孙凯
- 作品数：63 被引量：314H指数：12
- 供职机构：南方医科大学南方医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金南方医科大学南方医院院长基金更多>>
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- 大鼠肝脏缺血再灌注时肝细胞凋亡与肿瘤坏死因子-α的关系被引量：5
- 2008年
- 目的探讨大鼠肝脏缺血再灌注时肝细胞凋亡与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的关系。方法建立大鼠局部肝脏缺血再灌注模型,将72只健康雄性Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组和缺血再灌注组,采用放射免疫法测定再灌注后不同时相中血清TNF-α含量,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)和透射电镜观察肝细胞凋亡状态。结果再灌注后1、3、6h和24h血清TNF-α含量及肝细胞凋亡指数(HAI)明显高于正常组和假手术组,且均于6h达到高峰,再灌注后各时相TNF-α水平与HAI呈显著正相关。结论肝脏缺血再灌注损伤过程中,TNF-α表达水平异常上调并可能对肝实质细胞凋亡起介导作用。
- 孙凯刘志苏孙权
- 关键词：肝脏缺血再灌注损伤肿瘤坏死因子-Α
- 171例外伤性小肠破裂的诊治被引量：11
- 2011年
- 小肠是腹部外伤中最易受伤的器官。尽管大部分小肠损伤的诊断与治疗并不困难，但仍存在误诊、延迟诊断及处理不当的情况，并由此导致了严重的后果。南方医科大学南方医院2000—2010年共诊治外伤性小肠破裂171例．现报道如下。
- 雷尚通孙凯董泾青薛琪
- 关键词：外伤性小肠破裂诊治腹部外伤小肠损伤
- 过氧化物酶增殖物激活受体γ对大鼠肝星状细胞增殖及凋亡的影响被引量：12
- 2006年
- 目的探讨过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)对大鼠肝星状细胞(HSC)增殖与凋亡的影响。方法常规培养大鼠HSC,经系列浓度的PPARγ天然配体(15-d-PGJ2)或合成配体(GW7845)作用后,通过噻唑蓝(MTT)比色法及流式细胞仪观察细胞的增殖和凋亡状态,应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot探讨PPARγ配体诱导凋亡的分子机制,透射电镜观察HSC形态学变化。结果15-d-PGJ_2和GW7845可通过抑制细胞增殖同时诱导凋亡而抑制HSC生长,且呈剂量依赖效应(各实验组与对照组比较,P＜0．01)；PPARγ活化可显著抑制HSC中bcl-2基因表达(同时在转录和转录后水平),且此抑制作用可被PPARγ特异性拮抗剂GW9662部分或完全逆转,说明此种抑制效应确由PPARγ所介导；电镜观察亦显示明显的细胞凋亡发生。结论PPARγ活化可显著抑制HSC增殖,并通过下调bcl-2基因表达而诱导凋亡,提示PPARγ可作为逆转肝纤维化治疗的新的有效靶点。
- 孙凯黄晓卉甄茂川汪谦
- 关键词：过氧化物酶增殖物激活受体Γ肝星状细胞脱噬作用BCL-2
- 腹腔镜联合内镜在结直肠良性占位病变治疗中的应用被引量：1
- 2012年
- 2008年1月至2011年12月，我院及南方医科大学南方医院收治结直肠良性占位病变74例，采用传统开腹方法治疗53例，腹腔镜联合内镜治疗21例，现将两种方法的治疗效果比较如下。
- 邓修民邓春燕孙凯
- 关键词：腹腔镜联合内镜开腹手术
- 缺血后处理对肝脏缺血再灌注中肝窦内皮细胞损伤的保护作用被引量：12
- 2004年
- 目的 探讨缺血后处理对肝脏缺血再灌注中肝窦内皮细胞损伤的保护作用。方法 建立大鼠局部肝脏缺血再灌注模型 ,将 2 4只健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术、缺血再灌注、缺血后处理 3组 ,以缺血再灌前、反复多次的短暂预再灌、停灌作后处理 ,观察各组血浆肝酶及透明质酸 (HA)水平变化和肝组织中丙二醛 (MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、内皮素 1(ET 1)含量 ,并行肝组织病理形态学检查。结果 与缺血再灌注组相比 ,缺血后处理组肝酶的漏出、血浆HA水平及肝组织中MDA、ET 1的含量明显降低 (P <0 .0 1) ,而SOD活性则显著升高 (P <0 .0 1) ,肝组织病理学损伤亦明显减轻。结论 缺血后处理可通过抑制再灌注后氧自由基的过量生成而保护肝窦内皮细胞 ,减轻肝脏缺血再灌注损伤。
- 胡军刘志苏孙权孙凯
- 关键词：缺血后处理肝脏缺血再灌注肝窦内皮细胞损伤
- 缺血后处理对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用被引量：27
- 2004年
- 目的 :探讨缺血后处理对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法 :建立大鼠肝脏局部缺血再灌注模型 ,将 32只健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术、缺血再灌注、腺苷处理及缺血后处理 4组 ,分别于缺血 6 0min恢复全面血液再灌前 ,先经门静脉缓慢推注外源性腺苷 ,或先给予反复短暂的预再灌、停灌作缺血后处理 ,观察血清肝酶、透明质酸 (HA)水平及肝组织中丙二醛 (MDA)、超氧化物歧化酶 (SOD)、一氧化氮 (NO)、内皮素 1(ET 1)的含量变化 ,并行肝组织病理学检查。结果 :与缺血再灌注组相比 ,缺血后处理组肝酶的漏出、血清HA水平及肝组织MDA、ET 1含量明显降低 (P <0 .0 1) ,而SOD、NO含量则显著升高 (P <0 .0 1) ,同时肝组织病理形态学损伤亦明显减轻 ,而腺苷处理组与缺血再灌注组相比无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 :缺血后处理可通过抑制再灌注后氧自由基的过量生成 ,改善肝脏微循环 ,发挥保护效应。
- 孙凯刘志苏孙权
- 关键词：肝脏缺血再灌注损伤缺血后处理微循环
- 多种肿瘤标志物联合检测的液相芯片系统的建立被引量：4
- 2006年
- 目的通过建立多种肿瘤标志物联合检测的液相芯片系统,以期达到早期发现、早期诊断肿瘤的目的,提高肿瘤的治疗效果。方法根据Luminex公司所提供的实验流程进行荧光微球表面捕获抗体的包被,并对耦联效率和交叉反应进行鉴定,利用重组人肿瘤标志物蛋白纯品构建多指标联合检测的液相芯片的标准曲线,并与常规检查方法酶联免疫吸附实验(ELISA)进行对比。结果鉴定结果证实抗体包被成功有效,且无交叉反应的发生；但仍应对整个流程进行严格质控,因为耦联过程中的细微差别均可导致微球表面抗体密度的较大变化,并影响后继检测效率；标准曲线构建成功,与传统“金标准”ELISA相比,液相芯片在多指标联合检测潜能、可重复性、置信区间范围、时间及试剂耗费等多方面均有明显优越性。结论成功构建了多种肿瘤标志物联合检测的液相芯片系统,从而为后继大规模血清样本的临床检测和肿瘤筛查莫定了基础。
- 黄晓卉孙凯甄茂川汪谦
- 关键词：荧光液相芯片肿瘤标志物
- 微小RNA-338-3p对结直肠癌细胞增殖及凋亡的影响被引量：3
- 2013年
- 目的 观察微小RNA-338-3p（miR-338-3p）对人结直肠癌细胞增殖及凋亡的影响.方法 构建慢病毒介导的miR-338-3p及其抑制剂的表达载体并转染结直肠癌细胞株SW-620,流式细胞仪筛选建立稳定过表达miR-338-3p及其抑制剂的SW-620亚细胞株,利用实时定量逆转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测miR-338-3p表达,Western blot检测其靶基因Smoothened（SMO）蛋白表达水平,通过噻唑蓝比色法及流式细胞仪观察细胞的增殖和凋亡状态.结果 经双酶切鉴定和测序证实,成功构建了包含miR-338-3p及其抑制剂的慢病毒表达载体,荧光显微镜下观察可见SW-620细胞表达绿色荧光.稳定过表达miR-338-3p的SW-620亚细胞株中,miR-338-3p表达水平显著高于阴性对照组（相对表达量3.91 ±0.51比2.36±0.44,P＜0.01）,SMO蛋白表达水平明显下降,且肿瘤细胞增殖能力减弱[细胞增殖抑制率（CPIR）：（61.9±5.2）％比（41.6±4.8）％,P＜0.01],细胞凋亡增加.稳定过表达miR-338-3p抑制剂的SW-620亚细胞株中,miR-338-3p表达水平显著低于阴性对照组（相对表达量0.92±0.29比2.36±0.44,P＜0.01）,SMO蛋白表达水平明显升高,且肿瘤细胞增殖能力增强[CPIR：（19.2±3.8）％比（41.6±4.8）％,P＜O.01],细胞凋亡减少；而此种促增殖作用可被anti-SMO-siRNA部分逆转,说明此种生物学效应确由SMO所介导.结论 miR-338-3p可通过抑制结直肠癌细胞中SMO蛋白表达而抑制肿瘤细胞生长.
- 孙凯雷尚通邓海军董泾青李国新
- 关键词：结直肠癌慢病毒
- 缺血后处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响被引量：19
- 2003年
- 目的:探讨缺血后处理对缺血再灌注损伤大鼠肝脏细胞凋亡的影响。方法:建立大鼠局部肝脏缺血再灌注模型,将24只健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术(S)、缺血再灌注(IR)、缺血后处理(IPo)3组,以缺血再灌注前反复多次的短暂预再灌注及停灌注作后处理,观察血清肝酶和肝组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)水平变化,用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)及透射电镜观察肝细胞凋亡状态,并行肝组织病理形态学检查。结果:与IR组相比,IPo组血清肝酶水平及肝组织中MDA含量显著降低,而SOD和GSH活性则显著升高;再灌注后可见明显的肝实质细胞凋亡现象,IPo组凋亡指数较IR组显著下降,肝组织病理形态学损伤亦明显减轻。结论:IPo可通过抑制再灌注后氧自由基的过量生成而拮抗肝实质细胞凋亡的发生,从而减轻肝脏缺血再灌注损伤。
- 孙凯刘志苏孙权
- 关键词：缺血后处理肝脏缺血再灌注损伤细胞凋亡超氧化物歧化酶谷胱甘肽
- 结直肠癌与毗邻癌旁组织中microRNA-221与CDKN1C／p57的差异表达被引量：13
- 2011年
- 目的观察结直肠癌与毗邻癌旁组织中microRNA-221（miR-221）与细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子p57（CDKN1C／p57）的差异表达。方法常规抽提结直肠癌及对照癌旁组织中总RNA及蛋白质，应用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测标本中miR-221表达，以半定量逆转录（RT）-PCR和Westernblot分析CDKN1C／p57mRNA和蛋白表达。结果30例结直肠癌与癌旁组织相比，miR-221表达明显上调（2．041±1．401比0．806±0．341），差异有统计学意义（P〈0．01），半定量RT—PCR和Western blot分别证实其町能调节的靶目标CDKN1C／p57在mRNA水平结直肠癌和癌旁组织中表达差异无统计学意义（P〉0．05），而蛋白质水平在结直肠癌中表达明显下降（3．019±1．708比0．972±0．316，P〈0．01）。结论miR-221可能通过转录后基因沉默机制使CDKN1C／p57蛋白表达下降，从而促进结直肠癌的发生发展。
- 曾俊杰孙凯吴承堂雷尚通王伟
- 关键词：结直肠癌实时荧光定量PCR
