王禄增
- 作品数：108 被引量：544H指数：12
- 供职机构：中国医科大学更多>>
- 发文基金：国家科技部专项基金国家自然科学基金辽宁省科学技术基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学文化科学更多>>
- 胚胎冷冻技术应用于抗菌肽转基因小鼠的保种传代被引量：1
- 2007年
- 目的研究胚胎冷冻在抗菌肽转基因FVB小鼠保种传代中的应用。方法对6~8周正常雌性FVB小鼠进行超排分别与雄性杂合子抗菌肽转基因FVB小鼠交配，收集2-cell胚胎，进行胚胎冷冻。1周后进行胚胎复苏移植，通过PCR方法对仔代鉴定。结果冻存胚胎140枚，复苏获得存活胚胎98枚，移植85枚，产仔38只，获得阳性后代12只。结论通过胚胎冷冻技术保种及复苏移植技术可对抗菌肽转基因小鼠进行传代。
- 周生来董婉维郑志红杨葳张梅英史晓萍王禄增
- 关键词：小鼠超排卵胚胎冷冻胚胎移植
- Wistar大鼠L-蛋氨酸灌胃后血脂变化观察被引量：2
- 2002年
- 目的 应用普通级Wistar雄性大鼠灌胃给药L 蛋氨酸 (L met)后对其血脂变化进行了研究。方法 模型实验组给药 (L met)剂量分别为 2 30mg 只、45 0mg 只 ,持续给药时间为 8周 ,每隔 7d对模型组动物进行血清总胆固醇 (TC)、甘油三脂 (TG)、低密度脂蛋白 (LDL C)及载脂蛋白B(apoB)检测。结果 各给药组随着服用L 蛋氨酸时间的增加 ,TC、TG、LDL C、apoB值基本呈上升趋势 ,且实验组血清中各血脂检测平均值与对照组相比差异有显著或极显著性 (P <0 0 5或P <0 0 1)。结论 Wistar大鼠服用L
- 王禄增张梅英季勇董婉维
- 关键词：WISTAR大鼠血脂灌胃高脂血症动物模型
- TNNI2突变转基因小鼠模型的建立
- 2008年
- 目的建立TNNI2突变转基因小鼠模型。方法构建pEGFP-tnni2转基因构件,TNNI2基因的第175个氨基酸缺失,通过原核显微注射法,把线性化、纯化后的外源基因pEGFP-tnni2注射入BDF1小鼠受精卵中,胚胎移植给同期发情的假孕受体母鼠,获得子代小鼠。用PCR和Southern方法检测子代鼠尾DNA鉴定基因型。通过RT-PCR方法检测tnni2基因表达。结果移植注射胚胎115枚给4只假孕小鼠共出生了23只后代鼠,经PCR和Southern方法检测得到4只阳性小鼠。对其子代进行RT-PCR检测,tnni2基因在肌肉、心脏内表达。结论通过显微注射法使外源基因pEGFP-tnni2(TNNI2基因的第175个氨基酸缺失)在小鼠基因组中得到整合,建立了转pEGFP-tnni2的转基因小鼠模型。
- 杨葳郑志红姜淼李兆阳王惟王禄增
- 关键词：显微注射法转基因小鼠
- 具潮霉素B抗性的NIH3T3细胞饲养层的制备
- 2005年
- [目的]建立具有潮霉素B(hygromycinB)抗性的3T3细胞系,用于转染目的基因(pTRE2-human-Ins)的ES阳性细胞克隆筛选的饲养层。[方法]通过脂质体转染的方法,将含有潮霉素B磷酸转移酶基因(hyg)的质粒pHyg导入NIH3T3细胞中,利用潮霉素B的药物选择特性,对转染细胞进行压力筛选,并对其进行PCR和southernblot鉴定。[结果]经300ug/ml的潮霉素B压力筛选后,获得了抗性细胞克隆。抗性NIH3T3细胞的形态和生长速度与正常NIH3T3细胞没有差异,特异性核苷酸引物检测抗性细胞基因组DNA,可以扩增出相应的核苷酸片段,Southernblot鉴定结果表明潮霉素基因片段已整合入潮霉素抗性NIH3T3细胞。[结论]本实验通过脂质体介导的方法成功地培育了潮霉素B抗性的NIH3T3细胞,为进行目的基因(pTRE2-human-Ins)转染ES细胞的阳性细胞克隆筛选打下了基础。
- 张梅英李华董婉维杨葳秦英汪瑛周生来于洋王惟王太一王禄增
- 关键词：转染ES细胞
- 干细胞的研究和临床应用被引量：5
- 2002年
- 近年来 ,对胚胎干细胞及成年干细胞的研究取得了喜人的进展 ,使人们看到了体外培养人体组织及器官的可能性 。
- 时伟红王禄增宋今丹
- 关键词：干细胞体外培养
- 突变DJ-1转基因小鼠模型的建立被引量：3
- 2009年
- 目的探讨DJ-1L166P突变基因在帕金森病发生中的作用。方法构建pcDNA3.1-myc-his-DJ-1L166P真核表达载体,利用显微注射方法将DJ-1L166P基因片段(约3.9kb)导入BDF1小鼠受精卵雄原核并移植到同期受孕的ICR假孕母鼠输卵管中,对产出仔鼠的鼠尾组织DNA进行聚合酶链反应和Southern blot检测,对Southern blot鉴定阳性的转基因小鼠进行逆转录聚合酶链反应和Western blot检测。结果共产生20只子代小鼠,1号和7号为DJ-1L166P转基因阳性小鼠。1号转基因小鼠大脑、小脑、肝、肺、肾、睾丸有不同程度的DJ-1mRNA表达,均高于正常对照小鼠,但只有大脑中DJ-1mRNA的表达水平显著高于正常对照小鼠(P<0.05);7号转基因小鼠只有肝、肺组织中有DJ-1mRNA表达,也高于正常对照小鼠,但差异无统计学意义。只有1号小鼠大脑有His标签蛋白的表达。结论成功获得1只DJ-1L166P基因突变转基因小鼠模型,为课题的下一步实验研究打下良好的基础。
- 张梅英吴红联蔺美娜李兆阳周生来于洋王惟吕相川王禄增
- 关键词：DJ-1基因帕金森症转基因小鼠
- 具有潮霉素B抗性的NIH3T3细胞饲养层的制备被引量：2
- 2005年
- 目的建立具有潮霉素B(hygromycin B)抗性的3T3细胞系,用于转染目的基因(pTRE2 -human-Ins)的ES阳性细胞克隆筛选的饲养层。方法通过脂质体转染的方法,将含有潮霉素B 磷酸转移酶基因(hyg)的质粒pHyg导入NIH3T3细胞中,利用潮霉素B的药物选择特性,对转染细胞进行压力筛选,并对其进行PCR和Southern blot鉴定。结果经300 μg／ml的潮霉素B压力筛选后,获得了抗性细胞克隆。抗性NIH3T3细胞的形态和生长速度与正常NIH3T3细胞没有差异,特异性核苷酸引物检测抗性细胞基因组DNA,可以扩增出相应的核苷酸片段,Southern blot 鉴定结果表明潮霉素基因片段已整合入潮霉素抗性NIH3T3细胞。结论本实验通过脂质体介导的方法成功地培育了潮霉素B抗性的NIH3T3细胞,为进行目的基因(pTRE2-human-Ins)转染ES 细胞的阳性细胞克隆筛选打下了基础。
- 张梅英李华董婉维杨葳秦英汪瑛周生来于洋王惟王太一王禄增
- 关键词：NIH3T3细胞转染ES细胞
- 半屏障系统实验动物环境设施空气净化要点被引量：1
- 1997年
- 半屏障系统实验动物环境设施空气净化要点王禄增，宗阿南，王太一（中国医科大学实验动物部，沈阳）半屏障系统实验动物环境设施送入的全新风要经过１０００００级洁净度的过滤，空气净化系统是半屏障系统实验动物环境设施成败的关键。在恒温、恒湿的条件下，进入半屏障系...
- 王禄增宗阿南王太一
- 关键词：实验动物环境设施空气净化系统饲料
- 大鼠显微注射胚胎采集方法的比较
- 2008年
- 目的优化大鼠显微注射前胚胎采集的方法。方法选用最佳超排5周龄SD大鼠,腹腔注射PMSG-HCG,分别用撕开输卵管壶腹部和输卵管伞端冲洗两种方法采集胚胎,比较获得卵数,受精率,注射存活率等的差异。结果冲洗输卵管伞端采集胚胎的方法所得到的受精率、存活率都较高,与撕开输卵管壶腹部方法比较差异显著(P<0.01),胚胎总数无显著性差异(P>0.05)。结论冲洗输卵管伞端采集胚胎的方法为大鼠显微注射前胚胎采集比较好的方法。
- 于洋周生来王惟吕向川张梅英王禄增郑志红
- 关键词：显微注射胚胎采集
- 噪声、光照和空气质量对实验动物福利的影响被引量：9
- 2006年
- 史小平李华王捷尚昌连王禄增
- 关键词：实验动物福利
