刘善虑
- 作品数:9 被引量:16H指数:4
- 供职机构:中国疾病预防控制中心病毒更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 中国河南株丁型肝炎病毒全基因组的cDNA克隆和序列分析被引量:8
- 1994年
- 从我国河南-抗丁型肝炎病毒抗原(anti-HDAg)及丁型肝炎病毒(HDv)RNA双阳性的HBsAg携带者血清中提取RNA,采用人工合成的引物进行逆转录和聚合酶链反应(PCR),获得了贯穿HDV全基因组的6个相互重叠的cDNA片段。经双脱氧末端终止法进行核苷酸序列分析,得到了长度为1674bp的我国人河南株HDVcDNA全序列。计算机分析表明,该株与我国台湾株(HDVIA型)、美国-1株(HDVIB型)、日本-1株(HDVⅡ型)和秘鲁-1株(HDVⅢ型)的核苷酸同源性分别为的94.3%、86.8%、75.4%和66.3%,氨基酸序列的同源性分别为89.7%、85.1%、71.9%和64.6%,并在核苷酸和推导的HDAg氨基酸序列中分别发现了5个和2个集中保守的区域。这些区域均与HDV的某些重要功能密切相关。
- 刘善虑詹美云谭文杰
- 关键词:丁型肝炎病毒逆转录CDNA
- 我国丁型肝炎病毒分子生物学和血清流行病学的研究
- 詹美云刘善虑易炎杰汤少华邵立军谭文杰马虹张文英田瑞光丛旭
- 该成果对我国丁肝病毒的分子生物学和丁肝的分子流行病学进行了系统研究。建立了抗HD的ELISA、HD的IgM检测,丁肝抗原检测和丁肝核酸检测四种诊断法;进行了25省市16个不同民族中9757例HBV感染者中HDV感染的流行...
- 关键词:
- 关键词:肝炎血清
- 我国河南株丁型肝炎病毒抗原在原核细胞中的高效表达及分泌被引量:1
- 1995年
- 将我国河南株丁型肝炎(丁肝)病毒抗原的编码基因,克隆到分泌性原核表达载体pET-12a的T7启动子下游,构建了保留和去除终止子(Terminator)的两个表达载体pETDAg和pETDAg-1。将重组的表达质粒转化宿主菌BL21,经IPTG诱导,成功地高效表达了丁肝病毒抗原(HDAg)。SDS-PAGE及westemblot表明,分泌到细胞周间质和包涵体中的HDAg的分子量约为27kD和28kD。ELISA分析表明,分泌性HDAg的活性优于包涵体中的HDAg,分泌性HDAg的ELISA滴度高于1:32000比活性为10000ELISA滴度/mg蛋白;包涵体HDAg的ELISA滴度可达1:25600,比活性为4500ELISA滴度/mg蛋白。另外,利用本室建立的6株抗美国株HDAg单克隆抗体对该河南株重组丁肝病毒抗原(rHDAg)进行了鉴定分析,表明它可与其中5株McAb起特异性结合反应,而与另一株McAb反应不好,推测可能与其HDAg的不同空间结构有关。
- 刘善虑丛旭詹美云
- 关键词:丁型肝炎病毒抗原分泌
- 我国丁型肝炎病毒分子生物学和血清流行病学研究
- 1999年
- 丁型肝炎病毒(HDV)感染呈全球分布,特别是在南美的一些地区,曾发生HDV的暴发流行,我国是乙型肝炎病毒感染高发区,人群中HBV感染率达58.4%。为了解我国HDV感染状况,研究我国HDV基因组特征以及在我国是否存在HDV亚型。
- 詹美云刘善虑谭文杰易炎杰汤少华邵立军马虹张文英丛旭
- 关键词:丁型肝炎病毒基因亚型流行病调查乙型肝炎病毒感染乙肝表面抗原
- 我国丁型肝炎病毒(HDV)分子生物学和血清流行病学研究
- 詹美云刘善虑谭文杰易炎杰汤少华邵立军马虹张文英从旭
- 七年来对我国HDV进行了系统全面的研究:1.在国内首先建立诊断HDV感染的四种方法,其中硷测抗体和抗原的ELISA方法和试剂1989年提供社会,为在我国开展HDV研究,临床诊断,流行病调查提供了手段,节省了外汇,取得较好...
- 关键词:
- 关键词:丁型肝炎病毒分子生物学血清流行病学
- 中国人丁型肝炎病毒抗原编码区基因的cDNA克隆和序列分析被引量:4
- 1993年
- 从我国四川一丁型肝炎病毒抗原(HDAg)、HDV RNA双阳性的HBsAg携带者血清中提取RNA,采用人工合成的引物进行4次逆转录和聚合酶链反应(PCR),获得了长度分别为707bp、414bp、876bp和274bp的4个HDV cDNA片段,并对其进行了克隆和序列分析。其抗原编码区核苷酸序列与美国(Makino)、意大利(Wang)、英国(Saldanha)和我国台湾株(Chao)等株比较同源性,分别为99.4%、92.1%、94.3%和91.4%,由它推导的氨基酸序列的同源性分别为99.1%、87.9%、88.2%和89.3%,并发现了4个集中保守的区域。
- 刘善虑易炎杰丛旭詹美云
- 关键词:丁型肝炎病毒逆转录聚合酶链反应
- 中国4株丁型肝炎病毒抗原编码区基因的cDNA克隆与序列分析被引量:4
- 1995年
- 从我国四川、广西、河南的丁型肝炎病毒抗原(HDAg)或抗体(anti-HD)阳性的HBsAg携带者中,筛选出4株HDVRNA阳性标本,经逆转录和聚合酶反应(RT-PCR)后,获得包含HDV抗原编码区的CDNA片段,并对其进行克隆与序列测定。经计算机分析比较表明:四川、广西株与美国-1株同源性最高,分别为99.3%、99.0%;而河南-1、河南-2株与台湾株的同源性较高。分别为94.3%、92.1%,上述4株与日本-1、秘鲁-1的同源性在66.1%-77.8%之间。推导的HDAg的氨基酸序列的同源性为:四川、广西株与美国株分别为99.5%、96.4%;河南-1、河南-2株与台湾株分别为89.7%、89.3%,故我国至少存在基因型I型的两种亚型,其中四川、广西株为IA型;河南2株皆为IB型。同时,实验结果还证实了HDV毒株的异质性呈地区分布特征。
- 谭文杰刘善虑苗季丛旭詹美云
- 关键词:丁型肝炎病毒抗原CDNA克隆
- 一种逆转录-聚合酶链反应产物的快速分子克隆方法及其在丁型肝炎病毒基因组克隆中的应用
- 1994年
- 一种逆转录-聚合酶链反应产物的快速分子克隆方法及其在丁型肝炎病毒基因组克隆中的应用刘善虑,詹美云(中国预防医学科学院病毒学研究所,北京100052)聚合酶链反应(PCR)作为一种高效的DNA扩增技术在当今分子生物学研究领域已得到广泛的应用;尤其是在逆...
- 刘善虑詹美云
- 关键词:逆转录聚合酶链反应分子克隆丁型肝炎病毒
- 我国丁型肝炎病毒分子生物学和血清流行病学研究被引量:4
- 1996年
- 本研究课题属国家“863”资助项目(863-102-14-3)获1995年卫生部科技成果二等奖。现将几年来我们研究的主要结果报告如下。丁型肝炎病毒是缺陷型单股负链RNA病毒。
- 詹美云刘善虑易炎杰汤少华邵立军谭文杰马虹
- 关键词:丁型肝炎病毒基因亚型感染率乙肝感染