吴国庆
- 作品数：41 被引量：40H指数：4
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- Th1/Th2型细胞因子在妊高征发病中的作用
- 目的:测定妊高征患者与正常妊娠孕妇血清及相应胎儿脐血血清中细胞因子IFN-γ和IL-4水平,以探讨Th1/Th2型细胞因子在妊高征发病中的作用。方法:用双抗夹心ABC-ELISA法对32例妊高征患者(其中轻度妊高征8例,...
- 胡明英冯永堂苗乃发魏兵吴国庆
- 关键词：细胞因子白介素-4干扰素-Γ妊娠并发症心血管
- 文献传递
- mOX40-hIgG1Fc的构建、表达及其生物学活性的初步研究
- 目的:构建mOX40-hIsG1Fc融合蛋白真核表达载体,转染COS-7细胞进行表达获得mOX40-hIgG1Fc融合蛋白,并通过体外实验初步研究其生物学效应,为OX40分子的进一步研究奠定良好的基础。方法:①Trizo...
- 刘艳菲冯永堂牟东珍苗乃法梁淑娟王丽娜邸大琳吴国庆魏兵孙萍
- 关键词：OX40COS-7细胞
- 文献传递
- 三质粒慢病毒包装细胞体系的构建及其感染效率检测被引量：4
- 2013年
- 目的建立一种基于三质粒的慢病毒包装细胞体系并对其感染效率进行检测。方法利用双酶切方法构建一个pLVTHM重组慢病毒表达载体，然后与pSPAX2，pMD2．G共转染HEK293T获取慢病毒原液，利用高速离心的方法对其进行浓缩纯化。设定不同感染复数（1，5，10，15，20），将上述制备的慢病毒制品感染HEK293T和HepG2肝癌细胞，荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达水平以确认制备的病毒是否成功，其感染效率如何。结果利用一段非沉默性基因片段，构建了一个pLVTHM重组慢病毒表达栽体，将其与两个包装质粒共转染HEK293T细胞后，荧光显微镜下可见发出明亮绿色荧光，证明上述栽体成功转染到包装细胞中。于转染后42h和66h分剐收集细胞培养上清，获得含有慢病毒的原液，对病毒进行浓缩后获得浓度为l×10^8Tu／ml的病毒浓缩液。利用浓缩的病毒感染HEK293T和HepG2细胞，随着感染时间及感染复数值的增加，细胞内绿色荧光表达明显增强，感染后24h时HEK293T细胞内即可见明亮绿色荧光，其感染效率约为60％；在较难进行基因转染的HepG2细胞中，感染后24h后约40％的细胞可见明亮绿色荧光。结论成功建立了三质粒慢病毒包装细胞体系，该体系可成功表达含有目的基因的慢病毒，为后续系列研究提供了重要的工作平台。
- 岳翠青邵华明林志娟刘艳菲吴国庆梁淑娟
- 关键词：慢病毒载体
- CpG-ODN调节小鼠免疫细胞对HBsAg细胞免疫应答的实验研究
- 目的:将不同修饰的非甲基化CpGODN与HBsAg一起分别免疫小鼠,观察评价这些CpGODN在体内对细胞免疫应答的影响作用,为今后提高乙肝疫苗的效用寻找高效免疫佐剂。方法:首先根据影响CpG ODN免疫活性的六个因素:免...
- 孟洁冯永堂刘兴田魏兵鞠吉雨吴国庆苗乃法
- 关键词：CPGODN小鼠乙肝表面抗原细胞免疫
- 文献传递
- OX40L基因修饰小鼠腹腔巨噬细胞抗肿瘤的实验研究
- 目的:通过脂质体法将构建的OX40L真核表达载体转染小鼠腹腔巨噬细胞,观察OX40L基因修饰的巨噬细胞对小鼠体内外抗肿瘤效应的影响。方法:①无菌获取小鼠腹腔巨噬细胞,将含有绿荧光蛋白报告基因的OX40L重组质粒pIRES...
- 史琳冯永堂牟东珍苗乃法梁淑娟邸大琳王丽娜吴国庆魏兵
- 关键词：巨噬细胞OX40LH22肿瘤
- 文献传递
- 单链DNA特异性单克隆抗体的制备及其在细胞凋亡检测中的初步应用
- 为了制备抗单链DNA单克隆抗体,建立检测细胞凋亡的新方法,采用杂交瘤细胞融合技术,筛选分泌抗单链DNA抗体的单克隆杂交瘤细胞株,用斑点印迹和竞争ELISA法鉴定单抗的特异性,进而结合免疫组织化学和免疫荧光方法用于检测凋亡...
- 徐志伟吴国庆李少华冯永堂苗乃法李在连
- 关键词：细胞凋亡检测单克隆抗体特异性DNA
- 文献传递
- SEA对小鼠淋巴细胞的作用观察被引量：1
- 1997年
- ＳＥＡ对小鼠淋巴细胞的作用观察王艳华苗乃法马红雨隋清全冯永堂吴国庆李在连葡萄球菌肠毒素Ａ（ＳＥＡ）是一种超抗原。与Ｔ细胞ＴＣＲ结合后，在体内、外以及初次和再次反应中引起Ｔ细胞较为复杂的反应。本研究采用３Ｈ－ＴｄＲ掺入法检测淋巴细胞转化状况；常规Ｇｉｅ...
- 王艳华苗乃法马红雨马红雨冯永堂冯永堂李在连
- 关键词：SEA淋巴细胞
- rhIL-12逆转录病毒双亚基共表达载体的转化和鉴定
- 2008年
- 目的以人白细胞介素-12(IL-12)双亚基共表达载体pL35P40SN转化大肠杆菌DH5α,并对转化载体进行鉴定。方法以构建好的IL-12双亚基共表达载体pL35P40SN及其对照载体pLXPXSN转化大肠杆菌DH5α,氨苄抗性平板筛选阳性克隆,提取阳性克隆质粒并对其进行酶切及PCR鉴定。结果以XhoI酶切后鉴定,对照载体和IL-12共表达载体的条带分别在6490bp和8800bp的位置,以IL-12 p35和p40引物PCR扩增后电泳鉴定,在700bp和1000bp处可见清亮电泳条带。结论含IL-12 p35和p40双亚基基因的pL35P40SN载体成功转入大肠杆菌DH5α,经多项鉴定结果正确。为以其转染细胞并对IL-12的功能研究打下良好基础。
- 李娜曲春枫吕娥苗乃法吴国庆
- 关键词：IL-12
- CpG-ODN辅助DC瘤苗抗肿瘤的实验研究
- 目的:体外诱导扩增骨髓来源的DC细胞,制备DC瘤苗,在体内外研究CpG ODN对DC瘤苗抗肿瘤效应的影响,为提高DC瘤苗的效应寻找合适的免疫佐剂及方法。方法:(1)分离骨髓单个核细胞,在体外以GM-CSF、IL-4诱导扩...
- 宫伟雁冯永堂魏萍苗乃法牟东珍吴国庆孟洁
- 关键词：CPGODN树突状细胞肿瘤免疫
- 文献传递
- 乙型肝炎特异性转移因子抗原特异免疫活性的检测被引量：2
- 1993年
- 参照 Hoffman 白细胞移动抑制试验,采用琼脂糖法巨噬细胞移动抑制试验(MIT),研究了乙型肝炎特异性转移因子(HBV—TF)对正常人及乙肝病人淋巴细胞转移、诱导产生巨噬细胞移动抑制因子(MLF)的抗原特异免疫活性取得了成功。结果表明 HBV—TF 具有明显的抗原依赖性免疫活性。琼脂糖法MIT 操作简单、结果敏感并且重复性较好,可以作为 HBV—TF 产品的抗原特异活性的检测指标。
- 吴国庆李在连田登安武风堂
- 关键词：乙型肝炎病毒免疫活性
