徐德斌
- 作品数：11 被引量：34H指数：5
- 供职机构：第三军医大学新桥医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 对脂多糖结合蛋白致炎的多肽序列分析
- 2004年
- 目的 应用噬菌体随机 1 2肽库探讨脂多糖结合蛋白 (LBP)致炎作用的多肽序列。方法 以LPS为目标分子 ,对噬菌体 1 2肽库进行亲合筛选 ,4轮筛选后 ,检测随机挑取的噬菌体克隆的结合活性和抑制活性 ,将得到的 1 6个可与LBP竞争性结合LPS的噬菌体克隆进行生物学功能检测 ,对获得的 9个阳性克隆进行测序 ,并与LBP序列比较。结果 9个阳性克隆展示多肽的核心序列为WKXRKXFXKXXG ,与LBP的 91～ 1 0 2位氨基酸序列有较高同源性。结论 LBP的 91～ 1 0 2位氨基酸可能为其致炎作用部位。
- 徐德斌钱桂生侯一峰赵哓利陈维中李淑萍
- 关键词：噬菌体随机肽库脂多糖结合蛋白多肽
- 脂多糖结合蛋白功能位点分析被引量：5
- 2004年
- 徐德斌钱桂生侯一峰赵晓莉陈维中李淑萍
- 关键词：噬菌体脂多糖结合蛋白功能位点
- T_(H2)类细胞因子与哮喘关系研究进展被引量：2
- 2002年
- TH2 淋巴细胞通过分泌IL 4 ,IL 13,IL 5和IL9等细胞因子触发气道炎症引起哮喘。编码TH2 类细胞因子的基因位于染色体 5q31～ 33区 ,与哮喘有连锁关系。TH2 类细胞因子是治疗哮喘病人的重要目标靶。
- 徐德斌
- 关键词：TH2类细胞因子哮喘
- 脂多糖结合蛋白抑制肽的筛选和鉴定
- 2005年
- 目的:获得具有抑制脂多糖结合蛋白(LBP)致炎作用的可溶性多肽。方法:以LPS为目标分子,对噬菌体12肽库进行亲和筛选,4轮筛选后,检测随机挑取的100个噬菌体克隆的结合活性和竞争抑制活性,将得到的可与LBP竞争性结合LPS的噬菌体克隆进行功能筛选,对获得的阳性克隆进行DNA序列测定,推导外源肽氨基酸序列,并与LBP序列比较,确定LBP致炎作用位点。固相法合成LBP抑制性多肽,并检测其生物学活性。结果:16个噬菌体克隆可与LBP竞争性结合LPS,其中9个噬菌体克隆可显著抑制LBP增敏LPS的致炎作用。9个阳性克隆融合多肽的核心序列为WKXRKXFXKXXG,与LBP的91-102位氨基酸序列有明显同源性。化学合成的12肽WKVRKSFFKLQG-NH2具有显著的抑制LBP致炎功能的作用。结论:此12肽具有抑制LBP致炎功能的活性。
- 徐德斌钱桂生侯一峰赵晓利
- 关键词：细菌噬菌体肽库脂多糖类肽类
- 脂多糖结合蛋白抑制肽对内毒素诱导的人单核巨噬细胞株表达CD14的影响被引量：7
- 2005年
- 目的研究脂多糖结合蛋白(LBP)抑制肽对内毒素(LPS)诱导的人单核巨噬细胞株U937细胞表达CD14的影响。方法佛波脂(PMA)诱导U937成熟后分为5组:正常对照组、LPS组(100ng/mLLPS+100ng/mLrhLBP)、低剂量抑制肽组、中剂量抑制肽组及高剂量抑制肽组,后3组分别给予10、100和1000ng/mL抑制肽。用RTPCR和蛋白定量方法(Westernblot)测定CD14mRNA和蛋白的表达,ELISA测定培养上清液中肿瘤坏死因子α(TNFα)的含量。结果LBP抑制肽显著抑制LPS刺激后U937细胞CD14的mRNA与蛋白表达,同时也抑制了TNFα的分泌,较LPS组有显著差异。结论LBP抑制肽通过抑制由CD14介导的LPS信号跨膜转导和TNFα的分泌,对LPS所致疾病如脓毒血症、急性肺损伤可能有潜在的治疗作用。
- 吴学玲钱桂生徐德斌侯一峰
- 关键词：内毒素基因表达CD14LPS肿瘤坏死因子-Α
- LBP抑制肽对LPS诱导的小鼠内毒素血症肺组织NF-κB活性的影响被引量：5
- 2009年
- 研究LBP抑制肽P12对脂多糖(LPS)诱导的小鼠内毒素血症肺组织核转录因子κB(NF-κB)活性的影响,探讨P12体内阻断内毒素信号转导通路的部分机制。40只小鼠随机分为5组:对照组、内毒素血症组、低剂量P12组、中剂量P12组和高剂量P12组,每组8只。腹腔内注射LPS复制内毒素血症模型,尾静脉注射P12,用免疫细胞化学染色图象分析法和蛋白质定量分析法(Western blot)测定小鼠肺组织NF-κB的活性;硝酸还原酶法测定血清中NO的含量。结果:LPS刺激后NF-κB P65进入核内,P12组核易位明显减少。低、中、高剂量P12组P65核浆灰度(OD)比分别为1.45±0.53、1.24±0.34、0.84±0.75,明显低于内毒素血症组(3.08±0.16)。低、中、高剂量P12组NO水平分别为(106.17±24.93)μmol/L、(80.84±19.23)μmol/L和(67.28±16.67)μmol/L,明显低于内毒素血症组(185.49±20.13)μmol/L。P12能显著抑制LPS诱导的小鼠内毒素血症肺组织NF-κB的活化,并降低其NO的释放。表明P12对内毒素血症可能具有潜在的预防和早期治疗作用。
- 吴学玲赵云峰徐德斌钱桂生
- 关键词：核转录因子ΚB
- 噬菌体展示短肽模拟脂多糖结合蛋白抗炎功能位点的研究被引量：7
- 2004年
- 目的 应用噬菌体随机 12肽库筛选脂多糖结合蛋白 (lipopolysaccharidebindingprotein ,LBP)具有抗炎作用的肽序列。方法 以LPS为目标分子 ,对噬菌体十二肽库进行亲合筛选 ,4轮筛选后 ,检测随机挑取的噬菌体克隆的结合活性和抑制活性 ,对可与LBP竞争性结合LPS的噬菌体克隆行细胞因子生成抑制实验和LPS内化抑制实验 ,对获得的阳性克隆进行DNA序列测定 ,推导外源肽氨基酸序列 ,并与LBP序列比较 ,确定LBP的抗炎功能位点。结果 随机挑取的 10 0个噬菌体克隆中 16个可与LBP竞争性结合LPS ,其中 7个噬菌体克隆对LBP的增敏LPS刺激PBMC分泌TNF α功能无作用 ,对这 7个克隆进行LPS内化抑制实验 ,其中 3个克隆可以抑制LBP增强LPS内化作用。测序发现这 3个阳性克隆融合多肽的序列均为FHTRWNYWPYLH ,与LBP一级结构氨基酸序列同源性低。结论 该
- 徐德斌钱桂生侯一峰赵晓利陈维中李淑萍
- 关键词：噬菌体随机肽库脂多糖结合蛋白功能位点
- 抗内毒素治疗的基础和临床研究进展被引量：7
- 2003年
- 内毒素是引起全身炎症反应综合症、脓毒症和感染性休克等的重要原因 ,本文主要简介针对内毒素在细胞外信号转导的诸环节拮抗内毒素治疗的基础和临床研究进展。
- 徐德斌钱桂生
- 关键词：内毒素脓毒症感染性休克全身炎症反应综合症
- 脂多糖结合蛋白抑制肽对内毒素诱导的U937细胞TLR4的影响被引量：5
- 2005年
- 目的 研究脂多糖结合蛋白 (LBP)抑制肽对内毒素 (LPS)诱导的人单核巨噬细胞株U937细胞TLR4的影响。方法 佛波脂 (PMA)诱导U937成熟后分为 5组 ,即正常对照组 ;LPS组 ;低剂量抑制肽组 ;中剂量抑制肽组 ;高剂量抑制肽组。用RT-PCR和蛋白定量方法 (Westernblot)测定TLR4mRNA和蛋白的表达 ,ELISA测定培养上清液中肿瘤坏死因子 -α(TNF -α)的含量。结果 LBP抑制肽组TLR4的mRNA ,蛋白的OD值 ,TNF -α的浓度均较LPS组低 ,较正常组高。结论 LBP抑制肽通过抑制由TLR4介导的LPS信号跨膜转导和TNF -α的分泌 ,对LPS所致疾病如脓毒血症、急性肺损伤可能有潜在的治疗作用。
- 吴学玲钱桂生徐德斌侯一峰
- 关键词：脂多糖CD14肿瘤坏死因子-Α
- 肺损伤机制研究:脂多糖结合蛋白抑制肽对脂多糖诱导的人单核细胞株核转录因子κB活性的影响被引量：3
- 2005年
- 目的:探讨肺损伤机制和脂多糖结合蛋白(lipopolysaccharide-bindingprotein,LBP)抑制肽对脂多糖诱导的人单核细胞株U937细胞核转录因子κB(nuclearfactorkappaB,NF-κB)活性的影响,研究LBP抑制肽对脂多糖所致肺损伤的作用。方法:佛波脂诱导U937成熟后分为5组。即正常对照组;脂多糖组(10μg/L脂多糖+100μg/L重组人LBP);低剂量抑制肽组;中剂量抑制肽组;高剂量抑制肽组(后3组分别给予10,100和1000μg/L抑制肽)。用免疫细胞化学染色图像分析法和蛋白质定量分析法(Westernblot)测定U937细胞NFκB的活性;ELISA测定培养上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果:脂多糖刺激后NFκBP65进入核内,抑制肽组核易位明显减少。低、中、高剂量抑制肽组P65核浆灰度比分别为0.59±0.06,1.02±0.12和1.08±0.10,明显低于脂多糖组1.34±0.12)(t=4.756,P(<0.01;t=2.235,2.308,P<0.05)。低、中、高剂量抑制肽组TNF-α水平分别为(93.66±2.30),(75.78±6.55)和(71.50±7.75)pg/L,明显低于脂多糖组犤(128.67±39.67)pg/L犦(t=2.216,P<0.05;t=2.423,2.389,P<0.01)。结论:LBP抑制肽抑制了U937细胞NFκB的活性和TNF-α的释放;LBP抑制肽对脂多糖所致肺损伤可能具有潜在的预防作用。
- 吴学玲钱桂生徐德斌侯一峰陈维中
- 关键词：脂多糖类肿瘤坏死因子
