谭中标
- 作品数:2 被引量:4H指数:1
- 供职机构:江南大学生物工程学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 脂肪酶热稳定性改造研究进展被引量:4
- 2014年
- 热稳定性改造是脂肪酶酶学性质研究的热点之一,随着技术的发展,越来越多的有效手段被用于脂肪酶热稳定性改造。作者综述了影响脂肪酶热稳定性的主要因素、提高其热稳定性的研究方法以及最新研究成果,为脂肪酶的进一步改造提供依据,并对其他酶的酶学性质改造具有借鉴意义。
- 谭中标李剑芳邬敏辰殷欣胡蝶董运海
- 关键词:脂肪酶热稳定性随机突变定向进化定点突变
- 圆弧青霉碱性脂肪酶在毕赤酵母中的高效表达
- 2010年
- 目的在毕赤酵母(Pichia pastoris)中高效表达圆弧青霉碱性脂肪酶(Alkaline lipase,LipⅠ)。方法采用RT-PCR法从圆弧青霉PG37中扩增lipⅠ基因的cDNA片段,克隆入表达质粒pPIC9K中,构建重组表达质粒pPIC9K-lipⅠ,转化入毕赤酵母GS115,筛选高拷贝重组子GS115/lipⅠ,甲醇诱导表达,并对诱导表达条件进行初步优化。结果 GS115/lipⅠ在培养基初始pH6.0,甲醇添加量1.0%的BMMY培养基中,于30℃诱导96h,发酵液上清中LipⅠ的活性为10.5U/ml。在培养基初始pH9.0,甲醇添加量1.0%的BMMY培养基中,24℃诱导120h,GS115/lipⅠ发酵液上清中LipⅠ的活性最高,达407U/ml。结论在毕赤酵母GS115中高效表达了具有活性的圆弧青霉LipⅠ。
- 谭中标邬敏辰张慧敏李剑芳
- 关键词:脂肪酶毕赤酵母基因表达