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猪瘟兔化弱毒免疫猪淋巴细胞亚类及转化水平、IFN-γ的变化与分析被引量：3: 2015年; 为研究免疫猪瘟兔化弱毒(HCLV)对猪细胞免疫应答的影响,本研究分别采用HCLV脾淋毒单独(A组)、HCLV细胞毒与兔脾淋组织液联合(B组)、HCLV细胞毒单独(C组)及生理盐水(对照组)免疫仔猪,应用流式细胞术、淋巴细胞增殖试验及ELISA方法测定免疫前后外周血淋巴细胞(PBL)亚类比值、PBL非特异性(NSI)及特异性(SSI)刺激指数、IFN-γ浓度。结果显示免疫后各组CD3+/PBL与CD3+CD8+/PBL差异不显著;CD3+CD4+/PBL于第7 d时A、B和对照组显著高于C组(p<0.05);CD3+CD4+/CD3+CD8+于第7 d、14 d时A、B和对照组显著高于C组(p<0.05),并且C组CD3+CD4+/CD3+CD8+显著降低(p<0.05);NSI于第3 d、7 d时A与B组显著高于C组(p<0.05),而C组显著高于对照组(p<0.05);SSI于第3 d、7 d时A组显著高于B与C组(p<0.05),而B与C组显著高于对照组(p<0.05);IFN-γ含量由高至低依次为:A、B、C和对照组,并且于第3 d、7 d时差异显著(p<0.05)。研究结果表明,HCLV细胞毒引起机体CD3+CD8+相对更快速增殖,而HCLV脾淋毒引起机体CD3+CD4+相对更快速增殖及NSI、SSI、IFN-γ浓度更高,脾淋毒与细胞毒可能侧重不同的免疫分子途径发挥免疫保护效力;兔脾淋组织液对NSI和IFN-γ浓度具有增强作用。; 徐磊卢培成牛更智曾亮明林映升林伯全傅光华施少华程龙飞陈先进黄瑜邓衔柏张渊魁; 关键词：IFN-Γ

猪延髓内微血管的初步观察: 本文作者近年来在研究DON毒性机理的过程中,发现该毒素可能通过呕吐中枢的微血管作用于猪延髓呕吐中枢。为此,对延髓的微血管进行了初步研究观察。试验采用杜长大三元40日龄阉公猪15头,将其随机分为3组,两组静注25μg/kg...; 邓衔柏剡海阔牛更智卢培成; 关键词：延髓微血管脱氧雪腐镰刀菌烯醇; 文献传递

半定量RT-PCR检测猪延髓中色氨酸羟化酶2基因表达方法的建立: 2010年; 利用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,测定仔猪延髓组织中色氨酸羟化酶2(TPH-2)基因mRNA表达水平,以β-actin为内标,分析相对表达量及其与驱赶应激的关系。通过探讨和优化PCR体系中退火温度、Mg2+浓度和循环次数等参数,建立了检测延髓组织中色氨酸羟化酶-2基因mRNA表达的半定量RT-PCR体系。通过分析色氨酸羟化酶-2 PCR产物与β-actin PCR产物电泳后的灰度比值,可知驱赶应激对TPH-2基因mRNA表达量的影响。; 马红娜邓衔柏马勇江何敏习欠云宁章勇张桂红卢培成张曼玉; 关键词：逆转录-聚合酶链反应应激

免疫组织化学法定位猪肾脏中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的研究被引量：1: 2010年; 脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)是目前全球污染谷物最严重的真菌毒素之一。在所有的易感动物中,以猪最为敏感。该研究采用DON标准品,通过静脉注射的途径,研究该毒素在猪体内肾脏的分布情况,为毒素的残留提供依据。选用10头健康阉公猪,随机分为2组,一组经乳静脉注射DON,注射剂量为75μg/kg体质量,另一组经乳静脉注射生理盐水。注射完成后开始计时,并观察记录猪的反应情况,待30min后放血宰杀,并迅速取肾脏,采用免疫组化法定位肾脏中DON的分布情况。研究结果显示,染毒剂量75μg/kg体质量组,静注后约5～10min开始出现明显的异常反应。具体表现为:狂躁不安,不停的磨牙,咀嚼,之后大量流涎,随之出现呕吐等症状,这一过程的持续时间对该组猪来说存在个体差异。免疫组化法定位结果显示,在肾小囊的壁层见有DON的分布。; 钱慧慧牛更智何敏剡海阔马勇江卢培成刘本杰邓衔柏; 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇肾脏免疫组织化学法

免疫组织化学法定位猪脾脏中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的研究被引量：2: 2010年; 利用免疫组织化学法研究了脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)在猪脾脏分布定位,为DON体内残留及DON对免疫系统影响进一步研究提供依据。选用10头健康阉公猪,随机分为二组,一组经乳静脉注射DON标准品,注射剂量为75μg/kg体重,另一组经乳静脉注射相当体积生理盐水。注射完成后开始计时,并观察记录猪的反应情况,待30min后放血宰杀,并迅速取脾脏,4%多聚甲醛固定,经脱水、包埋及切片后,采用免疫组化法定位脾脏中DON的分布情况。免疫组化法定位结果显示,在75μg/kg体重给药组中,脾组织中的血管壁周围见有DON阳性反应颗粒,而对照组未见阳性反应颗粒。; 卢培成贺利民牛更智剡海阔马勇江范小龙李玉谷邓衔柏; 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇脾脏免疫组织化学法

猪胃组织中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的液质联用检测被引量：4: 2011年; 以脱氧雪腐镰刀菌烯醇毒素(Deoxynivalenol,DON)为检测对象,建立了一种检测猪胃组织中DON的液质联用分析方法。样品经乙腈:水(80:20,V/V)提取,varian Bond Elut Mycotoxin净化柱净化后,收集提取液并于45℃水浴氮气吹干,乙腈:水(20:80,V/V)溶解,经0.22μm微孔滤膜过滤后,以反相C18柱为色谱柱,甲醇、纯水溶液梯度洗脱为流动相,电离离子源电离后质谱检测。结果显示,DON在2～100 ng/mL范围内线性关系良好(r2>0.99);检测限(LOD)和定量限(LOQ)分别为2μg/g和5μg/g;低、中、高浓度(5、20、50μg/g)的回收率分别为71.8%、89.5%、87.4%,RSD分别为6.75%、9.82%、6.39%。表明该方法操作简单,灵敏度高,适用于猪胃组织中DON的检测。; 卢培成剡海阔曾振灵贺利民梁梓森范小龙邓衔柏邹新华; 关键词：液相色谱-质谱联用胃组织脱氧雪腐镰刀菌烯醇

链霉菌抗生物素蛋白—过氧化物酶连结法定位肝脏中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的研究: 2010年; 脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON),又名呕吐毒素,是目前全球谷物污染最严重的真菌毒素之一。在所有的易感动物中,以猪最为敏感。本研究选用10头健康阉公猪,随机分为2组,染毒组和对照组,染毒组经乳静脉注射DON,注射剂量为75μg/kg体重,对照组经乳静脉注射生理盐水。注射完成后开始计时30 min后放血宰杀,迅速取肝脏,采用链霉菌抗生物素蛋白—过氧化物酶连接结(streptavidin-perosidase,SP)法定位肝组织中的DON。SP法定位结果显示,在染毒组肝门管区小叶间静脉的血管壁有DON的分布。本研究采用SP法定位DON在猪体内消化器官组织的分布情况,为毒素的残留研究提供依据。; 刘本杰牛更智何敏卢培成张曼玉钱慧慧马红娜邓衔柏; 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇肝脏 SP法

猪延髓中微血管及静脉注射呕吐毒素后阳性细胞的分布: 2011年; 应用组织学方法对猪延髓微血管及静脉注射呕吐毒素(DON)后在猪延髓的分布进行了初步观察。结果显示,进入延髓的动脉有较厚的弹性纤维膜,平滑肌层厚度为弹性膜的一半,向背侧延伸的分支,管壁薄,仅见内皮细胞和周细胞。在网状结构与纤维束间见有微血管,管壁未见弹性纤维。电镜免疫组化染色结果显示,延髓最后区毛细血管内皮细胞间有的部位有紧密连接,而有些部位缺失,内皮细胞与胶质细胞之间有较宽的空隙,有些部位缺少周细胞。DON免疫阳性反应为棕褐色或棕黄色颗粒,主要分布于延髓微动脉管壁及最后区毛细血管周边神经元细胞质中,细胞核内量少或无反应。结果表明,猪延髓内不同部位的微血管的分布及结构均有差异,为猪的中枢神经系统脑血管的组织学增加了内容。; 剡海阔曾振灵方炳虎牛更智卢培成邓衔柏; 关键词：延髓微血管

免疫组织化学法定位肝脏中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的初步研究被引量：2: 2010年; 本研究旨在探索定位肝脏中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynival,DON)的方法,为以后定位全身组织中的DON提供方法依据。选用刚断奶的二元白猪,保定后,耳缘静脉滴注葡萄糖盐水,外科手术法暴露其肝脏,采用微量进样器缓缓注入DON,采用免疫组织化学染色结合显微镜观察,对肝脏中的DON进行定位研究,可以在注射针眼附近定位到DON。免疫组织化学法可以作为一种定位组织中DON的方法。; 牛更智卢培成刘本杰邓衔柏; 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇肝脏免疫组织化学

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卢培成

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