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铁皮石斛居群差异的研究ⅡISSR指纹标记方法的建立与优化被引量：49: 2006年; 目的：针对铁皮石斛ISSR的反应特点，建立稳定可靠的ISSR分子指纹标记反应体系，为进一步研究铁皮石斛的居群差异奠定基础。方法：通过筛选引物并设定影响铁皮石斛ISSR反应的诸因子的不同浓度，检测ISSR不同反应体系的扩增效果；通过分析非特异性条带的产生原因并进行条件优化，建立铁皮石斛ISSR稳定可靠的反应体系。结果与结论：首次建立了可用于铁皮石斛ISSR-PCR分析的最适宜的反应体系：25μL．PCR反应体系中，10×Taq酶配套缓冲液，1．5UTaq DNA聚合酶，1．2—1．8mmol·L^-1 MgCl2，80μmol·L^-1 dNTP，0．2μmol·L^-1引物，DNA模板约20ng，退火温度52-60℃；实验表明：Taq酶质量、DNA模板品质、退火温度等对ISSR反应结果具有较大影响。所建立的铁皮石斛ISSR反应体系具有标记位点清晰、反应系统稳定、检测多态性能力较强、重复性好等特点，可以较好地应用于铁皮石斛的居群鉴别及居群分子生态的研究。; 沈洁丁小余丁鸽刘冬扬唐凤贺佳; 关键词：ISSR反应体系

花椒cpDNA trnL-F间隔区序列的特征及其在混淆品鉴别中的应用被引量：10: 2004年; 目的 :通过分析花椒cpDNAtrnL -F间隔区序列特点 ,探讨该序列在花椒与其混淆品鉴别中的意义。方法 :对花椒及其混淆品进行cpDNAtrnL -F间隔区序列比较研究。结果 :花椒cpDNAtrnL -F间隔区序列为 349bp、AT百分比为 6 2 .1%。尽管花椒的果实在外部形态 ,物理特性上与混淆品差异较小 ,但在cpDNAtrnL -F间隔区序列上却存在着显著而稳定的差异。该序列在属以下的分类阶元中同源性极高 ,可达 10 0 %。结论 :根据cpDNAtrnL-F间隔区碱基序列的差异。; 沈洁丁小余张卫明保曙琳常俊唐凤; 关键词：花椒果实植物分类学芸香科

铁皮石斛的种质保存及其与共生真菌关系的初探: 本文以铁皮石斛(DendrobiumofficinaleKimuraetMigo)为实验材料，以带节间的茎段作为外植体，建立了一套适宜铁皮石斛种质保存和快速繁殖的组织培养体系。通过比较基本培养基、激素、天然提取物浓度等多...; 唐凤; 关键词：铁皮石斛基因分子标记共生真菌种质保存植物学药用植物; 文献传递

铁皮石斛野生居群遗传多样性的RAPD分析与鉴别被引量：85: 2005年; 目的采用RAPD分子标记技术,对铁皮石斛8个野生居群的遗传多样性、亲缘关系以及分子鉴别等进行研究.方法筛选随机引物进行RAPD分析,通过UPGMA聚类,研究铁皮石斛各居群间的遗传关系,构建居群亲缘关系的分子系统树;利用特异性条带对铁皮石斛野生居群进行指纹分析鉴别.结果共筛选出10个有效引物,在8个野生居群材料的RAPD扩增中共得到439个位点,平均每个引物扩增出43.9个位点,每个居群扩增出54.9个位点;在所获得的104条可重现谱带中,9条是单态的,95条是多态的,多态性程度达91.35%,遗传距离在0.590～0.727之间,平均为0.686.结论铁皮石斛居群间遗传差异明显,具有较丰富的遗传多样性;RAPD可以作为铁皮石斛野生居群遗传多态性、居群亲缘关系和分子鉴别研究的有效手段;引物S412可以有效鉴别铁皮石斛的8个野生居群.; 丁鸽丁小余沈洁唐凤刘冬扬贺佳李雪霞褚必海; 关键词：铁皮石斛居群 RAPD

喇叭唇石斛组织培养的研究被引量：13: 2004年; 目的 :筛选喇叭唇石斛快速繁殖体系的适宜培养基及培养条件。方法 :对基本培养基、光照条件、激素、天然提取物浓度等进行比较研究。进行叶绿素含量、可溶性蛋白含量测定。结果 :N6培养基是种胚萌发成苗适宜培养基 ,而 1/ 2MS +NAA 0 .5mg·L-1易于原球茎膨大增殖。先暗培养 2 0d再光照培养有利于胚的萌发及苗的生长。 1/ 2MS +NAA 0～ 0 .5mg·L-1有利于原球茎大量增殖 ,N6+6 BA 2 .0mg·L-1+NAA 0 .5mg·L-1+10 %马铃薯汁是原球茎分化的适宜培养基 ,添加激素和马铃薯汁促进叶绿素和可溶性蛋白含量上升。N6+NAA 0 .5mg·L-1+10 %香蕉汁生根壮苗最适宜。结论 :无机盐浓度、氮源形态、光照条件对胚萌发生长影响较大 ;氮源形态对原球茎增殖有影响 ;叶绿素含量、可溶性蛋白含量能反映组培苗的生长状态。; 常俊丁小余保曙琳刘冬扬贺佳唐凤丁秉中; 关键词：培养基可溶性蛋白叶绿素

花椒品种的DNA分子甄别被引量：2: 2003年; 本文对花椒不同居群的 r DNA ITS区序列片段进行了测定和分析。 r DNA ITS区序列片段有 60 3 bp、GC百分比为 60 .3 %。在所比较的花椒居群中 ,ITS区序列片段存在着 2 2个变异位点。依据花椒 r DNA ITS区的碱基差异 ,我们可以有效鉴别陕西凤县凤椒、甘肃武都大红袍。; 沈洁丁小余张卫明保曙琳常俊唐凤; 关键词：花椒

长江中下游地区菱属植物的DNA分子鉴别被引量：16: 2004年; 目的　对野生菱和栽培菱种rDNAITS片段进行分析 ,探讨该片段在两大群体中的系统学及鉴别研究意义。方法　对菱的rDNAITS区进行了PCR扩增、测序 ,运用Clustal、Mega2 0等软件对ITS区进行序列分析鉴别。结果　获得rDNAITS1、ITS2和 5 8SrDNA完整序列 ,10个居群菱的ITS1与ITS2序列的长度分别为 2 34～2 36bp和 2 2 0～ 2 2 1bp ,5 8S区均为 16 4bp ,不同居群的碱基差异为 0 2 2 %～ 2 94 %。变异位点数为 16个 ,信息位点数 6个。用NJ法根据ITS序列数据构建系统发生树。结论　尽管菱属各居群间rDNAITS的差异百分率较小 ,其亲缘关系较近 ,但根据ITS序列的特征可以很好地鉴别野生菱、栽培菱 ,菱属植物有可能都起源于同一种野生类居群。; 保曙琳丁小余常俊沈洁唐凤; 关键词：菱属 RDNA ITS序列物种起源

铁皮石斛野生居群遗传多样性的RAPD分析与保护策略: 目的:采用RAPD分子标记技术,对中国特有濒危植物铁皮石斛的遗传多样性进行了研究.方法:筛选随机引物进行RAPD分析,通过UPGMA聚类,研究了铁皮石斛各居群及个体间的遗传关系,构建了亲缘关系的分子系统树.结果:从350...; 丁鸽丁小余沈洁唐凤刘冬扬贺佳李雪霞褚必海; 关键词：铁皮石斛居群居群遗传结构 RAPD; 文献传递

铁皮石斛野生居群研究(Ⅳ):RAPD反应体系的构建与优化被引量：7: 2006年; 为获得铁皮石斛RAPD的最佳反应体系,本文对影响RAPD反应的模板含量、Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶浓度、扩增程序及退火温度等多种因子进行了构建与优化.通过各因子的组合研究,我们得到铁皮石斛RAPD反应最适扩增体系是:25μLPCR反应体积,10×Buffer 2.5μL,2.5 mmol/L MgC l2,dNTP 2.5μL(各2.5mmol/L),模板DNA为30 ng,Taq聚合酶1.5 U,随机引物12 pmol,ddH2O 14.2μL.最佳扩增程序:94℃预变性3m in,94℃变性50 s,38℃复性1 m in,72℃延伸2 m in,循环40次;最后72℃延伸5 m in.4℃保存.; 丁鸽丁小余沈洁刘冬扬贺佳唐凤; 关键词：铁皮石斛

锗对铁皮石斛原球茎的生长及抗氧化酶系的影响被引量：14: 2005年; 研究了不同浓度的锗(GeO2)对组培铁皮石斛原球茎的鲜重、可溶性蛋白质、叶绿素含量以及保护酶系统(SOD,CAT,POD)活性的影响.结果表明:适宜浓度的GeO2(5.00 mg/L)能够显著增加铁皮石斛原球茎的鲜重,提高可溶性蛋白质和叶绿素含量,使SOD、CAT活性明显升高,而POD的活性则呈现缓慢的下降趋势.由此可见,培养基中添加5.00 mg/L的锗时,对铁皮石斛原球茎的生长是有明显促进作用的.; 唐凤丁小余丁鸽刘冬扬贺佳沈洁褚必海; 关键词：锗铁皮石斛原球茎抗氧化酶系统

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