马文东
- 作品数：26 被引量：102H指数：7
- 供职机构：河北联合大学更多>>
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- 脑缺血预处理对大鼠海马CA1区肌细胞促进因子2C磷酸化水平的影响
- 2007年
- 目的现察大鼠全脑缺血预处理后不同时间点海马CA1区肌细胞促进因子(Myocyte enhancer factor,MEF)2C磷酸化(激活)的变化规律。方法建立Sprague-Dawley大鼠四动脉结扎全脑缺血模型,大鼠随机分成二组,对照组(sham组)和实验组(脑缺血预处理组)。采用免疫印迹法和免疫组织化学方法检测实验组MEF2C磷酸化水平。结果全脑缺血预处理(3min)48h后再次严重缺血6min,复灌6h、1d、3d、5d海马CA1区MEF2C激活均高于对照组,3d达到最高峰。免疫组织化学结果显示,预处理后的1d磷酸化的MEF2C主要分布在细胞核。结论海马CA1区MEF2C磷酸化水平的升高可能参与了脑缺血耐受保护机制的形成。
- 马文东王瑞敏张丽娟杨方
- 关键词：脑缺血预处理蛋白表达
- Ac-SDKP对ROCK通路介导的肺成纤维细胞向肌成纤维细胞分化的调节作用被引量：6
- 2013年
- 目的 研究N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸（Ac-SDKP）是否能够通过对转化生长因子-β1（TGF-β1）介导的ROCK通路的调节,抑制肺成纤维细胞向肌成纤维细胞的分化.方法 胰酶消化法原代培养肺成纤维细胞,取4代肺成纤维细胞分为对照组、TGF-β1诱导分化组、Y-27632干预组和Ac-SDKP干预组.激光共聚焦扫描显微镜观察ROCK、SRF以及d-SMA在细胞内的定位与分布情况;蛋白免疫印迹法（Western Blot）检测ROCK、SFR、α-SMA、Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白在肺成纤维细胞的表达;实时定量荧光聚合酶链反应法（Real time PCR）检测ROCK、SFR、α-SMA mRNA的表达.结果 与对照组相比较,给予TGF-β1诱导刺激后,激光共聚焦扫描显微镜显示胞体内出现大量平行或交叉排列的α-SMA抗体标记的肌丝,诱导刺激6、12、24 h后,ROCK、SRF、α-SMA蛋白和mRNA以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达均增强,差异均有统计学意义（P＜0.05）.与TGF-β1诱导分化组比较,给予Y-27632干预后,在相应时间点ROCK、SRF、d-SMA蛋白和mRNA以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达均明显降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）.给予Ac-SDKP干预后,在相应时间点ROCK、SRF、α-SMA蛋白和mRNA以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达也较TGF-β1诱导分化组明显降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 Ac-SDKP能够通过对TGF-β1介导的ROCK信号转导通路的调控,阻抑大鼠成纤维细胞向肌成纤维细胞的分化和抑制胶原蛋白的合成,可能是Ac-SDKP发挥其抗（矽）肺纤维化的作用机制之一.
- 袁媛杨方徐洪于婉莹孙月邓海静马文东魏中秋王瑞敏
- 关键词：N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸
- 抗纤维化短肽N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸对大鼠心脏成纤维细胞胶原合成与降解的调节作用被引量：20
- 2006年
- 目的探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸（AcSDKP）对血小板源性生长因子（PDGF）诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖、胶原合成和降解代谢的调节作用。方法分离培养新生大鼠心脏成纤维细胞。采用^3H-TdR和。H-脯氨酸掺入法分别检测心脏成纤维细胞增殖与胶原蛋白合成。Western blot法检测心脏成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达和基质金属蛋白酶（MMP）-1蛋白的表达。明胶酶谱法检测心脏成纤维细胞MMP-2和MMP-9活性的表达。结果PDGF促进心脏成纤维细胞增殖、胶原合成，Ⅰ、Ⅲ型胶原表达，以及MMP-2、MMP-9活性和MMP-1表达。AcSDKP对PDGF介导的心脏成纤维细胞增殖、胶原合成均有抑制作用。AcSDKP上调由PDGF介导的心脏成纤维细胞MMP-2、MMP-9活性和MMP-1的表达。结论AcSDKP抑制PDGF介导的心脏成纤维细胞增殖和胶原的合成，上调MMPs活性或表达，促进胶原的降解，这些可能与AcSDKP抗心脏纤维化作用相关。
- 杨方朱曦龄王丽平宋旭东王瑞敏李治国罗玲户万秘马文东裴鑫张丽娟李琪佳
- 关键词：成纤维细胞肽类血小板源性生长因子
- ERK1/2及JNK通路在AcSDKP抑制PDGF诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖和胶原蛋白表达中的作用被引量：5
- 2012年
- 目的探讨细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)及C-Jun氨基末端激酶(JNK)通路在N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)抑制血小板源性生长因子(PDGF)诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖和胶原蛋白表达中的作用。方法将新生Wistar大鼠心脏成纤维细胞分为对照组(A组)、10ng/ml PDGF刺激组(B组)、10-9 mol/L AcSDKP+10ng/ml PDGF干预组(C组)、25μmol/L PD98059+10ng/ml PDGF干预组(D组)和10nmol/L SP600125+10ng/ml PDGF干预组(E组)。MTT法检测心脏成纤维细胞代谢活性的变化,Western blot法检测大鼠心脏成纤维细胞中ERK1/2、JNK及磷酸化-ERK1/2、磷酸化-JNK蛋白表达和Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果与A组相比,B组心脏成纤维细胞代谢活性、Ⅰ型及Ⅲ型胶原蛋白表达、磷酸化-ERK1/2及磷酸化-JNK蛋白表达均增强(P<0.05);而C、D、E组能明显逆转B组上述各观察指标的增加过程(P<0.05)。结论 AcSDKP能够通过阻断PDGF介导的ERK1/2及JNK通路的激活,进而抑制大鼠心脏成纤维细胞增殖和胶原蛋白表达。
- 张丽娟张晓明马文东李倩杨方王瑞敏
- 关键词：细胞外信号调节激酶1/2N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸
- 血小板源性生长因子诱导大鼠心脏成纤维细胞胶原合成的信号转导途径研究
- 2007年
- ①目的探讨细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)途径在血小板源性生长因子(PDGF)刺激大鼠心脏成纤维细胞胶原合成中的作用。②方法分离培养新生大鼠心脏成纤维细胞。免疫细胞化学法、Western blot法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的变化。③结果与对照组相比,在PDGF刺激下,大鼠心脏成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原表达增加,PD98059 25μmol/L预孵育1小时能够抑制PDGF的刺激作用。④结论PDGF能够通过ERK1/2途径调节大鼠心脏成纤维细胞的胶原合成。
- 张丽娟李倩马文东陈萍闫静波王瑞敏杨方
- 关键词：血小板源性生长因子细胞外信号调节激酶1/2心脏成纤维细胞
- 抗纤维化短肽对血清诱导的心脏成纤维细胞增殖和胶原合成与I、III型胶原表达抑制作用的实验研究被引量：7
- 2008年
- ①目的探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)对不同浓度血清(FBS)诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖和胶原合成的调节作用。②方法选用新生大鼠心脏成纤维细胞;采用3H-TdR掺入法检测心脏成纤维细胞的增殖;采用3H-脯氨酸掺入法检测心脏成纤维细胞胶原的合成,采用westernblot法检测心脏成纤维细胞I型与III型胶原的表达。③结果在0.4%、2%和10%几种血清浓度的条件下,随着血清浓度的增加,反映心脏成纤维细胞增殖3H-TdR掺入量和胶原合成的3H-脯氨酸掺入量增加。表明一定浓度的血清能诱导心脏成纤维细胞增殖和胶原合成。与0.4%血清的基础培养条件相比较,10%高浓度血清能刺激心脏成纤维细胞I、III型胶原蛋白的表达。在10-10~10-8mol/L浓度范围内,AcSDKP对10%诱导的心脏成纤维细胞增殖和胶原合成有抑制作用,并且在10-9mol/L时,AcSDKP对心脏成纤维细胞增殖、胶原合成抑制作用最强。同时10-9mol/L的AcSDKP对心脏成纤维细胞I、III型胶原蛋白的表达也有明显的抑制作用。④结论AcSDKP对血清介导的心脏成纤维细胞增殖、胶原合成以及I、III型胶原蛋...
- 马文东张丽娟罗玲裴新户万秘杨方
- 关键词：N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸血清心脏成纤维细胞胶原
- N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸对血小板洐生生长因子介导的NIH3T3细胞增殖的抑制调节作用被引量：14
- 2005年
- 目的:探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)对血小板洐生生长因子(PDGF)介导的NIH3T3细胞增殖的抑制调节作用。方法:采用MTT法和免疫组化法检测NIH3T3细胞增殖和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果:在 10-10～10-8mol／L浓度范围内,AcSDKP对PDGF介导的NIH3T3细胞增殖均有抑制作用,并在10-9 mol／L浓度时其抑制作用最佳。PDGF对NIH3T3细胞PCNA的表达具有增强作用,而AcSDKP对PDGF介导的NIH3T3细胞PCNA的表达有显著抑制作用。结论:AcSDKP对PDGF介导的NIH3T3细胞增殖有明显抑制作用。
- 杨方赵丹马文东罗玲户万秘王丽萍朱曦玲孙树勋
- 关键词：N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸增殖细胞核抗原NIH3T3细胞细胞增殖
- TGF-β_1介导的RhoA/ROCK通路在大鼠肺肌成纤维细胞分化中的调节作用被引量：21
- 2013年
- 目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)介导的RhoA/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)通路在调控肺成纤维细胞向肌成纤维细胞分化过程中的作用。方法:胰酶消化法获得原代培养的肺成纤维细胞,进行以下实验:(1)观察TGF-β1诱导肺成纤维细胞不同时间后p-RhoA、ROCK、磷酸化肌球蛋白磷酸酶靶亚基(pMBS)、血清应答因子(SRF)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型和III型胶原蛋白表达变化;(2)将细胞分为对照组、TGF-β1诱导分化组和Y-27632(ROCK通路阻滞剂)干预组,免疫细胞化学染色与Western blotting法分别观察与检测ROCK、p-MBS、SRF、α-SMA、I型和III型胶原蛋白在细胞内的定位分布与表达。结果:(1)经TGF-β1诱导24 h后,大鼠肺成纤维细胞胞体内出现大量平行或交叉排列的α-SMA抗体标记的肌丝。随着TGF-β1诱导刺激时间的延长,p-RhoA、ROCK、p-MBS、SRF、α-SMA、I型和III型胶原蛋白表达逐渐增高,其中RhoA/ROCK信号(p-RhoA、ROCK、p-MBS)、SRF和α-SMA蛋白分别在诱导后6 h、12 h和24 h达到高峰。I型胶原和III型胶原蛋白表达均在24 h达高峰,分别为诱导前的2.19和3.04倍(P<0.05)。(2)与TGF-β1诱导分化组比较,当给予Y-27632干预后,在相应时点ROCK、p-MBS、SRF、α-SMA、I型和III型胶原蛋白表达均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TGF-β1通过ROCK信号转导通路的活化,刺激了大鼠肺成纤维细胞向肌成纤维细胞分化,进而促进了胶原蛋白的合成,可能在(矽)肺纤维化形成过程中发挥着重要作用。
- 马文东袁媛杨奕徐洪邓海静于婉莹孙月魏中秋杨方
- 关键词：转化生长因子Β肌成纤维细胞肺纤维化
- AcSDKP对矽肺大鼠TGF-β受体介导的P38MAPK信号转导途径调节与作用被引量：5
- 2014年
- 目的 观察转化生长因子-β （TGF-β）Ⅰ型、Ⅱ型受体、P38丝裂原活化蛋白激酶（P38MAPK）和Ⅰ型、Ⅲ型胶原在矽肺大鼠和肺成纤维细胞的分布与表达,探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸（AcSDKP）对TGF-β受体介导的P38MAPK信号转导通路调节与其抗矽肺纤维化作用的关系.方法 非暴露式支气管内灌注法制作大鼠矽肺模型,分为对照组,矽肺模型组和AcSDKP治疗组（每组10只）.培养新生大鼠肺成纤维细胞,分为对照组、TGF-β1刺激组、受体阻断剂组、P38MAPK特异性抑制剂干预组和AcSDKP干预组.免疫组化法、免疫印迹法（Western-blot）检测TGF-βⅠ型和Ⅱ型受体、P38 MAPK蛋白以及Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白的表达.用实时定量荧光聚合酶链式反应（real-time PCR）法检测TGF-β Ⅰ型和Ⅱ型受体mRNA的表达.用激光扫描共聚焦显微镜法检测磷酸化P38在肺成纤维细胞内分布与核转位的情况.结果 在动物模型中,AcSDKP治疗组大鼠肺组织内TGF-β Ⅰ型受体、Ⅱ型受体和磷酸化P38 MAPK蛋白的表达分别是矽肺模型组的86.12％、41.01％和42.63％;AcSDKP治疗组Ⅰ型、Ⅲ型胶原的表达,分别是矽肺模型组的89.05％和52.71％,差异均有统计学意义（P＜0.05）.在培养的肺成纤维细胞实验中,AcSDKP干预组TGF-β1诱导刺激的TGF-β Ⅰ型受体、Ⅱ型受体mRNA的表达分别是TGF-β1刺激组的42.26％和54.33％;TGF-β Ⅰ型受体、Ⅱ型受体和磷酸化P38 MAPK蛋白的表达分别是TGF-β1刺激组的58.14％、51.40％和45.6％;AcSDKP干预组磷酸化P38MAPK蛋白由胞质向胞核的转位,核浆比值减少,为TGF-[β1刺激组的68.60％;Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达降低,分别是TGF-β刺激组的58.04％和44.74％,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 AcSDKP能够抑制TGF-β受体介导的P38 MAPK信号转导途径,从而抑制胶原蛋白的表达,进而发挥其抗矽肺纤维化的作用.
- 魏中秋孙月程华马文东徐洪李倩张丽娟王瑞敏杨方
- 关键词：N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸矽肺受体
- 低剂量木黄酮降低缺血后神经元损伤并改善学习记忆功能被引量：1
- 2014年
- 目的探讨染料木黄酮(GEN)对全脑缺血(GCI)大鼠海马CA1区神经元的神经保护作用及其可能的机制。方法建立大鼠4动脉结扎全脑缺血模型,实验动物随机分为假手术组(sham)、缺血再灌注组(I/R)、GEN处理组、ICI 182,780组和溶剂对照组。采用Fluoro-Jade B和神经元特异性核蛋白(NeuN)染色观察海马CA1区神经元存活情况,TUNEL技术观察海马CA1区神经元的凋亡。Morris水迷宫观察大鼠的空间学习和记忆功能。结果 GEN发挥神经保护作用的最佳剂量为1.0 mg/kg;与sham组相比,I/R组和溶剂对照组海马CA1区TUNEL阳性神经元数量显著增多(P<0.01),而1.0 mg/kg GEN可显著降低缺血后TUNEL阳性神经元数量(P<0.01);与I/R组相比,GEN能明显改善缺血后大鼠的空间学习和记忆能力。缺血前侧脑室给予ICI 182,780可显著降低GEN的神经保护作用(P<0.01)。结论低剂量(1.0mg/kg)GEN可显著降低缺血后大鼠海马CA1区神经元损伤,改善认知功能,其分子机制可能与雌激素受体活性密切相关。
- 马文东涂静宜朱莹张茜唐慧王瑞敏
- 关键词：木黄酮再灌注原位缺口末端标记
