尹明茹
- 作品数：5 被引量：3H指数：1
- 供职机构：上海交通大学更多>>
- 发文基金：上海市自然科学基金上海市科委科研计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 不同供体细胞代数对兔体细胞核移植效率的影响被引量：1
- 2012年
- 将兔成纤维细胞分为5～10低代数组和20～25高代数组进行核移植研究。结果显示,2试验组供体细胞核移植的效率存在差异。通过对供体细胞进行核移植后的重构胚胎的融合率、卵裂率、囊胚率以及体内发育的比较,发现低代数相对来说更有效率,但是高代数组也能获得正常的克隆后代。结果表明,兔不同代数体外培养细胞对克隆效率存在影响,并为制备转基因打靶兔提供基础。
- 宋伟杰谷瑞环尹明茹李敦高邢凤英李善刚陈学进李和平
- 关键词：成纤维细胞体细胞核移植
- 基于克隆技术构建基因修饰兔模型的研究
- 随着越来越多的基因组序列相继被识别，人类对生物本质的认识已经发生了重大的变化，如何利用这些基因信息来研究其功能呢？在基础研究中，比较常用的方法是利用转基因技术和基因打靶技术构建动物模型来进行相关的研究。在生产基因修饰的大...
- 尹明茹
- 关键词：实验动物模型克隆技术体细胞核移植基因打靶
- 兔转基因成纤维细胞克隆的建立及条件优化
- 2012年
- 探索和优化兔成纤维细胞由单细胞成长为克隆群体的技术条件,建立转基因单克隆细胞系筛选系统,为进一步生产基因打靶克隆兔创造条件。将3～5代的成纤维细胞分散成单个细胞,对比不同培养基对单细胞克隆形成的影响。利用脂质体转染兔成纤维细胞后,按照不同的稀释比例传代并筛选转基因单细胞克隆,研究不同稀释比例对转基因单细胞克隆形成的影响。经过比较试验发现同化的DMEM/F12培养基能很好地支持单细胞克隆早期生长,转基因后1∶80倍的稀释比例能够获得较多的转基因单细胞克隆。本试验结果有助于提高转基因和基因打靶克隆动物的制作效率。
- 宋伟杰张振韬尹明茹李垚邢凤英李善刚陈学进李和平
- 关键词：转基因
- 兔Oct4启动子驱动RFP基因表达载体的构建及验证
- 2014年
- 转录因子OCT4在维持和调控胚胎干细胞的多能性中发挥着重要的作用。Oct4基因启动子驱动标志蛋白的表达对研究胚胎干细胞多能性和建立iPS细胞有重要意义。由于GFP在慢病毒转染过程中常用作转染标记,计划构建兔Oct4基因启动子(rOct4)驱动红色荧光蛋白表达的载体,这将有利于兔ES细胞和iPS细胞制备的研究。通过PCR方法扩增rOct4,构建了rOct4驱动RFP基因的表达载体rOct4-RFP。经转染小鼠ES细胞验证正确后,将rOct4-RFP质粒转染兔成纤维细胞系获得rOct4-RFP成纤维细胞系。经过酶切和测序验证,证明rOct4-RFP构建成功,而且能够在小鼠ES细胞系E14中表达细胞红色荧光蛋白,并受细胞分化状态的调控。通过脂质体介导的基因转移、抗性筛选和PCR鉴定建立了rOct4-RFP转基因成纤维细胞系。
- 唐澜姜伟华尹明茹周小梅李和平陈学进李善刚
- 关键词：RFP干细胞转基因
- 碱处理精子进行家兔ICSI介导转基因的初步研究被引量：1
- 2014年
- 采用10 mmol/L NaOH碱处理家兔精子使精子破膜后,和外源基因共同孵育,然后通过ICSI技术导入卵母细胞。另设无碱处理无质粒孵育组和碱处理后精子无质粒孵育空白组,观察并比较胚胎的发育情况。结果:精子碱处理与质粒孵育对胚胎的发育无显著影响(P>0.05),ICSI介导转基因后观察囊胚出现绿色荧光,占总囊胚数的34.78%,外源性DNA的转入率为19.51%。试验初步建立了用碱处理精子结合家兔ICSI的转基因方法。
- 周小梅尹明茹姜伟华蒋满喜陈学进李和平李善刚
- 关键词：家兔ICSI转基因碱处理
