王爽
- 作品数：27 被引量：59H指数：4
- 供职机构：东北农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金黑龙江省政府博士后资助基金更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学经济管理化学工程更多>>
- 黑龙江省部分地区绵羊感染蠕虫情况调查及两种复方驱虫制剂的制备
- 王爽
- 复方伊维菌素干混悬剂制备及其在大鼠体内代谢特征分析
- 牛、羊常感染各类线虫,导致机体消瘦,饲料利用率低,药物的使用使很多寄生虫都产生了抗药性,因此,研制一份新型处方药搭配一种简单、方便、高效的剂型尤为重要。本实验将伊维菌素和左旋咪唑混合制成干混悬剂,通过建立伊维菌素、左旋咪...
- 陈博高远张力王爽杨啸赵亚孟小晴王姗姗郭琨刁子洋宋铭忻
- 关键词：伊维菌素左旋咪唑干混悬剂药动学
- 旋毛虫Tsp43重组蛋白对小鼠C2C12细胞增殖分化相关因子表达调控的研究
- Tsp43蛋白是旋毛虫肌幼虫α-杆状体分泌的一种与DNaseⅡ酶相似的蛋白,有一个螺旋-环-螺旋(HLH)结构域,该结构域对肌肉分化因子(如MYOD、MYOKIN)的功能至关重要,故推测旋毛虫或许会干扰正常骨骼肌卫星细胞...
- 郭琨刁子洋王姗姗侯嘉茗孔得丽张博涵王爽宋铭忻
- 关键词：旋毛虫C2C12增殖分化
- ‘羊角蜜’甜瓜再生与遗传转化体系的建立
- 甜瓜(Cucumis melo L)，是世界十大果品之一，同时也是一种重要的经济设施栽培作物和园艺观赏作物。由于瓜类作物遗传基础较差、研究范围狭窄、抗性种质资源缺乏、抗性遗传规律的复杂性和甜瓜存在组培再生困难、试管茁移栽...
- 王爽
- 关键词：薄皮甜瓜离体再生农杆菌介导法
- 文献传递
- 干扰旋毛虫GAD基因对其抗酸能力影响的研究
- 2022年
- 为研究旋毛虫谷氨酸脱羧酶(GAD)基因在其谷氨酸依赖型抗酸系统2(AR2)中的作用,本研究根据GenBank中登录的旋毛虫GAD基因序列,设计3条靶向该基因的siRNA(GAD-siRNA1~GAD-siRNA3)及一条阴性对照NC siRNA。将这4条siRNA以2μmol/L的剂量通过浸染法分别转染旋毛虫肌幼虫(后均简写为肌幼虫),12 h后分别采用荧光定量PCR和western blot检测各siRNA的干扰效果;采用不同剂量的最佳siRNA按照上述方法转染确定最佳干扰剂量。结果显示,2μmol/L的GAD-siRNA1(后简写为siRNA1)对GAD基因的干扰效果最好。将2μmol/L siRNA1、NC siRNA分别在不同pH值的培养液中利用浸染法分别转染肌幼虫,培养不同时间后分别计算各组存活率;同时利用荧光定量PCR方法检测GAD基因的转录水平;采用比色法建立γ-氨基丁酸(GABA)的标准曲线,通过酶活性公式和标准曲线计算酸环境培养0.5 h后各组培养液中GAD的酶活性并测定其pH值。存活率结果显示,随培养时间的增加,同一pH值培养液中各组肌幼虫的存活率均降低,其中siRNA1组肌幼虫的存活率明显低于PBS和NC siRNA组(NC组)(P<0.05),其在pH2.5培养0.5 h时的存活率最低,各组肌幼虫在pH6.6培养0.5 h时的存活率均最高。荧光定量PCR结果显示,相同p H条件下,随培养时间的延长,siRNA1组肌幼虫GAD基因的转录水平均显著低于PBS和NC组。相同培养时间内,与两个对照组相比,随着培养液p H值的减小,siRNA1组肌幼虫GAD基因的转录水平均增加,且该组肌幼虫在pH2.5时GAD基因的转录水平显著高于pH6.6时的转录水平(P<0.05)。上述结果表明,酸性环境可以诱导旋毛虫肌幼虫GAD基因转录水平的升高。酶活性测定结果显示,相同pH条件下,siRNA1组肌幼虫培养液中GAD的酶活性均比PBS组和NC组低,且该组肌幼虫在pH2.5和pH4.0时GAD的酶活性显著高于pH6.6和pH8.0(P<0.05);p H值测定结果显示,siRNA1组肌幼虫培养液pH值相比其在不同pH条件下培�
- 张妍孟诗孟小晴高远王爽赵亚王姗姗郭琨宋铭忻
- 关键词：旋毛虫RNA干扰谷氨酸脱羧酶
- 旋毛虫HSP70蛋白诱导大鼠心肌细胞线粒体凋亡机制的研究被引量：2
- 2022年
- 为了解旋毛虫HSP70致心肌损伤的机制,本研究将不同浓度旋毛虫重组HSP70蛋白(Ts-Hsp70)与大鼠心肌细胞H9c2共孵育后,采用CCK-8试剂盒筛选Ts-Hsp70作用H9c2细胞的最适浓度。以最适浓度Ts-Hsp70与H9c2细胞共孵育不同时间后,采用微孔板法检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量,采用比色法检测细胞培养上清液中心肌细胞损伤标志物肌酸激酶(CK)的含量,采用免疫荧光检测Ts-Hsp70作用后H9c2细胞活性氧(ROS)的释放,采用qPCR和western blot方法检测Ts-Hsp70作用后的H9c2细胞线粒体凋亡与抗凋亡途径中的Bax、Caspase-3、Caspase-9、Cytochrome C与Bcl-2的基因转录水平与蛋白表达水平。结果显示,经最适浓度为60μg/mL的Ts-Hsp70分别刺激H9c2细胞6 h、12 h和18 h后,随着Ts-Hsp70对H9c2细胞作用时间的延长,LDH、CK、ROS含量与Bax、Cytochrome C及激活状态下的Caspase-3、Caspase-9基因转录水平与蛋白表达水均升高,且均于作用12 h时达峰值,显著高于对照组(P<0.01),而线粒体抗凋亡基因Bcl-2基因转录水平与蛋白表达水平随着Ts-Hsp70对H9c2细胞作用时间的延长均逐渐降低,且均于作用12 h时达谷值,显著低于对照组(P<0.01)。本研究首次证实Ts-Hsp70可增加细胞中LDH、CK、ROS的含量,激活并调节H9c2细胞中的线粒体凋亡通路,该研究结果为进一步研究旋毛虫致心肌损伤机制提供了基础数据。
- 王姗姗刁子洋郭琨王雪莹侯嘉明薄禄琪王爽宋铭忻
- 关键词：旋毛虫心肌细胞
- siRNA-757干扰旋毛虫Ts-ODC基因对其抗酸能力的影响
- 2023年
- 旨在探究旋毛虫肌幼虫体内是否存在鸟氨酸依赖型抗酸系统,本研究根据GenBank中Ts-ODC全序列基因组设计三条特异性siRNA分子,采用脂质体浸染转染的方法将其分别转染至旋毛虫肌幼虫体内,使用qPCR、Western blot和间接免疫荧光试验,筛选最佳干扰siRNA分子及最佳干扰条件;并在pH 1.5、2.5、4.5和6.6的条件下将肌幼虫分别培养0.5、1和2 h,从肌幼虫Ts-ODC基因转录水平、酶活性及存活率等方面分析Ts-ODC基因干扰对旋毛虫肌幼虫抗酸能力的影响;将Ts-ODC基因被干扰的旋毛虫肌幼虫感染小鼠,在7和42 d时分别收集成虫和肌幼虫,分别计算其减虫率;将子一代肌幼虫在pH 2.5的酸性条件下培养2 h,计算其存活率,对Ts-ODC基因干扰的遗传性进行分析。结果显示,Ts-ODC siRNA-757为最佳干扰分子,转染12 h、浓度为2μmol·L^(-1)培养3 d时为最佳干扰条件;各组pH 2.5培养2 h时Ts-ODC基因转录水平最高,pH 1.5培养2 h时虫体的存活率明显低于其他培养条件(P<0.01),pH 4.5培养0.5 h时虫体体内酶活性最高;转染Ts-ODC siRNA-757的肌幼虫接种小鼠后,7 d时成虫和42 d时肌幼虫的减虫率分别为58.95%和65.91%;其子一代肌幼虫在pH 2.5的培养液内培养2 h时其存活率为49%。综上表明,旋毛虫肌幼虫体内具有鸟氨酸依赖型抗酸系统,本研究首次通过siRNA技术干扰旋毛虫肌幼虫Ts-ODC基因,且证实干扰Ts-ODC基因可降低肌幼虫抗酸能力,为后期旋毛虫病的防治提供新思路。
- 薄禄琪王雪莹侯嘉茗张力张鉴慧阮入琳张博涵王爽宋铭忻张子群
- 关键词：旋毛虫鸟氨酸脱羧酶RNA干扰
- 一种旋毛虫间接ELISA抗体检测试剂盒及其应用
- 本发明公开了一种旋毛虫间接ELISA抗体检测试剂盒及其应用。所述的试剂盒中包含有旋毛虫海藻糖酶(TsTRE)重组蛋白包被的酶标板。本发明通过包被纯化的TsTRE蛋白，优化建立了旋毛虫的间接ELISA抗体检测试剂盒，后使用...
- 宋铭忻侯嘉茗王雪莹薄禄琪张鉴慧张博涵阮入琳张力王爽
- 应用旋毛虫GAD和GLS重组抗原建立间接ELISA方法的研究被引量：3
- 2019年
- 为了建立快速检测猪旋毛虫病的血清学方法,分别用旋毛虫GAD、GLS重组蛋白作为包被抗原,建立2种检测旋毛虫血清抗体的间接ELISA方法。对抗原包被条件、血清稀释度、封闭液的选择与封闭时间、酶标二抗的稀释度与孵育时间和TM B作用时间等条件进行了优化。旋毛虫GAD包被抗原间接ELISA方法和GLS包被抗原间接ELISA方法的阴阳性临界值分别为0.848和0.963;这2种间接ELISA方法批内和批间重复试验的最大变异系数均小于10%,且用这2种方法分别对猪蛔虫阳性血清、华支睾吸虫阳性血清和弓形虫阳性血清进行了检测,均无交叉反应,表明这2种方法具有很好的稳定性和特异性。同时用这2种间接ELISA方法和旋毛虫抗体快速检测卡分别对感染旋毛虫不同数量、不同时间的小鼠血清进行检测,结果显示,这2种间接ELISA方法具有较高的敏感性。本研究中建立的这2种间接ELISA方法为旋毛虫病的早期诊断和流行病学调查提供了必要的手段。
- 张妍孟诗李晓云于洁李成王爽许浒孟小晴杨啸宋铭忻
- 关键词：旋毛虫间接ELISA
- 复方伊维菌素浇泼剂制备及小鼠旋毛虫驱虫效果观察
- 寄生虫病以药物治疗为主,但目前许多寄生虫都有很强的耐药性,本研究选用伊维菌素与盐酸左旋咪唑组合用药,制备复方伊维菌素浇泼剂,并对其稳定性与质量标准进行了评价,然后对3个时期的旋毛虫进行驱虫效果观察。研究发现伊维菌素在10...
- 刘宇琦高远王爽张力孟小晴杨啸赵亚刁子洋郭琨王姗姗宋铭忻
- 关键词：伊维菌素左旋咪唑透皮给药
