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马庆红: 作品数：27 被引量：40H指数：5; 供职机构：江苏省农业科学院更多>>; 发文基金：江苏省农业科技自主创新基金国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生航空宇航科学技术一般工业技术更多>>

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一种生猪的养殖方法: 本发明提供一种生猪的养殖方法，属于动物养殖技术领域。所述生猪的养殖方法，包括以下步骤：（1）将妊娠后期种猪群送入消毒好的产房隔离饲养，自然分娩出新生仔猪；（2）新生仔猪由母猪哺乳至7日龄断奶，转移至安装有空气过滤系统的房...; 甘源邵国青华利忠刘茂军冯志新熊祺琰马庆红; 文献传递

猪鼻支原体vlp重复区融合蛋白的构建表达及反应原性分析: 2013年; 目的猪鼻支原体(Mhr)是临床猪场常见病原菌之一,同时研究证实其与多种人类肿瘤有关。目前对Mhr的血清学检测尚无有效的方法。本研究以Mhr可变脂蛋白(vlp)家族为对象,设计vlp家族蛋白重复区片段融合蛋白,以作为检测用包被抗原使用。方法根据大肠杆菌的密码子偏嗜性,设计并构建串联表达7种Mhr可变脂蛋白vlpA、B、C、D、E、F、G重复区片段的重组蛋白vlpA-G基因。将该基因片段装入pET-32a(+)载体中转化大肠杆菌,筛选鉴定获得阳性工程菌。IPTG诱导表达,镍柱亲和层析获得纯化的重组蛋白vlpA-G。Western Blot鉴定该重组蛋白与Mhr阳性血清的反应能力,并利用该重组蛋白为包被抗原初步建立间接ELISA方法用于检测猪血清中的Mhr抗体。结果构建表达vlpA-G重组蛋白的基因工程菌,经PCR及DNA测序正确。IPTG诱导后出现明显蛋白条带,经镍柱亲和层析纯化获得vlpA-G重组蛋白。Western Blot试验证明重组蛋白vlpA-G能够和Mhr阳性兔血清产生明显的阳性杂交带;利用重组vlpA-G为包被抗原初步建立间接ELISA检测方法可成功检测Mhr阳性猪血清,证明该重组vlpA-G蛋白具有良好的反应原性。结论本研究构建了重组蛋白vlpA-G并证实该蛋白具有良好的反应原性,可作为Mhr血清学诊断方法研究的候选抗原,同时也为Mhr重组蛋白疫苗提供可选抗原。; 熊祺琰纪燕刘占军马庆红冯志新刘茂军白方方邵国青; 关键词：原核表达反应原性

猪肺炎支原体和猪鼻支原体双重PCR检测方法的建立与应用被引量：11: 2012年; 根据猪肺炎支原体(Mhp)和猪鼻支原体(Mhr)的16S rRNA基因设计3条引物,建立Mhp和Mhr的双重PCR检测方法,并对该方法进行了特异性和敏感性试验。应用建立的方法检测了临床样品和疫苗样品。结果显示,该方法具有良好的特异性,最低可检测到0.66 ng的Mhp基因组DNA和0.58 ng Mhr基因组DNA。临床样品和疫苗样品检测结果与普通PCR检测结果一致。该双重PCR方法可用于Mhp与Mhr的鉴别、诊断以及疫苗纯粹性检查,快速而准确。; 刘茂军王占伟韦艳娜马庆红杨莉莉周勇岐邵国青; 关键词：猪肺炎支原体 PCR

猪鼻支原体vlp家族重组蛋白的构建表达及黏附宿主细胞功能检测: 目的猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis)在临床猪场的感染率极高,可引起猪的多种慢性炎症,同时其与多种人类肿瘤具有相关性,属人兽共患性病原。目前对猪鼻支原体的黏附因子及致病机制等尚不清楚。本研究以猪鼻支...; 王佳熊祺琰纪燕倪博张必雄马庆红刘茂军冯志新邵国青

集成联合用药、隔离早期断奶(SEW)和“三点式”生产体系培育猪气喘病阴性群被引量：8: 2014年; 为探索猪肺炎支原体阴性群的培育方法,本试验研究了集成联合用药、SEW和"三点式"饲养管理体系等技术对猪肺炎支原体的净化效果。先通过妊娠母猪的筛选,母猪程序性用药,SEW技术,屏障隔离系统,"三点式"生产饲养管理体系及仔猪程序性用药的培育方法,再通过猪肺炎支原体血清抗体检测和荧光定量PCR检测鼻拭子的方法对所培育的仔猪进行长达4个月的监测,结果发现新培育的5批猪在35日龄后血清抗体均为阴性,鼻拭子抗原检测全为阴性。结果表明集成联合用药、SEW和"三点式"生产管理体系技术可以有效净化猪肺炎支原体,为国内猪气喘病的控制和净化提供理论基础及临床实践经验。; 甘源华利忠熊祺琰马庆红徐飞扬刘茂军杜改梅武昱孜韦艳娜冯志新王海燕白方方邵国青; 关键词：SEW 早期断奶药物净化

巴马猪人工感染猪鼻支原体和猪滑液支原体后鼻腔粘膜中特异性sIgA抗体分泌规律研究: 目的巴马猪在分别人工感染猪鼻支原体和猪滑液支原体后,研究其鼻腔粘膜中特异性sIgA抗体分泌规律。材料与方法取猪鼻支原体(11051207株,109CCU/ml)和猪滑液支原体(ATCC27059株,108CCU/ml...; 白昀冯志新熊祺琰宋伟祥韦艳娜马庆红甘源邵国青

猪支原体肺炎活疫苗佐剂及肌肉注射免疫效力研究: 目的猪支原体肺炎是危害世界养猪业的重要疾病之一,疫苗接种是控制该病的最有效手段。猪支原体肺炎168株活疫苗通过肺内免疫接种可高效控制该病的发生。本研究旨在研制猪支原体肺炎活疫苗的免疫佐剂,开发该活疫苗的肌肉注射免疫新途...; 熊祺琰王佳韦艳娜冯志新甘源马庆红华利忠刘茂军邵国青

猪鼻支原体TaqMan MGB探针荧光定量PCR方法的建立被引量：5: 2013年; 为建立快速检测猪鼻支原体(M.hyorhinis)的荧光定量PCR方法,本研究根据GenBank中登录的p37基因序列设计并合成引物及MGB探针,构建含有p37基因的重组质粒,以其为标准品绘制标准曲线,并检测该方法的特异性、敏感性和重复性。结果显示该方法具有良好的特异性,与猪肺炎支原体、猪絮状支原体、猪滑液支原体、鸡毒支原体、副猪嗜血杆菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、猪圆环病毒、猪瘟病毒及猪流感病毒无交叉反应,对M.hyorhinis的检测敏感性为10拷贝/μL,并且稳定性好,变异系数小于2%。利用建立的荧光定量PCR方法对55份临床样品进行检测,阳性检出率为87.3%(48/55),而分离培养方法和普通PCR的阳性检出率分别为41.8%(23/55)和29.1%(16/55)。该结果表明,建立的方法特异性强、敏感性高、稳定性好,可以用于M.hyorhinis临床样品的检测,对M.hyorhinis的快速和定量检测具有重要意义。; 白方方武昱孜刘茂军冯志新熊祺琰韦艳娜马庆红邵国青; 关键词：荧光定量PCR

重组猪鼻支原体P37蛋白的原核表达及免疫原性分析: 2013年; P37是猪鼻支原体(Mhr)的主要免疫原之一,也是Mhr中目前唯一已知的与肿瘤直接相关的抗原。为原核表达Mhr P37蛋白并分析其免疫原性,本研究通过人工合成能够在E.coli中优势表达P37蛋白的编码序列,以pET-28a(+)为载体对P37重组蛋白进行原核表达。SDS-PAGE及western blot鉴定结果表明,表达的P37重组蛋白约为45.97 ku并能够被Mhr高免血清识别。利用纯化的重组蛋白为包被抗原初步建立间接ELISA检测方法,检测结果显示与Mhr高免血清呈强阳性反应。此外,将P37重组蛋白免疫小鼠,能够诱导高滴度特异性抗体,表明该蛋白具有良好的免疫原性。本研究结果为Mhr检测方法的建立、P37蛋白功能研究以及P37相关重组肿瘤疫苗和Mhr疫苗的研制奠定基础。; 熊祺琰刘占军马庆红冯志新刘茂军白方方邵国青; 关键词：原核表达免疫

猪肺炎支原体不同蛋白抗原检测疫苗诱导IgG产生规律的研究被引量：5: 2013年; 为了筛选出特异性好和敏感性高的ELISA用猪肺炎支原体抗原蛋白,作者分别将猪肺炎支原体灭活疫苗和168株菌活疫苗分别经肌肉和肺内注射途径免疫猪,免疫后7、15、30和56d采集分离血清。以P97R1、P36、P46、DnaK单个蛋白和混合蛋白为猪支原体肺炎血清抗体ELISA用特异性蛋白抗原,与猪肺炎支原体IDEXX抗体检测试剂盒比较检测免疫后抗体的发生规律,并对检测结果进行对比。结果表明,P36和P97R1能够检测出比较高的母源抗体水平;DnaK和P46检测的抗体滴度变化趋势相一致,且检测的抗体高滴度维持时间较长;与其它抗原相比,混和蛋白在56d时检测到较高的抗体水平。混合抗原的检测结果与IDEXX具有较高的符合率,但检测敏感性比IDEXX高,且较IDEXX符合抗体变化规律。结果表明混合蛋白具有较高的检测敏感性,可以更加准确地监测该病的感染或免疫状态。; 杜改梅刘茂军韦艳娜甘源马庆红邵国青; 关键词：猪肺炎支原体 IGG P36 DNAK

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