许志茹
- 作品数：84 被引量：297H指数：11
- 供职机构：东北林业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金黑龙江省博士后科研启动基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学文化科学轻工技术与工程更多>>
- 基因沉默在农业生产中的应用及其相关因子的研究进展
- 2011年
- 本文主要介绍了基因沉默在农业生产上的广泛应用,并对一些与基因沉默相关的因子如miRNA、阿格蛋白(Argo-naute protein)和PolIV进行了阐述。
- 佟玲侯杰崔国新许志茹李玉花
- 关键词：基因沉默MIRNA
- 芜菁花青素合成关键酶DFR基因启动子的克隆及功能分析被引量：2
- 2014年
- 在已经克隆的‘津田’芜菁和‘赤丸’芜菁二氢黄酮醇4–还原酶(DFR)基因的基础上,通过染色体步移法从两种芜菁基因组中克隆了BrDFR1和BrDFR2基因上游1 296和1 297 bp的启动子序列。生物信息学分析表明,启动子片段中包含TATA box、CAAT box、光调控元件、ABA应答元件、伤害应答元件、低温应答元件、防御与胁迫应答元件、MeJA应答元件等多个顺式作用元件。启动子BrDFR1P和BrDFR2P仅在15个核苷酸位点存在差异。将BrDFR1P和BrDFR2P分别连接到pCAMBIA1301植物表达载体上,构建Promoter::GUS载体,通过农杆菌介导遗传转化烟草。GUS组织化学染色检测表明,BrDFR1P和BrDFR2P均能驱动GUS基因表达。构建BrDFR1P和BrDFR2P的一系列缺失体,融合GUS基因后遗传转化烟草。染色结果表明,BrDFR1P和BrDFR2P缺失片段均具有相应的起始下游基因转录的活性特征。
- 许志茹马静崔国新李玉花
- 关键词：芜菁启动子
- 毛果杨NLP基因家族生物信息学分析与鉴定被引量：9
- 2014年
- NLP基因家族是一类特殊的转录因子,豆科植物根瘤的形成依赖于该基因家族的存在,在非豆科植物中具有调节植物硝酸盐吸收以及同化的功能。通过对毛果杨(Populus trichocarpa)基因组的生物信息学分析,共鉴定出14个毛果杨NLP基因家族成员,这些成员具有低亲水性的特点,基因结构保守,都含有RWP-RK以及PB1两个保守结构域。通过细胞定位预测,所有成员都定位在细胞核中。直系同源与旁系同源进化分析显示,NLP基因家族成员在漫长的进化过程中经历了严格的选择。染色体定位分析表明,毛果杨NLP基因家族成员坐落在毛果杨9条染色体之上,成员数量的扩增来自于杨柳科染色体自身的扩增事件。芯片数据分析结果显示,NLP基因家族成员在嫩叶,根和雄花中表达,部分基因在木质部以及种子萌发过程之中表达,但所有成员均不在成熟叶片中表达。
- 吴翔宇许志茹曲春浦李蔚孙琦刘关君
- 关键词：NLP基因家族
- 芜菁二氢黄酮醇4–还原酶基因的克隆与功能鉴定被引量：9
- 2014年
- 二氢黄酮醇4–还原酶(dihydroflavonol 4-reductase,DFR)是花青素生物合成晚期阶段的关键酶,属于NAD/NADP依赖型还原酶家族,催化从二氢黄酮醇转变成无色花色素苷的反应。利用UV-A处理‘津田’芜菁(‘Tsuda’turnip)和‘赤丸’芜菁(‘Yurugi Akamaru’turnip)块根24 h后提取总RNA,通过RT-PCR方法分别克隆了‘津田’芜菁BrDFR1和‘赤丸’芜菁BrDFR2基因。BrDFR1和BrDFR2的开放读码框分别为1 158 bp和999 bp,分别编码385和332个氨基酸。氨基酸序列分析显示,BrDFR1和BrDFR2与大白菜DFR具有高度同源性,从第8到第302位氨基酸的肽段具有FR_SDR_e结构域。BrDFR1和BrDFR2基因组全长序列均含有5个位置与序列完全相同的内含子。Southern杂交结果显示,‘津田’芜菁BrDFR1和‘赤丸’芜菁BrDFR2基因均为单一拷贝。UV-A可以诱导BrDFR1基因表达,对BrDFR2基因表达的诱导效果不明显。BrDFR1和BrDFR2基因在大肠杆菌细胞中可以表达并纯化出分子量约为42.8 kD的BrDFR1蛋白和37.5 kD的BrDFR2蛋白。过量表达BrDFR1和BrDFR2基因的烟草花色加深。芜菁DFR基因的RNAi载体遗传转化烟草后,转基因植株的花色变浅。这些工作将为阐明依光型和非依光型花青素生物合成机理奠定研究基础。
- 许志茹刘通崔国新李春雷马静李玉花
- 关键词：芜菁基因克隆
- 芜菁花青素合成过程中相关基因的筛选及表达研究
- 以光敏感型不同的‘津田’和‘赤丸’两个芜菁品种为试材，构建了两个cDNA文库，对试材进行遮光处理和光照处理后构建了四个消减文库(1，津田光处理红色块根皮-津田暗处理白色块根皮;2，津田暗处理白色块根皮-赤丸光处理红色块根...
- 许志茹
- 关键词：CDNA微阵列基因表达CDNA文库基因筛选
- 津田芜菁和赤丸芜菁苯丙氨酸解氨酶基因(PAL)的克隆和表达被引量：4
- 2008年
- 以UV-A处理津田芜菁和赤丸芜菁块根24h后提取总RNA,再用RT-PCR方法分别克隆BrPAL1和BrPAL2基因的结果表明,BrPAL1和BrPAL2的开放读码框为2 169bp,编码722个氨基酸。氨基酸序列分析显示,BrPAL1和BrPAL2与甘蓝型油菜苯丙氨酸解氨酶(PAL)的同源性达99%,第61～559的肽段具有PAL结构域。BrPAL1和BrPAL2的核苷酸序列在9个位置上存在差异,而推导的氨基酸序列仅在3个位置上有差异。BrPAL1和BrPAL2基因有高度同源性。Northern杂交结果显示,UV-A可以诱导BrPAL1和BrPAL2表达,基因的表达量与处理时间呈相关。
- 许志茹崔国新李春雷孙燕李玉花
- 关键词：芜菁花青素苯丙氨酸解氨酶基因基因克隆与表达
- 鹿类微卫星遗传标记的研究现状(英文)被引量：5
- 2001年
- 微卫星DNA在染色体上随机即分布，是十分有效的遗传标记。目前，在鹿类发现约有200 多个微卫星位点，除了极少数位点是直接从DNA文库中筛选的以外，绝大多数都是将牛、羊 的微卫星位点“借用”到鹿类。这些位点被广泛应用到父权鉴定、遗传多样性和种群结构分 析、种群基因渗入的检测、孕期长短及越冬存活率等的遗传标记等方面的研究中。然而，微 卫星DNA的数量目前还远不能满足研究需要。将来要在以下方面开展工作：1）分离更多的鹿 类特异的微卫星位点，2）构建微卫星位点的遗传和物理图谱。这样，微卫星DNA才能在鹿类 研究中发挥更大的作用。
- 徐艳春潘紫辰许志茹杨淑慧金煜白素英
- 关键词：鹿科动物微卫星
- 基因芯片技术在植物研究中的应用被引量：7
- 2004年
- 简述了基因芯片的原理、特点、分类及制作方法 。
- 许志茹李玉花
- 关键词：基因芯片植物研究
- 芜菁消减文库特异基因片段功能的初步分析
- 2008年
- 目的:对4个消减cDNA文库中筛选到的特异基因片段进行功能分析,为筛选津田芜菁和赤丸芜菁花青素合成的特异基因和代谢途径奠定基础。方法:以不同处理的津田芜菁和赤丸芜菁块根为材料,采用抑制削减杂交构建4个消减cDNA文库并富集特异基因群体,同时对消减文库的特异基因片段进行初步的生物信息学分析。结果:通过功能聚类、代谢途径分析和基因注释等手段分析了消减cDNA文库的特异基因片段。结论:对消减文库特异基因片段的功能分析,为进一步分离和鉴定依光型和非依光型花青素合成相关基因奠定了基础。
- 许志茹李春雷孙燕李玉花
- 关键词：芜菁消减文库功能分析
- 一种大规模筛选单克隆及提取质粒的改进方法被引量：1
- 2004年
- 利用α-互补(X-gal+IPTG)从cDNA文库中筛选特异克隆,以此去除含有未插入片段和插入片段小的克隆。运用展库的方法,通过辅助噬菌体对文库中多个载体的切割,将载体以质粒的形式转化到大肠杆菌中;同时对质粒DNA碱裂解提取方法做了改进,建立了一种简单实用的大量提取质粒DNA的方法。该方法利用特定的蛋白质吸附膜吸附提取过程中的蛋白质,从而去除了使用酚-氯仿抽提蛋白质的复杂过程,减少了质粒DNA的损失,是一次性获得大规模质粒DNA的有效方法。获取的质粒DNA样品在纯度和浓度上都可以满足测序、PCR及Southern杂交等分子生物学实验的要求。
- 许志茹李玉花
- 关键词：CDNA文库质粒克隆特异基因蛋白质
