孙晓东
- 作品数：41 被引量：82H指数：5
- 供职机构：湖北医药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金湖北省高等学校优秀中青年科技创新团队计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学政治法律更多>>
- 人FAM92A1基因诱饵表达质粒的构建与鉴定被引量：2
- 2011年
- 目的 构建人FAM92A1基因（hFAM92A1）的诱饵表达质粒pGBKT7-hFAM92A1并检测其蛋白表达、毒性和自激活作用.方法 PCR扩增hFAM92A1的基因编码序列并克隆入诱饵表达载体pGBKT7中,酶切和测序鉴定后,转化到酵母AHl09细胞中,Western印迹检测诱饵蛋白表达情况,同时检测诱饵蛋白的毒性和自激活作用.结果 成功构建FAM92A1基因的诱饵表达质粒pGBKT7-hFAM92A1,测序结果正确.Western印迹实验证实酵母细胞高表达诱饵蛋白hFAM92A1,诱饵蛋白没有自激活作用.结论 构建的诱饵表达质粒pGBKT7-hFAM92A1可用于下一步酵母双杂交系统实验,为进一步研究hFAM92A1功能奠定了基础.
- 方娟李瑞明卢智勇孙晓东陈洁阮绪芝
- 关键词：诱饵蛋白
- 顺铂与培美曲塞对肺癌A549及SPC-A-1细胞作用的研究
- 2013年
- 目的:研究顺铂(DDP)与培美曲塞对体外培养的人肺癌A549及SPC-A-1细胞增殖活力的影响。方法:分别用不同浓度的DDP(1.25μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml)作用细胞株A549及SPC-A-1细胞,DDP5μg/ml联合培美曲塞10mmol/L作用细胞株A549及SPC-A-1细胞;48h后用MTT法测细胞增殖,并按细胞的抑制率(100%)=(1-实验组吸光度/阳性对照组吸光度)×100%计算不同浓度DDP及DDP(5μg/ml)与培美曲塞10mmol/L联用对细胞的抑制率,比较细胞抑制率的差异。结果:DDP(5μg/ml)联合培美曲塞10mmol/L处理A549细胞、SPC-A-1细胞48h抑制率分别为(53.2200±0.0192)%、(73.7800±0.0171)%。DDP1.25μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml处理A549细胞、SPC-A-1细胞48h抑制率逐渐增高,20μg/ml时最高,分别为(49.4300±0.0403)%、64.8700±0.0280)%。结论:DDP(1.25～20μg/ml)明显抑制2株细胞的增殖,作用呈现浓度依赖性。而DDP(5μg/ml)与培美曲塞10mmol/L联合对SPC-A-1细胞的增殖抑制更为明显。
- 王燕孙晓东王珺龚坚余明华
- 关键词：顺铂培美曲塞A549SPC-A-1
- NaCl培养液对植物根尖有丝分裂的影响被引量：2
- 2009年
- 以洋葱根尖、大蒜根尖、蚕豆根尖为材料,分别用50、150、250mmol/L的NaCl培养液对分生区细胞进行72h培养,分析NaCl培养液对植物根尖细胞有丝分裂指数及微核的影响。结果表明,不同浓度的NaCl培养液对植物根尖作用72h后,植物根尖细胞中期分裂指数和中期染染色体形态均有不同程度的影响,有丝分裂指数随着NaCl处理剂量的增加而下降,微核率随着NaCl处理剂量的增加而升高,且一定浓度的NaCl影响植物细胞有丝分裂的速度,当浓度较低时促进分裂,浓度较高时则抑制分裂。
- 王燕孙晓东龚坚王珺余明华
- 关键词：植物根尖有丝分裂微核
- 褪黑素联合顺铂对A549细胞凋亡相关基因的影响被引量：2
- 2014年
- 观察褪黑素以及褪黑素联合顺铂是否可以抑制A549细胞增殖并促进细胞凋亡,探讨ERK1/2MAPK信号通路在这一过程中的作用,为肺腺癌的研究提供实验依据。用不同浓度的褪黑素、不同浓度的顺铂、褪黑素联合顺铂刺激体外培养的肺腺癌细胞系A549细胞,MTT法检测各组细胞的活性,运用Real-time RT-PCR检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax、p53的表达水平,Western-blot检测ERK1/2MAPK的活性变化。结果:1)单纯使用褪黑素和顺铂均可抑制A549细胞增殖,褪黑素联合顺铂时,抑制作用更加显著,一定浓度的褪黑素可降低顺铂的使用浓度;2)未经处理的A549细胞Bcl-2/Bax很高,p53基因表达较低,经褪黑素以及褪黑素联合顺铂刺激后A549细胞中Bcl-2/Bax明显下降,p53基因表达明显升高,并有浓度依赖;3)经褪黑素和顺铂刺激后A549细胞中磷酸化ERK1/2MAPK水平明显降低。褪黑素联合顺铂可抑制A549细胞增殖并且诱导凋亡相关基因表达,褪黑素和顺铂对A549细胞的抑制作用可能与ERK1/2MAPK信号通路有关。
- 孙晓东王珺桑明王燕罗超余明华
- 关键词：褪黑素顺铂A549细胞凋亡
- DLL4-SiRNA对内皮细胞细胞周期的影响被引量：1
- 2013年
- 近年来治疗性血管生成方法的出现，为血管病变弥漫、年龄较大的冠心病患者带来了新的选择和希望，而内皮细胞的增殖是血管生成过程中的关键环节之一。
- 王珺王燕孙晓东谢玉波余明华
- 关键词：细胞周期血管病变血管生成治疗性
- 土木香内酯抑制宫颈癌细胞的增殖及其机制研究被引量：2
- 2020年
- 目的观察土木香内酯对Hela细胞BMI1基因表达的影响,探讨AL抑制Hela细胞增殖的可能机制。方法体外培养人宫颈癌Hela细胞株,CCK8(cell counting kit⁃8)法和平板克隆实验检验AL对Hela细胞活性及增殖能力的影响;通过Real⁃time PCR与Western blot检测经AL处理过的Hela细胞BMI1基因的表达情况;Real⁃time PCR与western blot检测沉默和过表达BMI1基因的效率;过表达BMI1基因后检测AL对Hela细胞增殖的影响。结果AL能显著抑制Hela细胞的活性及增殖能力,且呈明显的剂量依赖性;Hela细胞经AL处理后,BMI1的转录和蛋白表达明显降低;过表达BMI1基因后,Hela细胞的活性增强,AL可抑制由BMI1过表达引起的细胞活性增强;shRNA干扰BMI1后,BMI1的表达显著降低,再施予AL,BMI1的表达降低更加明显。结论AL抑制宫颈癌细胞增殖,其机制可能是通过抑制BMI1的表达发挥作用。
- 谢丽霞许倩倩徐红霞杜凯丽桑明孙晓东
- 关键词：土木香内酯HELA细胞细胞增殖
- PD、SB对表皮生长因子诱导的大鼠VSMCS增殖及迁移的影响
- 2009年
- 目的:探讨ERK1/2抑制剂PD98059、p38MAPK抑制剂SB202190对表皮生长因子(EGF)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖及迁移的影响。方法:实验分为对照组、EGF组、PD98059(PD)组、SB202190(SB)组。以低血清培养的VSMCs作为对照,采用细胞计数、划痕损伤实验,观察PD98059和SB202190对EGF诱导的VSMCs增殖及迁移的影响。结果:干预后24h,EGF组VSMCs增殖、迁移较对照组明显增强,加用PD98059和SB202190后,明显抑制了VSMCs的增殖和迁移。结论:EGF诱导的VSMCs增殖和迁移可能是通过p38MAPK和ERK1/2信号通路发挥作用。
- 陈龙菊张复贵唐杰姜铧孙晓东丁妍张兴华王汉琴
- 关键词：表皮生长因子
- 糖尿病大鼠背根神经节神经元TTX-R钠离子通道电流变化及意义被引量：1
- 2014年
- 目的：通过研究大鼠糖尿病神经病理性疼痛（DNP）中背根神经节（DRG）神经元TTX-R钠离子通道特征的变化,以探讨此疾病引起痛觉过敏可能的发生机制。方法：8只SD大鼠腹腔注射链尿佐菌素诱导制作糖尿病神经病理性疼痛模型（DNP组）,取L5~6DRG,贴壁消化法行神经元培养,电生理全细胞膜片钳记录离子通道电流;8只同月龄大鼠为正常对照。结果：大鼠糖尿病神经病理性疼痛小直径DRG神经元TTX-R INa电流密度较对照组增高。与对照组比较激活曲线向超极化移动3.9 mV（P〈0.05）,DNP组具有重复放电的神经元的比率增加。结论：大鼠糖尿病神经病理性疼痛小直径DRG神经元TTX-R钠通道电流的变化是痛觉过敏形成的原因之一。
- 吕淑英孙晓东方娟罗超
- 关键词：背根神经节
- 丝瓜籽核糖体失活蛋白基因Luffin-a原核表达载体的构建被引量：1
- 2013年
- 目的探讨丝瓜籽核糖体失活蛋白基因Luffin-a原核表达载体的构建方法。方法从Pubmed中查到Luffin-a的mRNA全序列,用RT-PCR的方法从未成熟的丝瓜种子中克隆Luffin-a基因,T-A克隆后鉴定核苷酸序列,构建原核表达载体pET-15b(+)-Luffin-a,转化大肠杆菌BL21(DE3),并经IPTG诱导表达;SDS-PAGE鉴定Luffin-a表达产物。结果克隆出Luffin-a基因,IPTG诱导后大肠杆菌培养液和超声破碎的菌体沉淀中都有Luffin-a表达产物。结论本研究成功构建了Luffin-a原核表达载体。
- 孙晓东王燕罗超王珺桑明
- 关键词：核糖体失活蛋白
- 小檗碱经JAK/STAT3通路抑制VEGF诱导的人脐静脉内皮细胞增殖和迁移被引量：7
- 2015年
- 目的为探讨小檗碱对肿瘤血管生成的作用及机制,观察小檗碱对血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖和迁移的影响,探讨STAT3在这一过程中的作用。方法用小檗碱、AG490(JAK特异性抑制剂)干预VEGF孵育的HUVECs,用噻唑蓝[3-(4,5-Dimethyl-2-Thiazolyl)-2,5-Diphenyl Tetrazolium Bromide,MTT]法检测增殖、用Transwell法检测迁移、用Western Blot法检测STAT3活性变化。结果 1VEGF(20 ng/ml)作用HUVECs 24 h,可以诱导细胞迁移、增殖,同时p-STAT3蛋白表达平行增高;2小檗碱(20μg/ml)及AG490可明显抑制HUVECs的增殖、迁移以及p-STAT3蛋白表达,且小檗碱对增殖的抑制作用呈时间及浓度依赖关系(P<0.000,1)。结论小檗碱可通过JAK2/STAT3信号通路抑制VEGF诱导的HUVECs增殖和迁移。
- 刘岩涂明利孙晓东王燕
- 关键词：小檗碱STAT3转录因子迁移
