宁淑华
- 作品数：16 被引量：12H指数：2
- 供职机构：重庆市公安局更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生政治法律生物学建筑科学更多>>
- 应用多孔材料分离混合斑中精子的方法
- 本发明公开了一种应用多孔材料分离混合斑中精子的方法：(1)混合斑的前处理：用细胞洗脱液将精子细胞与其它细胞成分从物证上脱离下来，得到混悬液；(2)精子与多孔材料的结合：取多孔材料吸附件和混合液，将混合液倒在多孔材料吸附片...
- 宁淑华王清山陈骏陈柏宇乔晓义冯双龙巩强
- 文献传递
- 常见嗜尸性蝇类蛹壳样品在种属分子鉴定中的应用被引量：2
- 2015年
- 目的探讨常见嗜尸性蝇类蛹壳样品在法医昆虫学种属鉴定中的应用价值。方法收集不同保存时间的嗜尸性蝇类成虫及其羽化后的蛹壳成套样品共55套,根据形态学特征鉴定为2科6属8种。以不同保存时间,将上述样品分为〈2年组（n=23）、2-5年组（n=20）和〉5年组（n=12）。取单个成蝇胸部和空蛹壳,以十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）法提取各样品mt DNA,并测定其浓度和纯度。PCR扩增COⅠ基因,获得COⅠ基因序列Ⅰ和Ⅱ,分别截取498 bp和841 bp的序列。在Gen Bank数据库对所获序列作BLAST搜索,进行同源性比对分析。结果所有样品均成功提取了mt DNA。保存时间≤5年的成虫胸肌和〈2年的空蛹壳DNA浓度多在1.0-3.0μg/μl之间,A260/A280值多在1.6-1.8之间。保存时间〉5年的成虫胸肌和≥2年的空蛹壳DNA浓度多低于1.0μg/μl,A260/A280值多低于1.6。随着样品保存时间的延长,各样品DNA浓度均明显下降（P〈0.01）。保存时间〈2年,成虫胸部样品和空蛹壳样品均成功扩增出COⅠ序列Ⅰ和序列Ⅱ。随着保存时间的延长,扩增成功率明显下降,序列Ⅱ表现更为明显（P〈0.01）。8种嗜尸性蝇类COⅠ基因序列Ⅰ和序列Ⅱ分别有6个和7个种属的同源性比对结果完全正确且样品序列比对的Max ident值均〉97%。结论嗜尸性蝇类空蛹壳样品可作为mt DNA提取和种属比对的检材。
- 李学博宁淑华张贵芹余红丽王清山李红卫
- 关键词：蛹壳种属鉴定
- 一种免疫磁珠分离精子与上皮细胞混合斑中精子的方法
- 本发明公开了一种免疫磁珠分离精子与上皮细胞混合斑中精子的方法，所述的分离方法步骤为：1）生物素标记抗精子膜蛋白抗体；2）精子与抗体的结合；3）磁珠与抗体-精子复合体的结合；4）精子与上皮细胞的分离；5）精子与磁珠的分离。...
- 李红卫王清山李学博封宇宁淑华王业全
- 文献传递
- 匹拉米洞与联苯胺在血痕预实验中的灵敏性及DNA损伤检测研究被引量：1
- 2018年
- 目的血液痕迹是暴力犯罪现场最易遗留的一类痕迹,是法医学检验中最常见和最重要的一类物证。血痕预实验是利用化学检测的方法从现场大量分布的可疑斑迹中初步筛选可能是血痕的重要方法,是法医学鉴定的重要前提。本文比较匹拉米洞法和联苯胺法的灵敏度、对DNA-STR检验的影响以及对细胞核的损伤情况,以探索匹拉米洞法应用于血痕预实验的可行性。方法对新鲜全血进行梯度稀释,观察比较检测灵敏度;利用Chelex-100提取匹拉米洞、联苯胺等试剂预检后的血痕样本中的DNA,应用PCR-STR技术及荧光检测技术检测样本的STR分型,观察STR分型结果,比较两种方法对后续DNA-STR检验的影响;在细胞培养液中加入联苯胺、匹拉米洞,应用彗星电泳技术评价细胞核DNA的损伤。结果匹拉米洞法可检测的最低血红蛋白浓度为25μg/m L,灵敏度低于联苯胺法(5μg/m L);DNA-STR有效分型率为96.67%,远高于联苯胺法(18.09%);联苯胺组彗星尾长为52.40±9.21、尾距为43.29±4.85、尾部DNA含量为16.25±2.35,显著高于匹拉米洞组。结论匹拉米洞法可用于血痕预实验,对血痕中DNA的损伤、对DNA-STR分型的影响均低于联苯胺法,可替代联苯胺作为新的法医学血痕预实验方法。
- 王清山范英南宁淑华喻永敏
- 关键词：法医物证学联苯胺法匹拉米洞法
- 口香糖中脱落细胞的检验和数据库应用1例
- 2012年
- 在笔者工作过程中，遇到了多起利用口香糖技术开锁的人室盗窃案件。随着犯罪的智能化。在犯罪现场很少能找到遗留的足迹、指纹等物证。此时，塞在锁心内的口香糖成为重要的现场物证。当前，公安机关正在进行DNA数据库建设并取得了巨大的成绩。在本文中，
- 王清山宁淑华
- 关键词：数据库建设口香糖脱落细胞犯罪现场盗窃案件
- 不同温度下人血清5′-核苷酸酶活力变化的时间规律研究被引量：1
- 2009年
- 研究探讨不同温度下人血清5′-核苷酸酶活力随死亡时间的变化规律，证明人血清中5′-核苷酸酶活力变化与血液离体时间具有较高的相关性，而且不同温度对5′-核苷酸酶活力变化有较强的影响。
- 郑吉龙王清山宁淑华邓晓军辛阳张艳苓
- 关键词：温度
- 土埋60余年牙齿DNA检验1例被引量：2
- 2010年
- 王清山宁淑华陈雪于娇林子清
- 关键词：法医物证学DNA检验
- 铁锤破碎残片致左颈内静脉破裂失血性休克死亡1例被引量：1
- 2014年
- 1 案例资料
某男，35岁．采石场工人，某日14时许被他人发现死于一采石场下的路上．尸体周围多处血迹．死因及案件性质不明。
- 宁淑华刘东王清山李学博
- 关键词：法医损伤学现场勘验
- 免疫磁珠法与差异裂解法检验混合样本的效果观察被引量：1
- 2015年
- 目的分析应用免疫磁珠分离技术和差异裂解法对混合样本的DNA检验效果,评价其在法医学应用中的价值。方法制备含有不同数量精细胞与阴道上皮细胞混合悬液和植绒混合斑拭子,分别采用MOSPD3抗体、SPAG8抗体免疫磁珠法及差异裂解法对样本进行检验,观察分析不同比例的混合细胞悬液,以及不同保存时间植绒混合斑拭子DNA分型的正确率。结果当混合细胞悬液内精细胞与阴道上皮细胞比例约1∶10时,免疫磁珠法的正确率明显高于差异裂解法(P<0.01);当比例等于或高于1∶1时,两种方法正确率的差异无显著性意义(P>0.05)。植绒拭子混合斑的免疫磁珠法正确率明显低于差异裂解法(P<0.01);随混合斑保存时间的延长,差异裂解法正确率无明显下降(P>0.05)。结论免疫磁珠法适用于新鲜混合样本中精细胞的分离检验,且在精细胞含量较低时优势更明显,差异裂解法较适合陈旧混合斑的分离检验。
- 李学博丁春丽宁淑华王清山封宇李红卫
- 关键词：法医物证学免疫磁珠混合斑精子DNA
- 利用精子特异性抗体SPAG8分离混合细胞体系中的精子被引量：2
- 2014年
- 目的利用精子特异性抗体SPAG8(Sperm associated antigen 8)结合免疫磁珠技术分离混合细胞系中的精子,建立混合斑中精子细胞分离的新方法。方法制备含有精子103、104、105/mL与阴道上皮细胞104/mL的3种混合悬液各10例,各样本制作混悬液及模拟混合斑各2份,分别以生物素标记的SPAG8单克隆抗体孵育特异结合混合悬液及混合斑中的精子,然后用亲和素包被的免疫磁珠通过生物素-亲和素复合体捕获分离精子细胞,提取精子DNA进行STR复合扩增和DNA分型检测,同时以差异裂解法检测混悬液及混合斑中的精子进行方法比较。结果免疫磁珠-亲和素-生物素-抗体复合物可分离混合细胞体系中的精子,当混合悬液内的精子数量达到103/mL时,90%的样本可得到13个STR基因座的单一男性分型,精子数量达到104/mL时,90%的样本均可得到16个STR基因座的单一男性分型;含有104/mL以上数量精子的混悬液制作的混合斑,单一男性13个STR基因座的正确分型率达80%以上,混悬液及混合斑的免疫磁珠法有效STR检出率高于传统的差异裂解法。结论本方法简便快捷,可作为混合斑法医学检验的有效补充手段。
- 李学博王清山宁淑华王业全封宇缪元颖李红卫
- 关键词：免疫磁珠混合斑精子DNA
