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肺炎支原体聚合酶链反应结合探针检测在儿童肺炎支原体肺炎诊断及耐药中的应用价值被引量：18: 2017年; 目的评价肺炎支原体（Mp）聚合酶链反应（PCR）结合探针检测方法对儿童MP肺炎（MPP）的诊断价值，并分析影响诊断准确性的因素，同时明确MP的耐药突变情况及影响因素。方法选择2015年6月至2016年3月在首都医科大学附属北京儿童医院呼吸科住院并临床诊断为MPP的225例患儿及非支原体肺炎的101例患儿，对患儿入院24h内咽拭子标本进行MP—DNA扩增，荧光探针方法检测MP和大环内酯类抗生素耐药突变情况。将年龄、性别、临床症状、入院时病程、人院前大环内酯类抗生素治疗史及肺炎治疗4周内是否血清MP-抗体滴度4倍或4倍以上升高或减低等病历信息与MP—DNA检出及其耐药突变情况进行相关性分析。结果PCR结合荧光探针方法检测MP肺炎的敏感性为80．4％（181／225例），特异性为98．0％（99／101例）。双份血清MP一抗体滴度4倍或4倍以上升高或减低组的MP．DNA检出率显著高于单次血清滴度≥l：160组[88．8％（71／80例）比75．9％（110／145例）堵。=5．443，P=0．020]。性别、年龄、入院时病程长短及院外大环内酯类抗生素治疗与MP-DNA的检出率均未见相关性。iVIP．DNA耐药突变率为85．1％（154／181例），人院前已经规律使用大环内酯类抗生素治疗1个疗程组的DNA耐药突变率（89．6％）高于未使用组和使用但未完成1个疗程组的MP—DNA耐药突变率（71．9％及86．6％），3组比较差异有统计学意义（，=4．454，P=0．035）。结论PCR结合荧光探针检测方法用于MPP诊断具有较高的敏感性和特异性，MP．DNA耐药突变率整体较高，儿童MPP的临床用药需要根据耐药性进行调整。; 郭琰申晨李勤静孙琳焦伟伟李洁琼徐保平申阿东; 关键词：儿童肺炎支原体耐药肺炎

RNA恒温扩增(SAT)技术在儿童肺炎支原体肺炎诊断中的应用价值研究: 吴喜蓉李勤静焦伟伟徐保平李礼申阿东

耐药结核病发病机制的研究进展被引量：9: 2015年; 结核病是由MTB引起的传染性疾病,是全球仅次于艾滋病的第二大致死性感染性疾病.20世纪40年代以来随着抗结核药物的有效使用,结核病的发病率和死亡率曾一度大幅下降,但近年来由于耐药MTB的出现和广泛流行,结核病死灰复燃,给结核病的防控工作带来了严峻挑战.据世界卫生组织（WHO）估计,2013年全球报道的耐多药结核病（multidrug-resistant tuberculosis,MDR-TB）约30万例,其中9.0％的病例为广泛耐药结核病（extensively drug-resistant tuberculosis,XDR-TB）,而全球MDR-TB的治愈率仅为48％[1].因此,耐药结核病,尤其是MDR-TB已成为目前结核病防控工作的重点和难点.; 李勤静焦伟伟申阿东; 关键词：耐药结核病 TUBERCULOSIS MDR-TB 性感染性疾病耐多药结核病传染性疾病

单核苷多态性rs1800796位点在检测ATDH易感性中的应用: 本发明公开了单核苷多态性rs1800796位点在检测ATDH易感性中的应用。本发明首先保护用于检测rs1800796 SNP位点的核苷酸的物质在制备产品中的应用。本发明还保护一种产品，含有用于检测rs1800796 SN...; 申阿东申晨綦辉汤海京李颖佳孙琳焦伟伟杨旭李勤静田志刚李洁琼肖婧徐放王咏红郭雅洁; 文献传递

结核分枝杆菌特异性效应T细胞斑点数鉴别儿童活动性结核病与潜伏结核感染的价值被引量：11: 2013年; 目的通过γ干扰素释放试验探讨结核分枝杆菌特异性效应T细胞斑点数(简称T细胞斑点数)鉴别儿童活动性结核病(TB)与潜伏结核感染(LTBI)的价值。方法纳入T细胞斑点试验(T.SPOT.TB)阳性且未经过抗结核治疗的93例活动性TB(重症TB27例,非重症TB66例)和47例LTBI儿童,根据T.SPOT.TB结果对T细胞斑点数进行比较分析。结果活动性TB组T细胞斑点数中位数84(6～710)显著高于LTBI组17(6～316),P=0.000;非重症TB患儿的T细胞斑点数中位数为99(6～710),显著高于重症TB的44(6～268),P=0.011,也显著高于LTBI组17(6～316),P=0.000;重症TB儿童T细胞斑点数中位数高于LTBI组儿童(44vs17),但差异无统计学意义(P=0.084),T细胞斑点数分布在活动性TB、重症TB、非重症TB和LTBI之间均有较大范围重叠。受试者工作特征曲线分析显示以T细胞斑点数43.5作为区分活动性TB与LTBI的最佳界值,其敏感度与特异度分别为69.9%和70.2%。结论 T细胞斑点数在活动性TB尤其是非重症TB患儿显著高于LTBI儿童;T细胞斑点数的数量可反映体内的结核分枝杆菌负荷,但不能用于区分儿童活动性TB与LTBI。; 田建岭刘晓灵孙琳焦伟伟肖婧尹青琴吴喜蓉郭雅洁韩锐李勤静申阿东; 关键词：活动性结核病潜伏结核感染 Γ干扰素释放试验

宏基因组测序技术在中枢神经系统感染病原体检测中的应用现状被引量：25: 2019年; 中枢神经系统( central nervous system, CNS)感染可引起严重的并发症和后遗症,早期快速明确CNS感染的病原体,对于降低CNS感染的病死率和减少后遗症都有重要的作用.目前脑脊液的病原体检测仍主要以脑脊液涂片进行形态学鉴定、细菌培养和抗原检测为主,部分能开展分子生物学方法检测,总体阳性率低,超过一半的CNS感染无法明确病原,使CNS感染的诊治面临极大的困难.以二代测序(next-generation sequencing , NGS)为基础的宏基因组测序技术作为新的检测技术,具有高通量、高灵敏度等特点,在微生物检测方面具有显著的优势.本文主要从NGS在CNS感染病原体诊断及其所面临的问题与挑战等方面进行综述,以求更加系统地了解以NGS为基础的宏基因组测序技术在CNS感染精确诊断中的作用.; 郭凌云李勤静刘钢; 关键词：中枢神经系统感染抗原检测分子生物学方法 CNS 形态学鉴定

晚发和超晚发型B族链球菌侵袭性感染95例临床特点分析: 总结婴儿晚发型和超晚发型B族链球菌(group B Streptococcus,GBS)侵袭性感染的临床特点及预后.回顾性分析2007年1月至2017年10月北京儿童医院收治的95例晚发型和超晚发型GBS侵袭性感染患儿的...; 耿竹馨朱亮张烨李勤静刘钢; 关键词：小儿患者 B族链球菌侵袭性感染晚发型预后分析

二代测序技术在临床微生物领域中的应用进展被引量：12: 2018年; 二代测序技术（next-generation sequencing,NGS）是相对于第一代DNA测序技术而言的新型测序手段.1977年Frederick Sanger发明了双脱氧链终止法核酸测序技术,使得基因测序成为可能,也成就了人类基因组测序的完成.Sanger测序法被称为第一代测序技术,其测序准确性高,在PCR产物、载体克隆测序等方面得到极为广泛地应用.但Sanger测序法也存在一些缺陷,如测序反应时间较长、测序通量低、成本高.为了解决这一问题,美国国立人类基因组研究所（The National Human Genome Research Institute,NHGRI）于2004年启动了NGS项目.2005年基于焦磷酸测序法的超高通量基因组测序系统被报道,开创了NGS的先河.NGS最大的优势在于通量高、成本较低、敏感性高,可以同时测定几百万甚至上亿条DNA或者RNA序列,大大加快了全基因组测序的速度,从而极大地降低单个碱基测序的成本.这完全改变了过去的研究模式,给人类和动植物基因组学、转录组学、宏基因组学研究等方面带来了全新的变化,并逐步深入到微生物学研究领域中.为提高对该技术的认识,现就NGS在临床微生物领域中的应用进行综述.; 郭凌云李勤静刘钢杨永弘; 关键词：DNA测序技术临床微生物人类基因组测序全基因组测序 PCR产物

结核分枝杆菌利福平耐药机制及其适应性研究进展被引量：3: 2017年; 利福平是重要的一线抗结核药物,且绝大部分的利福平耐药菌株为耐多药菌株.近年来,耐多药菌株的广泛传播给结核病的防控工作带来了极大威胁,研究认为病原菌自身的适应性是影响耐药菌株传播的重要因素之一.因此,作者主要就利福平耐药菌株的产生机制及其适应性变化的研究现状结合文献复习进行阐述,以更好地理解细菌耐药性的发生和发展机制.; 李勤静焦伟伟; 关键词：利福平抗药性药物评价

肺炎支原体RNA检测在儿童肺炎支原体肺炎疗效监测中的应用价值被引量：55: 2016年; 目的探讨应用肺炎支原体RNA检测(RNA实时荧光恒温扩增技术,MP-SAT)作为儿童肺炎支原体肺炎(MPP)治疗效果监测指标的可行性和应用价值。方法纳入北京市平谷区妇幼保健院住院的社区获得性肺炎患儿,其中符合MPP诊断标准者为MPP组,余为非MPP组。1以血清肺炎支原体(MP)抗体(MP-Ab)检测为诊断MP感染的参照试验,考察MP-SAT诊断MP感染的敏感度和特异度。2对MP-SAT和血清MP-Ab均阳性MPP病例行动态观察,比较MP-SAT和血清MP-Ab在大环内酯类药物标准治疗不同时间的阳性率,MP-SAT转阴时间和临床痊愈时间。3比较不同MP-SAT转阴时间MPP病例发热时间、入院24 h内血常规(WBC、N、L),超敏C反应蛋白(hs-CRP)和血清乳酸脱氢酶(LDH)及胸部X线指标的差异。结果 MPP组73例,非MPP组150例。MP-SAT诊断MP感染的敏感度和特异度分别为83.6%(61/73)、97.3%(146/150)。MPP组MP-SAT和血清MP-Ab均阳性61例,随治疗时间的延长,MP-SAT阳性率显著降低(P<0.05),而血清MP-Ab的阳性率呈增高趋势(P<0.05)。61例临床痊愈时间平均为(3.0±0.9)周,MP-SAT转阴时间为(3.3±0.8)周,差异无统计学意义(P>0.05)。MP-SAT转阴时间越长的病例表现为发热持续时间越长,入院24 h内中性粒细胞百分比、CRP、LDH水平越高,X线胸片大片实变比例越高,淋巴细胞百分比越低(P<0.05)。结论 MP-SAT可作为评价MPP转归以及判断大环内酯类药物疗效的指标。; 郭丽孙琳郭琰李勤静吴喜蓉刘芳李颖佳王杏云王婷徐保平冯雪莉申阿东; 关键词：肺炎支原体社区获得性肺炎 RNA检测临床疗效儿童

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李勤静

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