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王锡民
作品数:
2
被引量:3
H指数:1
供职机构:
河北省职工医学院
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发文基金:
河北省自然科学基金
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相关领域:
生物学
医药卫生
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合作作者
王彦芳
河北大学生命科学学院河北省生物...
刘建荣
河北大学生命科学学院河北省生物...
赵晓瑜
河北大学生命科学学院河北省生物...
王会文
河北大学生命科学学院河北省生物...
静天玉
河北大学生命科学学院河北省生物...
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机构
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河北大学
1篇
河北省职工医...
1篇
河北省职工医...
作者
2篇
王锡民
2篇
静天玉
2篇
王会文
2篇
赵晓瑜
2篇
刘建荣
2篇
王彦芳
传媒
1篇
中国生物化学...
1篇
细胞与分子免...
年份
2篇
2000
共
2
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人La多肽融合蛋白在E.coli中的表达
被引量:3
2000年
目的 构建在E .coli中表达人La多肽的质粒。方法以人脾cDNA为模板 ,通过PCR获得La多肽 (全长 )的DNA片段。将此片段利用双酶切定向克隆到MBP(麦芽糖结合蛋白 )融合系统的载体pMALTM c中 ,表达可溶性融合蛋白 ,并通过亲和层析予以纯化。结果免疫印迹实验 (IBT)证明 ,表达的融合蛋白具有La抗原多肽的特异性 ,而敏感性超过生化制备的ENA制品。
赵晓瑜
刘建荣
静天玉
王会文
王彦芳
王锡民
关键词:
克隆
融合蛋白
聚合酶链反应
人R_O蛋白(60kD)编码序列的PCR产物在E.coli中的克隆与表达
2000年
通过聚合酶链反应 ( PCR)自人脾 c DNA扩增 RO 蛋白 ( 60 k D)编码 DNA片段 .将该片段定向插入麦芽糖结合蛋白 ( MBP)融合系统的 p MALTM- c载体中并转化 E.coli ( DH5α) ,通过酶联免疫印迹 ( IBT)筛选出具有 RO 抗原性的阳性克隆 .绝大部分阳性克隆表达完整的 RO 融合蛋白 ( 1 0 0k D) .但在传代过程中表达水平很快降低 ;少数阳性克隆虽然表达非完整 RO 融合蛋白 (分子量 <80k D) ,但表达水平却高而且稳定 .同时保留了很强的 RO 抗原性 .产生非完整融合蛋白的一个原因是 ,PCR碱基错配引起 RO 编码 DNA的序列缺失 ;
赵晓瑜
刘建荣
静天玉
王会文
王彦芳
王锡民
关键词:
PCR
克隆
免疫性疾病
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