孙林
- 作品数：35 被引量：152H指数：8
- 供职机构：江苏省人兽共患病学重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生文化科学生物学更多>>
- 从噬菌体随机十二肽库中筛选新城疫病毒血凝素—神经氨酸酶模拟表位
- 本文以生物素标记的抗NDV HN McAb M22为筛选配基,应用噬菌体展示肽库技术,从噬菌体12肽库中筛选HN抗原模拟肽,并对其免疫生物学特性进行鉴定,旨在为进一步研究HN抗原分子的结构与功能、HN免疫机制、多肽疫苗的...
- 孙林焦新安刘文博潘志明刘秀梵
- 关键词：新城疫病毒噬菌体神经氨酸酶多肽疫苗
- 文献传递
- 抗H9亚型禽流感病毒血凝素单克隆抗体的制备和鉴定被引量：2
- 2010年
- 目的:获得分泌抗H9亚型禽流感病毒(AIV)血凝素单克隆抗体的杂交瘤细胞。方法:以H9N2亚型AIV为免疫原,免疫6～8周龄雌性BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0-Ag-14,在PEG4000的作用下进行细胞融合,通过血凝抑制(HI)试验筛选分泌抗H9亚型AIV血凝素单克隆抗体的杂交瘤细胞。结果:经过连续3～4次克隆化,获得能稳定分泌抗H9亚型AIV血凝素的单克隆抗体细胞系6株,分别命名为1B2、1C10、1G2、2B7、2E3和5E11。6株细胞培养上清HI效价为24～28,腹水HI效价为210～213。除1G2为IgM外,其余5株均为IgG1。Western blotting结果显示,1B2、1C10、2B7和2E3能与AIVH9蛋白在Mr为75000处反应,表明其是针对AIVH9亚型血凝素蛋白的单抗。特异性试验表明该6株单抗均只与H9亚型AIV发生特异性HI反应,而不与其他14个HA亚型的AIV及新城疫病毒、传染性支气管炎病毒发生交叉反应,显示出良好的特异性。结论:制备了针对H9亚型禽流感病毒血凝素的单克隆抗体,为禽流感的快速诊断和病毒的抗原性分析等奠定了基础。
- 孙林季琰左为亮王秀荣潘志明焦新安
- 关键词：禽流感病毒H9亚型血凝素单克隆抗体
- 从噬菌体随机十二肽库中筛选新城疫病毒血凝素—神经氨酸酶模拟表位
- 新城疫(Newcastle disease,ND)是由新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)引起禽类的一种急性传染病,被国际兽疫局(OIE)列为对畜禽危害最大的A类传染病之一。NDV在分类上...
- 孙林焦新安刘文博潘志明刘秀梵
- 关键词：新城疫病毒神经氨酸酶噬菌体肽库模拟表位家畜传染病学抗原表位预测
- 文献传递
- 微生物生物学研究型教学改革初探被引量：36
- 2008年
- 本文就微生物生物学课程体系建设、授课方法、教学手段以及实验教学模式等方面进行探索。通过教学实践证明,改革微生物生物学教学模式能激发学生的学习兴趣,培养学生的独立解决问题的能力,发展他们的创造性思维,是培养高素质创造型人才的重要途径。
- 殷月兰焦新安潘志明孙林黄金林陈祥
- 关键词：研究型教学教学改革
- 牛γ-干扰素ELISA检测方法的建立与初步应用被引量：16
- 2010年
- 以纯化的rHis-BoIFN-γ制备兔多抗血清,辛酸—硫酸铵两步法对体内诱生的抗rBoIFN-γ单抗腹水进行纯化,用美洲商陆素(Pokeweed mitogen,PWM)刺激奶牛全血产生的分泌性天然BoIFN-γ筛选出与之反应最佳的单抗5E11。将单抗5E11以40μg/mL浓度包被,与1∶3 000倍稀释的兔抗rHis-BoIFN-γ多抗血清(13.8μg/mL)配对,以1∶6 000稀释的商品化酶标羊抗兔IgG为指示抗体,建立了BoIFN-γ抗原捕获ELISA检测方法,该方法可以检出2.56 U/100μL(30.5 pg/100μL)的rHis-BoIFN-γ、8U/100μL的rBac-BoIFN-γ和1U/100μL的分泌性天然BoIFN-γ。以商品化试剂盒作为平行对照,将获得的奶牛临床检测血浆样品使用BoIFN-γ抗原捕获ELISA法进行检测,结果显示两种方法检测符合率达到83.9%。本研究建立的BoIFN-γ抗原捕获ELISA检测方法可有效检测分泌性IFN-γ,为进一步开发BoIFN-γELISA检测试剂盒奠定了基础。
- 陈祥牛中伟徐正中孟闯孙林黄金林潘志明焦新安
- 关键词：Γ-干扰素单克隆抗体
- 破伤风毒素C片段单克隆抗体的研制
- 目的:研制抗破伤风毒素C片段（TetC）的单克隆抗体（mAb）。方法:以纯化蛋白His-TetC免疫6周龄雌性BALB/c小鼠。末次加强免疫后取其脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0-Ag-14融合,应用间接ELISA筛选阳性克...
- 单艳菊潘志明张成全孙林焦新安
- 关键词：单克隆抗体
- 文献传递
- 鸡CD3分子单克隆抗体及其免疫生物学特性
- 研制抗鸡 CD3分子特异性单克隆抗体(mAb)。用重组真核表达质粒 pcD- NA3．1-CD3免疫6周龄 BALB/c 小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术,制备抗鸡 CD3分子 mAb。共获得7株特异性分泌抗鸡 CD3分子的...
- 张小燕潘志明胡青海胡茂志孙林李玉君董慧单艳菊张成全白海焦新安
- 关键词：单克隆抗体
- 文献传递
- 从噬菌体随机十二肽库中筛选新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶模拟表位被引量：3
- 2004年
- 以生物素标记的抗新城疫病毒(NDV)血凝素＿神经氨酸酶(HN)的单抗M22为分子探针,从噬菌体随机12肽库中筛选鉴定该抗体所识别的抗原模拟表位。经过三轮亲和筛选,得到了四个能与单抗M22反应的阳性噬菌体单克隆,分别为CLONE11、17、18、20。竞争ELISA试验表明,CLONE20与M22的结合能被新城疫弱毒株LaSota特异性抑制,抑制率达67 3%。经测序,获得CLONE20的插入序列为SWFHHHQARAPM,同源性分析认为WF和QAR在HN的抗原性中起重要作用。动物试验结果表明,CLONE20能诱导SPF鸡产生一定水平的具有血凝抑制活性的特异抗体。以上结果显示SWFHHHQARAPM是具有免疫原性的HN抗原模拟表位。
- 孙林焦新安刘文博潘志明黄金林彭大新刘秀梵
- 关键词：新城疫病毒单克隆抗体模拟表位
- 沙门菌、产单核细胞李斯特菌多重PCR检测方法的建立及应用被引量：10
- 2006年
- 目的建立沙门菌、产单核细胞李斯特菌多重PCR检测方法,提高检测效率和敏感性。方法选择沙门菌组氨酸转运操纵子基因、产单核细胞李斯特菌溶血素基因序列设计引物,在单一PCR方法基础上,建立检测两种病原菌的多重PCR技术。结果在495bp和850bp处分别出现预期的特异性DNA扩增条带,敏感性试验显示该体系能检测出32pg的沙门菌DNA和274pg的李斯特菌DNA,样品检测表明该方法与单一PCR和国标方法的符合率达100%。结论本研究建立了能同时检测沙门菌和产单核细胞李斯特菌的多重PCR技术,为主要食源性病原菌快速检测提供了新方法。
- 黄金林潘志明颜卫朱冬冬殷月兰孙林焦新安
- 关键词：沙门菌产单核细胞李斯特菌多重PCR
- “纸上谈兵”话创新——大学本科生实验自主设计教学改革初探被引量：3
- 2018年
- 本文实验教学过程中,改变以往学生被动式按照标准实验操作验证某一实验,对实验原理及实验设计思考较少的现象,转换思路使学生先行"纸上谈兵",促使学生主动设计实验,增加实验设计过程中讨论及实验趣味性等过程,提高学生灵活运用知识的能力,以及培养学生逻辑思维和表达能力。
- 耿士忠潘志明黄金林孙林
- 关键词：实验教学
