沈松菲
- 作品数：34 被引量：79H指数：6
- 供职机构：福建医科大学附属协和医院更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金漳州市科技计划项目福建省科技创新平台建设项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- As/_2O/_3对急性淋巴细胞白血病Molt-4细胞系P15～（INK4b）基因的去甲基化实验研究
- P15~/(INK4b/)抑癌基因是近年来发现的位于染色体9P21上的新型抑癌基因，其表达产物P15蛋白是参与细胞周期调控的细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子/(CKI/)的重要成员。P15~/(INK4b/)抑癌基因的失活...
- 沈松菲
- 关键词：三氧化二砷急性淋巴细胞白血病MOLT-4细胞去甲基化
- 文献传递
- 5-Aza-CdR对胃癌中SOX17基因表达的影响
- 2024年
- 目的检测胃癌中SOX17的表达情况,探讨5-Aza-CdR对胃癌细胞SOX17表达的影响。方法采用免疫组织化学染色(immunohistochmeistry,IHC)法检测胃癌组织及癌旁组织中SOX17蛋白的表达情况,分析其表达与患者临床病理参数的关系。实时定量聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,Real-time PCR)和蛋白质印迹(Western blot)法检测胃癌细胞株MGC-803、MKN-45、AGS及正常胃黏膜细胞株GES-1中SOX17基因mRNA和蛋白的表达情况。甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)法检测胃癌细胞系SOX17基因启动子区甲基化情况。CCK-8法和流式细胞仪分别检测5-Aza-CdR对AGS细胞增殖和细胞周期的影响。结果与癌旁组织相比,胃癌组织SOX17蛋白阳性表达率明显降低(癌旁组织80.48%vs.胃癌组织19.51%,P<0.001),与胃癌患者性别、年龄、临床分期、分化程度、是否伴脉管癌栓无关。SOX17基因mRNA和蛋白在各胃癌细胞系表达明显降低(P<0.05),且在AGS细胞中表达最低。SOX17基因启动子区在AGS和MKN45细胞中均完全甲基化,MGC-803细胞部分甲基化,GES-1细胞完全非甲基化。去甲基化药物5-Aza-CdR可下调甲基转移酶的表达,逆转SOX17基因甲基化,使其mRNA和蛋白表达上调。5-Aza-CdR还可抑制AGS细胞的增殖并使细胞阻滞于G0/G1期。结论5-Aza-CdR可逆转胃癌细胞SOX17基因甲基化,上调其mRNA和蛋白表达,从而抑制胃癌的发生发展。
- 沈惠群沈松菲
- 关键词：胃癌甲基化
- 一种基于AllGlo^TM探针的侵袭性曲霉菌病诊断技术的建立与评价
- 2010年
- 目的建立并评价一种基于AllGlo^TM探针的侵袭性曲霉菌病诊断技术。方法对目标基因进行克隆化并制备成标准品，用自行设计的AllGlo^TM探针和引物对标准品进行核酸扩增，制定定量检测标准曲线，对方法的特异性、敏感性、重复性进行评价。结果黄曲霉和烟曲霉AllGlo^TM荧光核酸扩增的标准曲线分别为Y=-3．003X＋36．825和Y=-3．052X＋38．016，其批间变异系数分别为15．60％和12．94％，表示重复性良好，敏感性达10CFU／ml，相当于100-1000拷贝转录间隔区（ITS）2基因，与其他真菌、人类基因组及细菌无交叉阳性反应，特异性强。结论这种基于AllGlo^TM探针的侵袭性曲霉菌病诊断技术具有较好的重复性、特异性和较高的准确度。
- 吴淡森沈建箴周晓强沈松菲吴雪梅
- 关键词：曲霉菌病真菌核酸扩增技术
- 5-氮-2′-脱氧胞嘧啶对U266细胞系p16基因去甲基化作用研究被引量：5
- 2007年
- 目的探讨5-氮-2′-脱氧胞嘧啶(5-Aza-CdR)诱导骨髓瘤细胞系U266 p16基因DNA 5′CpG岛去甲基化作用及对U266细胞增生的影响。方法采用巢式甲基特异性PCR法(n-MSP)、DNA序列分析、RT-PCR、细胞生长曲线、流式细胞仪DNA含量分析法检测5-Aza-CdR对U266细胞p16基因去甲基化作用及其对U266细胞的生长、增生及细胞周期的影响。结果(1)5-Aza-CdR能够逆转U266细胞p16基因异常甲基化;(2)5-Aza-CdR能激活p16基因沉默的再转录;(3)5-Aza-CdR能下调U266细胞甲基转移酶DNMT1、DNMT3A、DNMT3B的表达并呈浓度依赖性;(4)5-Aza-CdR作用的U266细胞被阻滞于G_0～G_1期。结论5-Aza-CdR可能通过抑制甲基转移酶直接对p16基因去甲基化,逆转U266细胞DNA异常甲基化,并有效地激活因高甲基化所致p16基因沉默的再转录。
- 付海英沈建箴叶宝国沈松菲周华蓉范丽萍林福安
- 关键词：多发性骨髓瘤细胞系基因表达调控
- 全文增补中
- 砷剂对人骨髓瘤U266细胞系p16基因去甲基化诱导表达及其机制的研究
- 最近几年用砷剂治疗白血病引起关注。砷进人人体后还原发生甲基化,在甲基转移酶作用下,形成一甲或二甲砷酸而解毒。砷剂治疗与肿瘤抑制基因的甲基化有关,我们以人骨髓瘤(MM)细胞株U266为对象,用限制性内切酶PCR法、RT-P...
- 沈建箴傅海英沈松菲郑瑞玑
- 文献传递
- 巢式MSP检测砷剂诱导人多发性骨髓瘤U266细胞系p16基因去甲基化及转录被引量：10
- 2007年
- 本研究探讨用高灵敏度的DNA甲基化检测方法及DNA克隆测序分析法检测三氧化二砷(As2O3)的去甲基化作用,并对其可能的去甲基化作用机制进行分析。采用巢式甲基特异性PCR法(nested-methylation specificPCR,n-MSP)、DNA克隆测序分析法检测As2O3作用前后U266细胞株p16基因甲基化状态,应用RT-PCR检测p16、DNA甲基转移酶1(DNMT1)、DNMT3A、DNMT3B基因mRNA的表达,以生长曲线、MTT法、集落形成实验检测As2O3对骨髓瘤细胞生长和增殖的抑制作用。利用流式细胞仪DNA含量分析法探讨As2O3对多发性骨髓瘤细胞系U266周期的影响。结果表明:①未处理组U266细胞基因组DNA的胞嘧啶保持不变,而经As2O3作用的U266细胞基因组DNA的胞嘧啶均已变为胸腺嘧啶,这说明U266细胞存在p16基因甲基化,As2O3作用后p16基因异常甲基化的现象被逆转;②未处理组细胞p16基因不表达,As2O3作用72小时后p16基因表达增强,0.5μmol/L组、1.0μmol/组和2.0μmol/组p16基因表达阳性条带灰度值与β-肌动蛋白比值分别为(0.22±0.10)、(0.59±0.11)、(0.68±0.09),阳性对照灰度比值为(0.77±0.13),差异有非常显著的统计学意义(P<0.01);③与未处理组相比,As2O3作用72小时后甲基转移酶(DNMT)1、DNMT3A、DNMT3B的表达下降并呈浓度依赖性;④与对照组相比,3组不同浓度As2O3均能明显抑制骨髓瘤细胞生长,G0-G1期细胞增加。结论:As2O3可能通过抑制甲基转移酶(DNMT1)、DNMT3A、DNMT3B和(或)直接对p16基因去甲基化,使p16基因表达上调,恢复其活性,从而实现其对细胞周期的调控功能,将细胞阻滞于G0-G1期,抑制骨髓瘤细胞的增长。
- 傅海英沈建箴沈松菲周华蓉
- 关键词：三氧化二砷多发性骨髓瘤U266细胞甲基转移酶
- 中大剂量阿糖胞苷在急性髓性白血病巩固强化治疗的临床观察被引量：2
- 2007年
- 目的观察中大剂量阿糖胞苷(HD/IDAra-C)在急性髓性白血病(AML)缓解后的巩固强化治疗的疗效。方法将诱导缓解后的32例AML患者分为对照组和治疗组,比较含中大剂量阿糖胞苷方案与标准的巩固强化治疗方案对两组患者治疗后3年和5年无病生存率(DFS)和总生存期(OS)以及治疗后复发率的影响。结果对照组3年和5年DFS分别为19.2%和0%,中位生存期10.8个月,巩固后早期复发率76.1%;治疗组3年和5年DFS分别为51.4%和25.1%,中位生存期28.6个月,巩固后早期复发率44.7%。两组间差别均有显著性意义(P<0.05)。结论HD/IDAra-C能克服耐药,延长患者无病生存率和总生存期,降低复发率,对AML缓解后的巩固强化治疗疗效好。
- 沈松菲沈建箴
- 关键词：急性髓性白血病巩固强化治疗
- 雷公藤内酯醇逆转Jurkat细胞apc基因甲基化及其机制的初步研究被引量：8
- 2010年
- 本研究探讨中药雷公藤内酯醇(triptolide,TPL)对急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞中抑癌基因——apc基因去甲基化作用,并对其机制进行初步探讨。采用生长曲线、MTT法、集落形成实验及流式细胞术DNA含量分析法分别探讨TPL对Jurkat细胞生长、增殖及细胞周期的影响。以巢式甲基特异性PCR检测TPL对Jurkat细胞apc基因甲基化模式的影响,半定量RT-PCR检测TPL作用后Jurkat细胞apc基因、甲基转移酶dnmt3a、dnmt3bmRNA的表达,Western blot检测TPL作用前后APC蛋白的表达水平。结果表明:与对照组相比,不同浓度TPL均能明显抑制Jurkat细胞生长、增殖,并呈时间及剂量依赖性,48小时IC50为19.7ng/ml;未处理组Jurkat细胞基因组DNA的胞嘧啶保持不变,而经TPL作用的Jurkat细胞基因组DNA的胞嘧啶均已变为胸腺嘧啶,这表明Jurkat细胞存在apc基因甲基化;TPL作用后apc基因的高甲基化被逆转,并呈剂量依赖性;未处理组APC蛋白不表达,TPL作用48小时后APC蛋白表达增强,亦呈剂量依赖性。结论:小剂量TPL可明显抑制Jurkat细胞的生长;TPL可通过甲基转移酶和(或)直接作用使apc基因去甲基化,使apc基因表达上调,恢复其活性,从而抑制Jurkat细胞的增殖。
- 吴雪梅沈建箴沈松菲范丽萍
- 关键词：雷公藤内酯醇甲基化APCJURKAT
- 雷公藤内酯醇对急性淋巴细胞白血病Molt4细胞系p15基因表达的影响
- 目的:探讨雷公藤内酯醇(triptolide)对Molt4细胞系p15基因表达的影响,研究雷公藤内酯醇诱导p15抑癌基因去甲基化恢复表达其可能机制。方法:采用甲基敏感的限制性内切酶PCR法检测不同剂量雷公藤内酯醇作用不同...
- 沈建箴傅海英沈松菲郑瑞玑
- 文献传递
- 砷剂诱导人骨髓瘤U266细胞系p16基因表达及其机制的研究
- 目的:探讨三氧化二砷(AsO)去甲基化作用的机制。方法采用甲基敏感的限制性内切酶PCR法检测不同剂量砷剂作用前后U266细胞株P16基因甲基化状态;RT-PCR检测不同剂量砷剂作用前后U266细胞株p16、甲基转移酶(D...
- 沈建箴傅海英沈松菲郑瑞玑
- 文献传递
