刘召华
- 作品数：3 被引量：32H指数：2
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- ACA基因在抗蚜转基因植物中的应用及其调控序列的研究
- 植物凝集素作为一类重要的抗蚜候选蛋白,已应用于植物抗同翅目害虫基因工程的研究中并.该文通过构建含双凝集素基因的植物表达载体和研究该表达载体在模式植物烟草中的表达及抗蚜情况,初步证实了双价转基因烟草具有比单价转基因烟草更高...
- 刘召华
- 关键词：GNA基因转基因烟草抗蚜性TAIL-PCR
- 文献传递
- ACA基因启动子的克隆及功能初探被引量：16
- 2005年
- 根据已知的ACA基因的 5 '端序列设计三个基因特异的反向引物 (GSP_1,GSP_2 ,GSP_3)分别与 11个简并引物 (AD1_AD11)配对 ,进行热不对称嵌套PCR(ThermalasymmetricinterlacedPCR ,TAIL_PCR)扩增 ,获得了ACA基因起始密码子上游约70 0bp的片段。为检测其表达特性 ,构建了该片段与Gus嵌合基因的表达载体pBpAG ,在真空条件下通过农杆菌介导 ,转化了植物的叶、果实、种子三种不同组织 ,Gus瞬时表达染色结果显示 ,该DNA片段具有种子特异的启动子活性。对该启动子的一些顺式元件进行了讨论。
- 刘召华郭洪年郑光宇田颖川
- 关键词：TAIL-PCRGUS
- 两种凝集素基因在转基因烟草中表达的研究被引量：17
- 2005年
- 构建了含尾穗苋凝集素基因(ACA)的cDNA序列和改造后的雪花莲凝集素基因(GNA)的植物表达载体pBACG。在此表达载体中,ACA和GNA基因的表达分别由35S启动子和CoYMV启动子控制。通过农杆菌介导,将ACA和GNA基因转化到烟草中,经卡那霉素筛选获得60株转化再生植株。对PCR检测呈阳性的50株植株进行接蚜虫实验,结果表明,其平均抑虫率达83.9%。Southernblotting分析表明,ACA和GNA基因都已整合到烟草基因组中。Westernblotting结果显示这两个基因在不同植株中都可表达其相应的蛋白质,但表达水平不同。部分Westernblotting分析呈阳性植株的抗蚜性与T0代相近,达85.3%,说明这两个基因的抗蚜功能可以稳定遗传。
- 刘召华张振山郭洪年贾燕涛郑光宇田颖川
- 关键词：GNA基因转基因烟草抗蚜性
