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隋修锟: 作品数：24 被引量：39H指数：3; 供职机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划国家公益性行业科研专项更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生更多>>

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IP-10与IL-17A作为牛结核病诊断的分子标识的初步验证: <正>本研究以临床结核病阳性牛和人工感染牛为试验对象,收集外周血淋巴细胞,经牛结核菌素(PPD-B)或重组CE蛋白刺激后,用荧光定量PCR和夹心ELISA方法检测外周血淋巴细胞中IL-6、IL-12A、IL-17A、IP...; 隋修锟高新桃鑫婷贾红朱鸿飞; 文献传递

牛分枝杆菌PPE68与Mb1230以及PPE57和PE-PGRS35的表达纯化及其在牛结核病血清学诊断中的初步应用被引量：2: 2019年; 为筛选和评估牛分枝杆菌毒力菌株与卡介苗(BCG)基因差异区域(region of differences,RD)蛋白在牛结核病诊断中的效果,本研究表达了牛分枝杆菌RD1区的PPE68、RD9区的Mb1230、R11区的PPE57和RD2区的PE-PGRS35,并纯化得到纯度大于90%的重组蛋白。通过优化条件建立了间接ELISA检测方法,并采用该方法检测了结核病阳性牛和健康牛血清中针对PPE68、Mb1230、PPE57和PE-PGRS35的IgM和IgG抗体水平,评价其在牛结核病血清学诊断中的潜力。结果显示,在结核病阳性牛中,针对PPE68、Mb1230、PPE57和PE-PGRS35的IgG抗体检出率分别为13.3%、43%、50%和30%,IgM抗体检出率分别为30%、10%、36%和33%。结果表明,R11区的PPE57和RD2区的PE-PGRS35有潜力作为牛结核病血清学检测的候选抗原,用于牛结核病的诊断。; 李明张雅娜林伟东隋修锟贾红贾红侯绍华姜一曈朱鸿飞朱鸿飞; 关键词：牛分枝杆菌 IGM

新的高致病性PRRSV毒株FZ16A的分子特征及其致病性的研究被引量：3: 2018年; 为了掌握猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV）分离株的遗传变异特点,从福建省某疑似猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）发病猪场采集病料并分离病原,采用RT-PCR、间接免疫荧光试验及基因测序等方法将其鉴定为HP-PRRSV,命名为FZ16A株。对FZ16A株ORF5基因进行克隆和测序,并进行分子生物学研究。将分离毒株接种PRRSV抗原、抗体双阴性的60日龄仔猪,通过观察临床症状、病理解剖变化及其病理切片等指标初步探讨分离毒株的致病性。结果,FZ16A株是北美（NA）基因型高致病性PRRSV（HP-PRRSV）变异株。同源性分析显示,FZ16A株ORF5基因与北美株VR-2332核苷酸（氨基酸）序列的相似性为87.9%（85.1%）,与JXA1的相似性为98.8%（97%）,与欧洲典型菌株Lelystad病毒的相似性为63.3%（56.9%）。系统发育分析表明,FZ16A属于NA基因型,与其他高致病性PRRSV毒株具有相同的亚型。氨基酸序列分析表明,与VR-2332株相比,FZ16A在信号肽、跨膜区（TM）、初级中和表位（PNE）、非中性表位和N-糖基化位点方面有不同程度的变异。抗原性分析显示,FZ16A ORF5基因产物与JXA1具有相似的抗原性,抗原表位主要位于aa32-37、aa50-55、aa127-133、 aa136-142、aa147-156、aa159-171、aa174-185和aa193-198区域。致病性分析表明,该分离毒株感染猪后能引起体温升高、咳嗽、食欲下降等临床症状,但并未引起试验动物死亡。剖检结果显示,FZ16A分离株能引起试验动物肺部组织实变,淋巴结肿大。肺脏病理切片可见FZ16A感染组动物有明显的间质增生性肺炎,肺泡壁毛细血管扩张充血,肺泡壁增厚等变化。以上结果表明,本研究分离的FZ16A株是新的变异毒株,丰富了该地区的PRRSV基因数据库,并为该地区PRRSV分子流行病学研究及防控奠定了一定基础。; 隋修锟侯绍华侯绍华张珊贾红贾红郭晓宇袁维峰姜一曈鑫婷; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF5基因分子特征

表达山羊淋巴细胞活化分子的细胞系及其构建方法与应用: 本发明提供一种能够稳定表达山羊淋巴细胞活化分子的细胞系，其为导入携带有山羊SLAM基因的真核表达载体的Vero‑E6细胞系。本发明成功构建了表达小反刍兽疫病毒的山羊SLAM受体的Vero‑E6细胞系，接种小反刍兽疫病料后...; 侯绍华金红岩封家旺姜一曈贾红梁瑞英隋修锟; 文献传递

四株鸽Ⅰ型副黏病毒的分离鉴定及基因型分析被引量：3: 2013年; 为掌握安徽省鸽Ⅰ型副黏病毒病的流行特点及其与鸡新城疫各分离株的相互关系,对从安徽省不同鸽场鸽病料中分离的4株病毒(AH-2012、AH-2012-1、AH-2012-2、AH-2012-3),采用RT-PCR、血清学试验及基因序列测定等方法进行鉴定。结果显示,这些分离株均具有血凝性,并能使NDV标准阳性血清特异性抑制;PCR扩增出F基因特异性目的片段,其核苷酸序列与GenBank上登录的鸽Ⅰ型副黏病毒的同源性较高,相似性达94.8%;与传统的鸡源新城疫病毒标准株LaSota、F48E9的同源性较低,相似性约为80%;F基因编码蛋白的第112～117位氨基酸序列为R-R-Q-K-R-F。结果表明,这些毒株为鸽Ⅰ型副黏病毒,属于基因Ⅵ型。; 隋修锟李刚李铁吴迪程朝飞陶春爱黄华欣; 关键词：F基因

小反刍兽疫病毒Nigeria75/1株重组H蛋白的表达及初步应用: 小反刍兽疫(Peste des petits ruminants, PPR)是由小反刍兽疫病毒(Peste des petits ruminants virus, PPRV)引起的一种高度危害性传染病,其主要感染山羊、绵...; 隋修锟; 关键词：小反刍兽疫病毒 H基因杆状病毒单克隆抗体间接ELISA; 文献传递

2株猪繁殖与呼吸综合征病毒的致病性分析被引量：4: 2017年; 为追踪猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)分离株的变异特点,本研究于2016年从河北和福建疑似猪繁殖与呼吸障碍综合征(PRRS)发病猪场采集病料,接种Marc-145细胞,产生合胞体样细胞病变,RT-PCR和间接免疫荧光试验鉴定为HP-PRRSV,将其分别命名为PRRSV CZ16A和NP16A。为研究PRRSV分离株CZ16A和NP16A对猪的致病性,将分离毒株经噬斑纯化后分别接种PRRSV抗原、抗体双阴性的60日龄健康仔猪,通过临床观察、解剖病理变化及病毒血症检测等指标初步探讨两株PRRSV的致病性。结果表明,分离株CZ16A和NP16A感染猪后均能够在动物体内复制,并引起体温升高,但两株PRRSV分离株均未引起试验动物的发病和死亡,剖检结果显示NP16A分离株能引起动物肺部实变、淋巴结肿大,其毒力比CZ16A分离株稍强。; 李志隋修锟吴竞鑫婷李明高新桃姜一曈侯绍华; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒

小反刍兽疫病毒H基因DNA疫苗的构建及对小鼠的免疫原性: 2014年; 旨在构建表达小反刍兽疫病毒(PPRV)H蛋白的核酸疫苗,并评价其对小鼠的免疫原性。利用RT-PCR扩增了PPRV的H基因并将其克隆到pcDNA3.1(+)载体中,构建真核表达质粒pcDNA3.1-H,然后转染鸡胚成纤维(CEF)细胞,采用间接免疫荧光和Western blot检测H蛋白的瞬时表达情况。将重组质粒通过后腿肌肉注射的方式免疫BALB/c小鼠,采用间接ELISA、淋巴细胞增殖试验和细胞因子检测评价该DNA疫苗的免疫效果,结果表明,成功构建了重组真核表达质粒pcDNA3.1-H,并且能够在CEF细胞中表达。免疫小鼠后,pcDNA3.1-H能够诱导小鼠产生较高的特异性抗体水平,DNA疫苗免疫组小鼠的脾淋巴细胞增殖试验刺激指数(SI)均高于空载体和PBS免疫组,并且能够分泌较高水平的IFN-γ和IL-4。因此,制备的DNA疫苗免疫小鼠后可诱导体液免疫应答和细胞免疫应答,具有较好的应用前景。; 李文超隋修锟金红岩梁琳王文泉李刚; 关键词：小反刍兽疫病毒 DNA疫苗 H基因免疫原性

小反刍兽疫病毒M蛋白主要抗原表位区的原核表达及鉴定被引量：9: 2013年; 为了制备小反刍兽疫病毒(PPRV)特异性单抗及临床抗体水平监测,通过在线软件分析PPRVNigeria75/1株M蛋白可能包含的B细胞线性表位位点,结合可溶性预测,设计1对引物,扩增303bp目的基因。将目的基因克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,用IPTG诱导表达,纯化,SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定结果显示,所构建的重组蛋白以可溶性形式高效表达并具有良好的反应原性,为制备特异性单抗及包被抗原用于PPRV抗体水平监测奠定了一定基础。; 黄华欣李刚史利军赵占中王勇金红岩李文超陶春爱隋修锟; 关键词：小反刍兽疫 M蛋白抗原表位原核表达

小反刍兽疫病毒受体细胞系的构建及应用被引量：2: 2017年; 为建立一株稳定表达山羊淋巴细胞活化分子(signaling lym phocyte activation molecule,SLA M)的细胞系,给研究小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)感染机制、病毒的分离和疫苗生产等奠定基础,本研究采用PCR扩增了SLAM基因,并将其胞外区连接至pD isplay载体,构建了重组质粒pDisplayg SLAM;利用p Display载体的G 418抗性及抗SLAM单克隆抗体,筛选表达gSLAM的Vero-E6细胞系,对该细胞系进行PCR鉴定、间接免疫荧光试验和Western-blot鉴定。采用该细胞系分离PPRV,并与Vero-E6细胞同时吸附PPRV分离株和疫苗株病毒后进行比较。结果,成功筛选出表达g SLAM的Vero-E6细胞系gSLAM/Vero-E6,并通过PCR方法成功扩增出gSLAM基因。通过间接免疫荧光试验和Western-blot鉴定,gSLAM基因成功表达在细胞膜上,并分离出一株PPRV。gSLAM/Vero-E6细胞系和Vero-E6细胞同时吸附PPRV分离株和疫苗株后,gSLAM/Vero-E6细胞系较Vero-E6细胞产生更明显的细胞病变。上述研究结果表明,gSLAM/Vero-E6细胞系对PPRV是高度敏感,为PPRV的后续研究提供了试验材料。; 金红岩封家旺梁琳赵玲娜隋修锟史利军侯绍华李刚; 关键词：小反刍兽疫病毒细胞系

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