刘志文
- 作品数：25 被引量：54H指数：4
- 供职机构：江西农业大学生物科学与工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金博士科研启动基金江西省科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程文化科学医药卫生更多>>
- 高产γ-氨基丁酸富锌乳酸菌的分批及补料发酵研究被引量：1
- 2011年
- 以短乳杆菌BS2为研究对象,根据已优化的培养条件,使用15L发酵罐进行分批及分批补料发酵实验,在严格控制条件下观察γ-氨基丁酸(GABA)的生物转化过程,克服摇瓶发酵的不足。采用初始pH值为5,发酵期间不控制pH值的条件下进行分批发酵;而后通过发酵期间控制pH值为5的条件下再次进行分批发酵,GABA含量得到有效提高,而谷氨酸钠和葡萄糖分别在32h和44h基本耗尽;然后采用初始pH值为5,发酵期间控制pH值不变的条件下分别在32h补入谷氨酸钠,44h补入葡萄糖,其中,补加550g/L葡萄糖200mL,630g/L谷氨酸钠200mL。补料发酵时,两者流加速度均为11.1mL/min,流加18min。流加结束后培养基中葡萄糖和谷氨酸钠含量达到18g/L以上,基本达到在初始发酵时的质量浓度,而谷氨酸钠在56h基本耗尽,GABA产量达到22.5g/L,最后在56h第2次补加谷氨酸钠,操作同上,GABA产量在104h达到33g/L以上。
- 谢晓阳袁伟静李昆太郭晓燕刘志文徐波
- 关键词：Γ-氨基丁酸短乳杆菌补料发酵
- 阿舒假囊酵母摇瓶分批补料发酵产核黄素的研究
- 2010年
- 利用摇瓶分批补料培养模式考察了补料基质对核黄素合成的影响。首先考察了葡萄糖补加浓度对阿舒假囊酵母菌体生长和核黄素合成的影响,结果表明,葡萄糖的补加对阿舒假囊酵母的菌体生长具有促进作用,但是当葡萄糖的补加浓度超过0·5g/100mL发酵液时,会对核黄素的合成产生严重的阻遏或抑制效应。在此基础上,考察了补加不同碳源对核黄素发酵的影响,结果显示,补加1·0g/100mL发酵液的蔗糖或麦芽糖虽然均利于菌体生长,但同样会对核黄素的合成具有负作用。最后考察氮源的补加对阿舒假囊酵母发酵的影响,结果表明,补加酵母膏和玉米浆能显著促进菌体的生长,且二者最终的核黄素合成量分别为1582·1mg/L和1816·77mg/L,均明显高于不补加任何氮源实验方案下的1135·48mg/L。
- 刘志文简琛李昆太
- 关键词：阿舒假囊酵母核黄素生物合成分批补料发酵
- 高产D-塔格糖植物乳杆菌WU14的筛选、鉴定及其L-阿拉伯糖异构酶酶学性质研究
- D-塔格糖作为新一代天然低热量甜味剂取代传统甜味剂,可将其广泛应用于食品药品等行业。L-阿拉伯糖异构酶(L-Arabinose Isomerase,L-AI)是生物法异构化D-半乳糖为D-塔格糖的关键酶。本研究从腌菜和泡...
- 应碧罗燕萍张艳丽周通刘志文郭晓燕徐波
- 关键词：D-塔格糖L-阿拉伯糖异构酶转化率
- 丙型肝炎病毒NS4B蛋白调控Hep3B细胞非折叠蛋白质反应研究被引量：3
- 2012年
- 研究表达的丙型肝炎病毒(HCV)NS4B对Hep3B细胞非折叠蛋白质反应的影响。NS4B重组真核表达质粒pcDNA3.1(-)NS4B通过脂质体转染Hep3B细胞,G418筛选和Western blot鉴定稳定转染细胞;RT-PCR检测稳定转染细胞内XBP1 mRNA剪接,Western blot鉴定ATF6蛋白切割,荧光素酶试验检测稳定转染细胞内GRP78和XBP1启动子活性。G418筛选和Western Blot鉴定证实获得稳定表达NS4B的Hep3B细胞;在该细胞内,XBP1 mRNA剪接、ATF6切割、XBP1和Grp78启动子激活均被检测到。NS4B在Hep3B的稳定表达诱导了非折叠蛋白质反应。
- 张艳妮张庆华陈瑶刘好桔刘志文孔令保
- 关键词：丙型肝炎病毒NS4BHEP3B
- 亚硝酸盐胁迫下植物乳杆菌WU14亚硝酸盐还原酶的食品级高效诱导表达及其酶学性质研究被引量：10
- 2015年
- 【目的】研究亚硝酸盐胁迫下植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)WU14亚硝酸盐还原酶(nitrite reductase,Nir S)的作用机制,为发酵食品中应用乳酸菌纯种培养技术降解亚硝酸盐奠定基础。【方法】在37℃培养条件下,测定含0.02%—0.16%Na NO2的MRS培养液中L.plantarum WU14 24 h的生长密度、p H及Na NO2降解量。通过PCR扩增和TA克隆得到Nir S,并克隆到乳酸乳球菌食品级细胞内高效诱导表达载体p RNA48中,获得重组菌L.lactis NZ9000/p RNA48-Nir S。重组菌经30 ng·m L-1 nisin诱导后,经SDS-PAGE和盐酸萘乙二胺法分析目的蛋白的表达情况及Nir S酶活。通过生物信息学软件预测分析Nir S编码的蛋白质二三级结构、跨膜结构及疏水性。【结果】L.plantarum WU14能够在Na NO2浓度小于0.12%的MRS培养基中生长并降解一部分Na NO2,在0.10%Na NO2培养液中发酵24 h后降解量达到最大,为56.34μg·m L-1,Nir S酶活达2 347.5 U·m L-1。Nir S编码的蛋白质是一种以α-螺旋和无规则卷曲为主,不存在信号肽和跨膜结构的亲水蛋白。Nir S可在L.lactis NZ9000中高效表达,该重组菌能够在Na NO2浓度低于0.10%的GM17培养基中生长并降解一部分Na NO2,在含0.04%Na NO2的培养液中亚硝酸盐降解量达到最大,为22.21 mg·m L-1,Nir S酶活为925.41 U·m L-1。【结论】L.plantarum WU14的Nir S能够降解高浓度的亚硝酸盐,并且经食品级异源表达的Nir S具有较高的酶活力。本研究为探索研究亚硝酸盐降解的机理,建立发酵食品中亚硝酸盐降解的可控发酵体系提供了参考。
- 应碧昌晓宇刘志文周通陈瑶钟平安徐波
- HCV NS5B在人肝癌细胞系Huh7细胞内的表达及活性分析被引量：1
- 2009年
- 目的为靶向抗HCV药物筛选奠定基础。方法使用脂质体将包含HCV非结构蛋白5B(NS5B)基因的重组载体pcDNA-5B转染至人肝癌细胞系Huh7细胞,分别采用RT-PCR和Western Blot鉴定NS5B mRNA和蛋白表达,采用荧光素酶试验检测NS5B细胞内RNA依赖的RNA聚合酶(RdRp)活性。结果转染的Huh7细胞出现1.8kb的特异性NS5B mRNA目的带及一条相对分子质量约66 kD的蛋白目的带,且后者具有细胞内RdRp活性。结论人肝癌细胞系Huh7细胞可成功表达具有细胞内RdRp活性的NS5B,以其为靶标的抗HCV药物可为临床治疗提供新思路。
- 孔令保吴晓玉朱向东刘好桔刘志文王园秀熊舒
- 关键词：NS5BHUH7细胞活性
- “转识成智”制药工程专业人才培养模式的实践与探索被引量：1
- 2020年
- 在地方农林院校中,通过开展"转识成智"的教育实践与探索,研究新型教学模式下制药工程专业学生成长成才的培养路径和发展方向。制药工程专业应从目前自身情况和实际需要出发,进行培养目标和人才培养模式的创新改革,以适应建设创新型国家的综合性人才需求。
- 李志敏胡紫微刘志文王艺霖李至敏
- 关键词：转识成智制药工程
- 提高农业院校细胞生物学课程教学效果的尝试与实践被引量：2
- 2020年
- 作为农业院校生物学专业的核心课程,细胞生物学具有知识更新快、课程内容多而零散、传统上课效果不佳等特点。文章针对如何提高细胞生物学教学效果,激发学生学习兴趣,提升学生自主学习能力等,总结了教学过程中的几点尝试:一是优化理论课教学内容,增强授课的生动性与趣味性;二是增加文献阅读和讨论,培养学生独立学习、整合学习资源的能力;三是鼓励学生进入实验室,提高教与学的效果。实践证明,这些措施可有效提高本院各专业细胞生物学的教学效果。
- 戴益民刘志文陈仓赖芬菊
- 关键词：农业院校细胞生物学教学改革
- 集胞藻PCC6803中α-酮戊二酸脱羧酶的原核表达分析
- 2020年
- 【目的】α-酮戊二酸脱羧酶(α-ketoglutaric acid decarboxylase,α-KGD)是蓝细菌三羧酸循环途径中的一个关键酶。试验旨在优化集胞藻PCC6803中sll1981基因编码蛋白的原核表达方法,并对不同表达方法获得的重组sll1981蛋白进行活性测定。【方法】利用分子生物学技术构建含有sll1981基因的多种表达载体,通过SDSPAGE分析这些表达载体在大肠杆菌表达系统中的表达和可溶性情况,利用Ni-NTA亲和层析分离纯化重组sll1981蛋白,然后通过酶偶联法测定重组sll1981蛋白的催化活性。【结果】含有sll1981基因的不同表达载体在大肠杆菌表达系统中的表达良好,然而重组sll1981蛋白的可溶性和催化活性差异较大。【结论】当pET28bsll1981质粒与pTf16分子伴侣质粒在大肠杆菌中共表达时重组sll1981蛋白的可溶性和催化活性均为最佳。酶动力学测试表明集胞藻PCC6803中sll1981基因编码蛋白具有α-酮戊二酸脱羧酶功能。为进一步研究α-酮戊二酸脱羧酶的结构功能关系及催化机制提供重要基础。
- 张伟刘志文王小琴李至敏谢琮琮李志敏
- 关键词：集胞藻PCC6803原核表达分子伴侣
- 微生物实验教学改革探索被引量：3
- 2020年
- 微生物实验课程是生物学相关专业人才培养的重要实践教学环节。文章分别介绍微生物实验课程内容设计、实验课程设置体系的特点、实验教学模式及课程过程考核指标体系,并提出进一步完善实验教学和考核评价方式的具体改革措施,为提高本科实验教学质量,提高学生的综合素质与创新意识奠定基础。
- 魏赛金肖婧黄林胡殿明刘志文吴晓玉
- 关键词：微生物学实验教学教学改革
