＲＮＡ的含量减少；细胞形态学变化以及非特异性酯酶（ＮＳＥ）染色、硝基四氮唑蓝（ＮＢＴ）还原试验均提示ＨＬ６０细胞出现了分化，部分细胞向粒细胞方向分化，部分细胞向单核细胞方向分化。结论ｃｍｙｃ反义寡核苷酸能够抑制ｃｍｙｃ基因的表达并能诱导ＨＬ６０细胞分化。
- 王松梅单易非高红阳汤华
- 关键词：C-MYC基因HL60细胞反义寡核苷酸分化
- 大鼠诱发肝癌过程中肝脏脂类的变化被引量：5
- 1991年
- 脂类是构成细胞内外膜质结构的主要成份。在维持膜结构完整性、信息的跨膜传递和调节代谢等方面起着十分重要的作用。恶性肿瘤时生物膜(包括表面膜、亚细胞膜等)的结构和功能均发生明显改变,导致细胞的各种恶性行为,而这些改变必然伴有脂类组成和代谢的改变。但过去对恶性肿瘤中的蛋白质、酶和核酸研究较多,对脂类则少报道。本实验室曾发现用Solt和Farber法诱发肝癌的鼠肝中,蛋白激酶C在癌前期即见明显升高。因磷脂在蛋白激酶C的调节中起关键作用,故研究肝癌中磷脂的代谢将有助于癌变机理的了解。本文系统地研究了二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝癌过程中,胆固醇和磷脂及其各组分含量的动态变化。
- 汤华陈惠黎Choy PC
- 关键词：肝癌二乙基亚硝胺
