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丁健: 作品数：39 被引量：69H指数：4; 供职机构：江南大学生物工程学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>; 相关领域：化学工程轻工技术与工程生物学自动化与计算机技术更多>>

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限制葡萄糖、葡萄糖/乙酸双底物条件下自由控制丙丁梭菌ABE发酵丙酮浓度和丙酮/丁醇比被引量：1: 2016年; 提出一种可以提高和自由控制丙丁梭菌ABE发酵丙酮浓度与丙酮/丁醇比的方法。（1）通过控制糖化酶用量、反应时间和温度调节玉米培养基初始葡萄糖浓度,使发酵进入到产溶剂期后,残留葡萄糖浓度降至接近于0 g/L的水平;（2）在葡萄糖受限的条件下,诱导丙丁梭菌合成分泌糖化酶,分解寡糖,将葡萄糖维持于低浓度,进而限制梭菌胞内糖酵解途径的碳代谢和NADH生成速度。与此同时,外添乙酸形成葡萄糖/乙酸双底物环境。在能量代谢基本不受破坏、丁醇未达到抑制浓度的条件下,适度抑制丁醇生产,有效地利用外添乙酸强化丙酮合成;（3）在外添乙酸的基础上,添加适量酿酒酵母,形成丙丁梭菌/酿酒酵母混合发酵体系,提高梭菌对高丁醇浓度的耐受能力。整个发酵体系可以将丙酮浓度和丙酮/丁醇比自由控制在5~12 g/L和0.5~1.0的水平,最大丙酮浓度和丙酮/丁醇比达到11.74 g/L和1.02,并可维持丁醇浓度于10~14 g/L的正常水平,充分满足工业ABE发酵对于丙酮和丁醇产品的不同需求。; 王浩张敬书丁健罗洪镇陈锐史仲平; 关键词：丙酮丁醇梭菌葡萄糖乙酸

重组毕赤酵母发酵生产猪圆环病毒Cap蛋白过程的多变量控制--同时有效控制醇氧化酶活性与溶解氧浓度: 在重组毕赤酵母生产猪圆环病毒Cap蛋白的高密度发酵过程中，由于醇氧化酶活性过高，耗氧剧烈，导致发酵液中溶解氧浓度过低，无法满足菌体正常生理活动和表达目标蛋白的需求。前期研究表明，山梨醇代谢产能时的耗氧量低于甲醇，并且能够...; 丁健侯国力梁克学史仲平; 关键词：制药工业毕赤酵母发酵生产; 文献传递

通过在低细胞浓度下启动甲醇诱导、优化碳/能量代谢模式促进毕赤酵母表达Monellin被引量：3: 2018年; 重组毕赤酵母生产表达外源蛋白的过程中,一般在细胞达到高密度后开始启动甲醇诱导。也有报道指出,在较低细胞浓度下,启动甲醇诱导可以有效地控制整个发酵过程的溶解氧浓度,缓解毒副产物的积累,促进目标蛋白的表达。但是,该操作策略下,甲醇/能量调控机制不明,相关研究报道很少。文中以生产表达monellin(甜味蛋白)的重组毕赤酵母为模式菌株,通过在线分析计量甲醇消耗速率、CO2释放速率和O2摄取速率,探讨了不同细胞浓度下启动甲醇诱导和外源蛋白表达体系的甲醇/能量代谢模式。结果表明,在较低细胞浓度(50 g DCW/L)启动诱导并将温度控制在30℃,走向合成monellin前体物质途径的碳流最大(65%),且能与用于ATP再生的碳流形成最佳匹配;monellin的比合成速率与细胞比生长速率完全耦联,且耦联系数最大,比生长速率也较高;理论NADH(能量)利用效率η最高,η在甲醇诱导的绝大部分时段(89%)处于高水平(≥0.8),可以为monellin合成提供足够的能量。因此,该操作条件下,monellin浓度达到2.62 g/L的最高水平,是高细胞密度(100 g DCW/L)启动诱导策略下monellin浓度的2.5-4.9倍。; 槐强强贾禄强丁健陈珊珊孙佼文史仲平; 关键词：MONELLIN 毕赤酵母

贝叶斯回归支持向量机的软测量建模方法被引量：7: 2006年; 提出了一种基于贝叶斯证据框架的回归型支持向量机的参数选择和软测量建模方法。证据框架的第1层推理用来解释支持向量机的训练。证据框架的第2和第3层推理用于自动调整正则化参数和核参数并使其接近最优值。然后,将这种基于贝叶斯证据框架的回归型支持向量机用于估计聚丙烯腈生产过程的质量指标。仿真结果表明了该方法的有效性。; 朱建鸿丁健杨慧中姜永森; 关键词：贝叶斯软测量支持向量机

学科交叉背景下的《发酵过程智能控制技术》课程建设: 2023年; 工业化发酵过程在数据管理、数据分析、工艺优化控制方面遇到瓶颈,信息技术的快速发展,为工业发酵过程突破技术瓶颈提供了强有力的工具。与信息化深度融合,是发酵工业提高自身竞争力的必由之路。为培养信息化和发酵工业深度融合所需的具有交叉知识背景的高级技术人才,特针对生物工程类本科学生开设《发酵过程智能控制技术》课程。授课内容包括python虚拟环境搭建和常用工具包、发酵数据采集与管理、嵌入式开发与发酵设备控制、数据与控制指令传输以及综合应用实例。针对生物工程类学生信息技术基础知识薄弱的难点,课程按照发酵过程智能控制的需求重新梳理知识体系,授课内容紧贴发酵工程实际应用,通过学生熟悉的案例讲解信息技术在发酵工程领域中的应用方法。同时,课程注重培养学生持续学习的动力和自主学习的能力,帮助学生建立学科交叉的思维方式,提高学生利用信息技术与发酵工程技术解决实际工程问题的能力。; 丁健史仲平; 关键词：发酵工程信息化智能控制课程建设

基于B/S架构的发酵过程嵌入式监控系统设计及应用: 2023年; 针对发酵过程的监测及控制问题,利用高级编程语言Python和JavaScript,设计并开发了一套基于浏览器/服务器(brower/server,B/S)架构的发酵过程嵌入式监控软件系统。该软件系统应用基于Python语言的Django框架及基于JavaScript语言的VUE框架,以MySQL和Redis数据库作为信息载体,运行于本地树莓派的嵌入式Linux操作系统,通过Web浏览器访问,具有数据采集、数据汇总、数据表展示以及多批次多参数的曲线比较功能。同时,在云服务器上搭建了配套的云端系统,Web页面和本地软件系统相同。用户可以在任意一个能够访问公网的计算机上通过Web浏览器远程监控发酵设备。将该软件系统连接发酵设备进行多批次的发酵实验,测试其在实验中的功能和性能。结果表明,该系统的各个功能模块运行正常并能达到预期的效果。; 许志国汪坤丁健; 关键词：B/S架构嵌入式系统

甲醇周期诱导控制强化毕赤酵母生产猪α干扰素被引量：2: 2019年; 利用甲醇营养型毕赤酵母生产猪α干扰素(pIFN-α),诱导过程一般在高细胞密度、定值控制甲醇浓度于5~10g/L下进行,此时、溶解氧浓度(DO)自然下降到接近于0的水平。如果高好氧的毕赤酵母长期处在高甲醇/低DO的诱导浓度环境会导致其代谢活性恶化,胞内甲醇积累严重,pIFN-α表达生产效率低。为此,提出了一种甲醇周期诱导控制策略来强化pIFN-α生产。先将甲醇控制于高浓度达7h,再降低甲醇流加速率,将DO控制在20%左右约4h,一共重复6个循环。采用上述周期控制策略,毕赤酵母代谢活性可以长期维持在较高水平;胞内甲醇处于极低水平(≤ 0.003g/g DCW),解除了甲醇毒性效应;pIFN-α活性达到3.90×10^7IU/ml的最高水平,是定值控制甲醇浓度时的1.86倍。; 严建贾禄强丁健史仲平; 关键词：毕赤酵母甲醇溶解氧浓度猪Α干扰素

以废弃毕赤酵母为高效氮源强化丁酸发酵生产被引量：2: 2020年; 为有效利用固态废弃毕赤酵母,高效发酵生产丁酸,建立了以80 g/L玉米淀粉为基础培养基、以废弃毕赤酵母处理液为高效有机氮源,连续补加葡萄糖的丁酸发酵工艺。7 L厌氧发酵罐下,发酵20h,先以1∶4的比例添加250~400 g/L规格的废弃酵母处理液替代昂贵的发酵用复合培养基,再连续补加葡萄糖浓缩液。最终的丁酸质量浓度为45 g/L、得率为40%,丁酸占总酸的比率(butyric acid ratio over total organic acids,B/TA)≥0.90的较高水平。该工艺可以有效地利用来自于废弃酵母处理液中的氨基酸,提高细胞生长速度和浓度,增强丁酸合成所依赖的NADH再生速度,间接改善了丁酸发酵性能。与此同时,实现了废弃生物质的有效利用和资源化。; 陈程陈程宫立鹏丁健丁健; 关键词：有机氮源还原糖

整体优化的信号肽和人溶菌酶基因在毕赤酵母的高效表达被引量：4: 2018年; 人源溶菌酶作为一种天然的抑菌活力物质,在畜牧、医药及食品等行业具有潜在的应用价值。本研究将信号肽序列和人源溶菌酶基因碱基序列作为一个整体进行密码子优化。并在优化的信号肽序列2处位置,共新插入39个碱基,构成增长的优化信号肽+溶菌酶优化基因。将2种优化的信号肽+溶菌酶基因碱基序列分别插入pPICZαA载体上,并整合到毕赤酵母KM71的基因组上,获得重组子K1(整体优化的α信号肽+人源溶菌酶基因)和K4(整体优化的α信号肽+人源溶菌酶基因又整合了增长信号肽)。摇瓶诱导表达72 h后,离心取上清液,通过Bradford法和比浊法测定发现,K4的蛋白质表达量和酶活力均高于K1。5 L发酵罐下,采用高密度诱导表达策略,诱导54 h后K4的总蛋白质表达量可达3.02 g/L,所表达的人源溶菌酶活力达到324 072.0 U/ml。表明整体优化的α信号肽+人源溶菌酶基因又整合了增长信号肽有利于提高溶菌酶的分泌效率,实现高效表达。; 陈珊珊丁健李鑫刘军贾禄强槐强强孙佼文史仲平; 关键词：信号肽序列毕赤酵母

基于微生物反应模型的发酵优化: ＜正＞～～; 丁健; 文献传递

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