张德胜
- 作品数：2 被引量：9H指数：2
- 供职机构：四川大学华西临床医学院(华西医院)更多>>
- 发文基金：四川省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- ATRA诱导鼠胚神经干细胞向神经元分化过程中Notch1的表达变化及意义被引量：3
- 2010年
- 目的观察全反式维甲酸(ATRA)体外诱导鼠胚神经干细胞(NSCs)分化为神经元过程中Notch1的表达变化,并探讨其机制。方法将NSCs分为两组,观察组加入终浓度为1.0μmol/L的ATRA,对照组不加ATRA。采用免疫细胞化学法检测NSCs Notch1蛋白,采用实时荧光定量PCR法检测NSCs Notch1 mRNA。结果观察组NSCs经ATRA诱导3、5、7、9 d,Notch1蛋白积分光密度值分别为539.43±13.46、488.67±13.12、437.54±13.10、434.32±13.04,Notch1 mRNA相对表达量分别为0.412 2±0.080 2、0.216 4±0.125 2、0.022 1±0.135 5、0.017 7±0.006 1;对照组分别为591.35±15.61、0.624 3±0.274 5,与对照组相比,P均<0.05。结论在ATRA体外促鼠胚NSCs分化为神经元过程中,Notch1表达减少;ATRA诱导NSCs向神经元的分化与抑制Notch信号途径有关。
- 钟德君康敏王清王高举张德胜宋跃明
- 关键词：神经干细胞NOTCH1蛋白
- Wnt-1在全反式维甲酸促鼠胚神经干细胞向神经元分化中的作用被引量：6
- 2009年
- 目的探讨全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid,ATRA)体外促神经干细胞(neural stem cells,NSCs)分化为神经元过程中Wnt-1表达的变化,及Wnt-1对NSCs分化的作用。方法取孕12～16dSD大鼠,分离和培养鼠胚NSCs。取第3代NSCs调整密度为1×106个/mL,分别用0.5、1.0、5.0、10.0μmol/L浓度的ATRA干预,通过荧光双标染色技术和流式细胞仪检测各组细胞神经元分化率,确定1.0μmol/L浓度为ATRA促NSCs分化的最佳浓度。实验组用1.0μmol/L ATRA诱导体外培养第3代NSCs,培养3、5、7、9d后用免疫细胞化学染色、实时荧光定量PCR、Westernblot检测Wnt-1表达的变化;对照组不加ATRA培养。结果免疫细胞化学染色示对照组Wnt-1蛋白表达极少;实验组3d时表达最强,阳性细胞多;培养5d仍可见Wnt-1阳性表达;3、5d时积分吸光度(IA)值与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);7、9d Wnt-1阳性表达明显减少,IA值与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。实时荧光定量PCR检测示对照组Wnt-1 mRNA相对表达量为0.0217±0.0721;实验组相对表达量随时间增加逐渐降低,3、5d时分别为0.5122±0.2800、0.2164±0.8870,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);7、9d分别为0.0385±0.2994、0.0355±0.3095,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。Westernblot印迹检测可见特异染色条带,对照组Wnt-1蛋白表达量为0.0051±0.5583;实验组表达量随时间增加逐渐降低,3、5d时分别为0.4517±0.0713、0.3117±0.0805,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);7、9d分别为0.0073±0.0527、0.0047±0.9314,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论在浓度为1.0μmol/L的ATRA诱导下,Wnt-1与NSCs的分化早期成正调控,可能与激活包括经典的Wnt信号途径等信号有关,表明Wnt-1与NSCs向神经元的分化有关。
- 钟德君康敏王清张德胜宋跃明
- 关键词：神经干细胞WNT-1分化
