王进文
- 作品数：9 被引量：25H指数：3
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- 抑制E.coli的SOS应答对恩诺沙星抗药性的影响
- 2015年
- 通过敲除SOS应答启动蛋白基因rec A,探讨SOS应答对E.coli恩诺沙星抗药性的影响,并体外评价Rec A抑制剂和恩诺沙星联用对细菌协同抑制作用的影响.利用Red重组系统,构建E.coli ATCC 25922的rec A缺失菌株E.coli ATCC 25922/?rec A;在恩诺沙星压力下,利用荧光定量PCR测定SOS应答系统相关基因rec A和umu C表达量的变化.用微量肉汤稀释法测定恩诺沙星等常用抗生素对两个菌株的MIC变化;利用梯度平板法测定恩诺沙星对两个菌株抗药性变异的影响;合成Rec A抑制剂,并评估其与恩诺沙星联合抑制E.coli生长及其抗药性的作用.结果表明,E.coli ATCC 25922/?rec A菌株对恩诺沙星的最低抑菌浓度值降低至原始菌株的1/8;经药物处理后,在梯度平板上,rec A缺失菌株较野生型不易产生抗药性;荧光定量PCR表明,rec A缺失菌株或在Rec A抑制剂作用下,SOS应答系统受到一定的抑制.敲除rec A,使菌株对恩诺沙星的抗药性和抗药率均明显降低;Rec A抑制剂在一定程度上能抑制SOS应答,起到协同抑菌作用.
- 王进文胡明白华颜世敢李璐璐骆延波齐静韩哲刘玉庆
- 关键词：E.COLIRECA恩诺沙星抗药性RECA抑制剂
- 资源依赖型小区域（县域）经济转型发展研究
- 县域经济是空间意义上整个国民经济极其重要的微观组成部分。在特定的历史条件下，以资源掠夺为代价的粗放型增长模式是支持我国资源依赖型小区域经济持续增长的主要模式。虽然在经济增长速度方面取得了显著的成绩，但也造成了严重的后果。...
- 王进文
- 关键词：资源依赖型经济经济转型
- 文献传递
- 表征抗菌药物抑菌动力学的等效线药敏试验方法被引量：5
- 2015年
- 以抗菌药物作用浓度与时间对抑菌率的协同作用，改进通行的药敏试验方法．采用Bioscreen全自动生长曲线分析仪，在线测定连续时间、连续固定浓度抗菌药物作用下禽致病性大肠杆菌BBZ6-3g在MHB中生长量（A600），建立了抑菌动力学检测体系．用Sigmaplot构建以相对抑菌率RBR=1—At-i／At_0对抗菌药物浓度和作用时间的等效线图．等效线图全面地反映了药物浓度和时间对抑菌量的影响过程及趋势，兼具二维曲线的量化和三维曲面的直观特点，而且RBR通过归一化处理，消除了细菌群体的自然增殖的本底、不同接种量、不同抗菌药物的差异影响，可以直接比较不同抗菌药物的抑菌率，专门比较浓度和时间对抑菌率的影响．抑菌作用本质上是抗菌药物抑制细菌对营养物质的利用效率和程度，与细菌死亡是不同但是相关的过程。0．5RBR为传统的目测最低抑菌浓度（MIC），以此为界，等效线图可以直观地分为3部分：分化区（O．5纵向等效线以左，全部浓度）、生长区（0．5以上的等效线）、抑菌区（0．5纵向等效线以右延伸且0．5以下的等效线）．分化区边界时间在100～300min，因此传统的药敏试验以8—12h的终态来判断抑菌率，确定MIC是可靠的；抑菌区和生长区之间的等效线疏密，实际上是浓度依赖性和时间依赖性的依据．抑菌动力学检测体系和反映RBR的等效线图，改良了传统药敏试验方法，有望分析不同接种量对抑菌率和菌群变异的影响、不同浓度的抗菌药物后效应（PAE），比较不同菌种或不同抗药性水平菌株的抑菌动力学．
- 刘玉庆胡明刘焕奇王进文赵敏李靖冉付晓杰骆延波齐静李璐璐高培基
- 大肠埃希菌过表达lexA基因对恩诺沙星杀菌力和抗药性突变的影响被引量：1
- 2013年
- 目的构建过表达SOS阻遏蛋白编码基因lexA的大肠埃希菌菌株,研究SOS应答对恩诺沙星抗药性突变的影响,并建立SOS应答抑制剂筛选平台。方法构建lexA重组表达质粒pET-22b(+)-lexA,转化大肠埃希菌BL21(DE3)构建重组质粒菌株BL21-lexA,用IPTG诱导BL21-lexA过表达lexA,通过SDS-PAGE和Western blot鉴定LexA蛋白,用荧光定量PCR测定SOS应答基因recA和umuC表达变化;然后用恩诺沙星梯度平板测定恩诺沙星对BL21-unmodified(空质粒菌株)和BL21-lexA的抑菌活性和抗药性突变率。结果重组质粒菌株BL21-lexA在IPTG诱导下过表达LexA,抑制recA和umuC表达,提高了大肠埃希菌对恩诺沙星的敏感性,降低了抗药性突变率。结论通过IPTG诱导BL21-lexA过表达LexA蛋白,能构建稳定的SOS应答抑制模型,用于筛选SOS抑制剂,提高恩诺沙星杀菌力和降低抗药性突变。
- 牛卫卫白华王进文颜世敢齐静骆延波李璐璐贾纪美李靖冉黄娟单虎刘玉庆
- 关键词：LEXA大肠埃希菌恩诺沙星
- 山东省肉鸭沙门氏菌的分离鉴定及敏感抗菌药物的筛选被引量：5
- 2014年
- 从山东省各个地区的病死肉鸭采集317份组织样品进行细菌分离,并进行染色镜检和生化鉴定,共分离鉴定出105株沙门氏菌,分离率为33.1%。将临床推荐用药浓度的0.1倍作为抗药性检测浓度L,设置不同药物浓度梯度(1/4L、1/2L、L、2L和4L),进行17种抗生素的药敏试验,根据L药物浓度梯度对分离菌株的抑菌率大于80%的原则进行敏感抗菌药物的筛选。结果表明,沙门氏菌是危害山东省肉鸭养殖的主要病原菌之一,且多重耐药现象较严重,其中氨苄西林、诺氟沙星、卡那霉素、氟苯尼考和培氟沙星等敏感药物可作为临床推荐药物对沙门氏菌进行防控。
- 齐静王守荣李兰波骆延波李璐璐胡明王进文李虹达贾纪美赵敏杨胜福李玉保单虎刘玉庆
- 关键词：沙门氏菌药敏试验
- 山东省水貂铜绿假单胞菌的鉴定、分型和抗生素敏感性
- [目的]本研究旨在分析山东省水貂出血性肺炎主要病原铜绿假单胞菌的生物学特性和分子流行病学.[方法]2010～2011年从山东省内不同地区的养貂场爆发的出血性肺炎的病例中分离鉴定铜绿假单胞菌,测定分离株的细菌学特性,生化特...
- 齐静李璐璐王守荣王进文骆延波刘玉庆
- 关键词：血清分型抗生素敏感性脉冲场凝胶电泳
- SPF鸡粪菌移植对雏鸡肠道菌群和大肠杆菌抗药性的影响被引量：10
- 2018年
- 兽用抗生素的广泛使用引起肠道细菌严重的抗药性和菌群生态紊乱,并可能导致抗药性人畜共患病原菌的传播,给公共卫生带来严峻挑战,因此通过粪菌移植从动物源头降低肠道菌群的抗药性势在必行。本试验首先通过16S rDNA高通量测序技术比较粪菌移植供体SPF蛋鸡及普通商品肉鸡的粪便菌群,然后经泄殖腔滴注方式接种1日龄SPF雏鸡,于7日龄和35日龄测定移植后受体粪便菌群的微生物组,用琼脂稀释法测定移植前后肠道指示菌株大肠杆菌的抗药性水平。结果表明,商品肉鸡粪便菌群拥有更高的多样性,而SPF蛋鸡粪便菌群组成更为均一。除了共同拥有较多的厚壁菌门细菌,商品肉鸡还含有较多的拟杆菌门细菌而SPF蛋鸡则含有较多的变形菌门细菌。在属水平上,商品肉鸡的优势菌属是粪栖杆菌属、拟杆菌属和别样杆菌属,而SPF蛋鸡的优势菌属为肠球菌属、埃希-志贺菌属以及克雷伯氏杆菌属。药敏试验结果表明,SPF蛋鸡拥有对抗生素极为敏感的菌群,商品肉鸡拥有较高的抗生素抗药性菌群。将两组粪便菌群移植给新生雏鸡后,抗药性水平得到传递。该结果说明通过SPF鸡粪菌移植雏鸡,能安全地从源头降低肠道菌群抗药性,抵抗家禽养殖环境中高抗药性病原菌的侵害,为遏制动物源细菌抗药性提供一种新的解决方法。
- 朱见深王进文张庆骆延波李璐璐胡明宋新慧戴美学齐静刘玉庆
- 关键词：抗药性SPF鸡
- SOS应答对大肠杆菌抗药性与毒力的调控机制
- SOS应答系统普遍存在于细菌，是受到RecA-LexA调控的一种低保真度DNA修复方式。在正常状态下，阻遏蛋白LexA二聚体结合在细菌SOS应答基因的启动子区域，抑制基因表达;当细菌处于应激状态，形成的单链DNA激活启动...
- 王进文
- 关键词：大肠杆菌抗药性毒力作用基因调控
- 文献传递
- SOS应答系统及其对细菌耐药性和毒力的调控作用与在治疗细菌感染中的应用
- 2014年
- 细菌是最简单的细胞生物,却拥有完整的生化过程和完善而富于变化的基因组。如果说中心法则是保证细菌基因组严谨复制和表达的遗传铁律,那么SOS应答(SOS response,SOSr)系统则是细菌长期进化留下的变异窗口,SOSr增加基因组序列的变异,并调控这一庞大基因组有选择地表达和横向交流,以适应多变的环境。很显然,细菌耐药性与致病力也在SOSr系统调控范围内,耐药性或强致病力菌株的出现大大增加了对致病菌感染治疗的难度。因此,认识细菌耐药性和毒力的关系,研究SOSr的调控机制及其抑制措施,具有进化论意义和重要的医疗价值。
- 王进文白华颜世敢胡明刘玉庆
- 关键词：耐药性毒力进化
