鲁静
- 作品数：7 被引量：42H指数：4
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：重庆市科委基金重庆市科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 四种方法保存羊膜的组织形态学研究被引量：16
- 2007年
- 目的观察4种常用的保存羊膜在不同保存期组织形态和超微结构的改变,为临床应用提供依据。方法取健康剖宫产产妇胎盘羊膜,随机分成4组保存:DMEM/甘油深低温组、纯甘油4℃组、无水酒精组、真空干燥组。于保存后1个月、3个月、12个月(DMEM/甘油组和纯甘油组),行HE染色光镜及透射电镜检查,观察其组织形态结构变化,以新鲜羊膜作为对照。结果(1)DMEM/甘油深低温保存组:光镜示保存1个月、3个月时羊膜组织结构基本完整,12个月时上皮细胞轻度破坏;透射电镜示在保存的各个时段羊膜上皮细胞完整,胞核局部溶解,线粒体肿胀,基底膜正常;(2)纯甘油4℃保存组:光镜观察保存1个月、3个月、12个月羊膜上皮细胞结构破坏,12个月基质层结构轻度破坏;透射电镜示保存各时段羊膜上皮细胞破坏明显,但基底膜基本正常;(3)无水酒精保存组:光镜示保存1个月、3个月时羊膜组织结构较完整;透射电镜示羊膜上皮细胞胞膜破坏,胞质、胞核溶解,基底膜变薄;(4)真空干燥保存组:光镜示保存1个月、3个月羊膜上皮细胞和部分基质层结构破坏明显;透射电镜示1个月、3个月时羊膜上皮细胞胞膜完整,核均质化与溶解并存,基底膜变薄。结论4种方法中,就组织形态和超微结构而言,以DMEM/甘油深低温保存法保存效果最好,纯甘油保存法次之,无水酒精和干燥保存法差。
- 鲁静赵敏张琪胡柯秦应祥
- 关键词：保存羊膜形态学超微结构
- 新鲜羊膜致I型超敏反应的变应原性研究被引量：2
- 2006年
- 研究新鲜人羊膜的变应原性及其致敏后发生I型超敏反应的可能性。建立豚鼠全身主动过敏实验模型。分新鲜羊膜组、新鲜蛋清组(阳性对照)和PBS液组(阴性对照),每组10只豚鼠。观察豚鼠在致敏期和激发后的反应,采用化学荧光法检测外周血组胺含量,血液流变分析系统检测4项血液流变学指标(全血高切变率黏度、全血低切变率黏度、血浆黏度、红细胞聚集指数)。致敏期间各组豚鼠的体重变化无明显差别(P>0.05);激发后羊膜组豚鼠与阴性组表现一致,无异常反应;羊膜组外周血组胺含量及4项血液流变学指标均与阴性对照无明显差别(P>0.05),与阳性对照有显著性差异(P<0.01)。经规范化无菌处理后的新鲜羊膜,一般不具有变应原性,不会引起I型超敏反应。
- 赵敏张琪曹唯希滕永真张晓萍胡柯鲁静秦应祥
- 关键词：人羊膜变应原
- 新鲜和保存羊膜移植后外周血T细胞变化及免疫病理学研究被引量：2
- 2008年
- 目的:对比研究新鲜羊膜和保存羊膜移植后的免疫反应,客观评价羊膜移植的免疫安全性。方法:建立BALB/c小鼠皮下埋植实验模型。按不同的埋植物分为单层新鲜羊膜组、双层新鲜羊膜组、甘油保存羊膜组、绒毛膜组(阳性对照)和单纯手术组(阴性对照);各组又随机分为5个亚组,分别对应术后1周、2周、4周、8周、12周共5个时点。大体观察小鼠的一般情况,流式细胞仪检测外周血CD3+CD25+和CD3+CD71+的表达,免疫组化法定量组织切片中CD3+、CD4+、CD8+的表达。结果:术后早期,单层新鲜羊膜组和双层新鲜羊膜组的小鼠外周血CD3+CD25+及CD3+CD71+表达,略高于甘油保存羊膜组(P<0.05),但短期内皆可自行回落。各羊膜组移植区组织CD3+、CD4+、CD8+的表达,在术后1周-12周均无显著差异(P>0.05)。各羊膜组的免疫细胞表达均以非特异性为主,显著弱于绒毛膜组(P<0.01)。结论:新鲜羊膜与保存羊膜在体内表现出几乎无差别的低免疫原性,不会引起由T细胞介导的特异性排斥反应,可视为免疫赦免组织应用。
- 张琪赵敏胡柯李鸿鲁静秦应祥
- 关键词：羊膜T淋巴细胞
- HGF、bFGF、ColⅣ、LN在保存羊膜中的表达被引量：6
- 2006年
- 目的研究肝细胞生长因子(HGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)、层粘连蛋白(LN)在不同保存方法和保存时间的羊膜中的表达,探讨保存羊膜的生物学活性。方法取健康剖宫产产妇胎盘羊膜,随机分成两组保存:DMEM/甘油-80℃组、纯甘油4℃组。保存后1个月、3个月应用免疫组织化学方法,检测HGF、bFGF、ColⅣ和LN在羊膜中的表达,并以新鲜羊膜作对照。结果(1)HGF、bFGF主要分布于羊膜上皮层。HGF在DMEM/甘油组和纯甘油组保存1个月、3个月和bFGF在两组保存3个月时的表达明显低于新鲜羊膜组,有显著统计学意义(P<0·01)。(2)ColⅣ和LN主要分布于羊膜基底膜。ColⅣ、LN在DMEM/甘油组和纯甘油组保存1个月、3个月时的表达与新鲜羊膜组相比无统计学意义(P>0·05)。结论羊膜经DMEM/甘油-80℃、纯甘油4℃保存后,其上皮生长因子减少,并随保存时间的延长活性逐渐下降,但羊膜基底膜成分并无明显变化。
- 赵敏鲁静张琪胡柯秦应祥
- 关键词：保存羊膜肝细胞生长因子层粘连蛋白
- 新鲜羊膜与保存羊膜中HGF、bFGF表达的对照研究被引量：4
- 2005年
- 目的:研究肝细胞生长因子(HGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在新鲜和两种保存羊膜中的表达,探讨新鲜和保存羊膜的生物学活性差异。方法:取健康剖宫产产妇胎盘羊膜,随机分成三组:新鲜组、DMEM/甘油-80℃保存组、纯甘油4℃保存组(保存1、3个月),应用免疫组织化学方法,检测HGF、bFGF在各组羊膜中的表达。结果:HGF、bFGF主要分布于羊膜上皮层。HGF在DMEM/甘油组和纯甘油组保存1、3个月时的表达明显低于新鲜羊膜组,统计学上差异有显著性(P<0.0001),bFGF在两组保存3个月时的表达明显低于新鲜羊膜组,统计学上差异有显著性(P<0.01)。结论:羊膜经DMEM/甘油-80℃、纯甘油4℃保存后,HGF、bFGF减少,并随保存时间的延长活性逐渐下降。
- 鲁静赵敏张琪胡柯秦应祥
- 关键词：新鲜羊膜保存羊膜肝细胞生长因子碱性成纤维细胞生长因子
- 异源性新鲜和保存羊膜移植后免疫相容性及组织学转归的比较研究被引量：7
- 2008年
- 目的对比新鲜与保存人羊膜异种移植后的免疫反应、组织改变及转归,客观评价不同类型羊膜的临床应用价值。方法取清洁级BALB/C小鼠150只,雌雄不限,体重18～20 g;建立BALB/C小鼠皮下埋植实验模型。按埋植物的不同将动物分为5组,分别为甘油保存羊膜(glycerin preserved amniotic membrane,GPAM)组、新鲜羊膜(fresh amniotic membrane,FAM)组、双层新鲜羊膜(double fresh amniotic membrane,DFAM)组、绒毛膜组(阳性对照组)和单纯手术组(阴性对照组)。各组分别于术后1、2、4、8及12周取材行大体观察、免疫组织化学法测定组织切片中主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)Ⅱ的表达,以及HE染色观察植片及周围组织的变化,并行炎性细胞计数。结果术后各组小鼠饮食、活动正常,创面均Ⅰ期愈合。各羊膜组移植区MHCⅡ表达和炎性细胞计数均明显弱于阳性对照组,差异有统计学意义(P<0.01);术后1、8、12周,各羊膜移植组间MHCⅡ抗原表达和炎性细胞计数两两比较,差异均无统计学意义(P>0.05);术后2～4周,FAM组与DFAM组MHCⅡ抗原表达和炎性细胞计数差异无统计学意义(P>0.05),但均略多于GPAM组(P<0.05);术后4周,各羊膜组移植区MHCⅡ抗原表达和炎性细胞计数均较2周前明显减少,差异有统计学意义(P<0.01)。HE染色观察:术后4周新鲜羊膜植片上羊膜上皮细胞仍存活;术后早期,成纤维细胞从基质层方向浸润羊膜,并在上皮附近合成胶原纤维囊包裹;术后12周,羊膜植片已与周围组织融合难以区分。结论人羊膜作为一种异源性移植材料,无论新鲜或保存,均具有良好的免疫相容性和组织相容性。含活上皮的新鲜羊膜较保存羊膜可能有更佳的修复重建效果。
- 张琪赵敏胡柯李鸿鲁静秦应祥
- 关键词：新鲜羊膜保存羊膜异种移植转归
- 羊膜制备与保存中的微生物安全性研究被引量：10
- 2006年
- 目的:探讨人羊膜在制备和保存过程中的微生物安全性及其控制,为建立羊膜库提供便捷、有效的微生物控制方法。方法:20只剖宫产胎盘的羊膜取材后,均按不同的无菌处理程序和不同保存方法分组,检测时段为保存后24h、1月、3月、12月,均作细菌、真菌、支原体检测。5只顺产胎盘的羊膜,作细菌、真菌、乳酸菌、支原体检测。随访提供羊膜的25名产妇6个月,复查血清学。结果:仅用无菌生理盐水浸泡组中,2只胎盘的羊膜出现细菌污染;20只剖宫产胎盘的羊膜在其余各组中均未查出微生物污染;1只顺产胎盘的羊膜出现乳酸菌污染。25名产妇6个月的血清学复查均为阴性。结论:来源于健康产妇剖宫产胎盘的羊膜经抗生素液规范化无菌处理后,现今常用的保存方法可基本保证羊膜在1年保存期内免受细菌、真菌和支原体的污染。
- 张琪赵敏陈淑惠刘明方胡柯鲁静秦应祥
- 关键词：羊膜微生物
