李小俊 作品数:37 被引量:156 H指数:7 供职机构: 河北北方学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 “重大新药创制”科技重大专项 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 农业科学 更多>>
树突细胞趋化因子对不可分型流感嗜血杆菌P6蛋白疫苗免疫效果的影响 韩小艳 张玉妥 王晨红 乔海霞 常月立 李小俊 杨新玲 该研究的成果和创新性在于首次通过基因工程技术体外大量诱导NTHiP6蛋白的表达首次探讨了MDC佐剂对P6蛋白疫苗免疫效果的影响。通过研究发现通过腹腔免疫MDC佐剂明显提高了NTHiP6疫苗的体液免液水平并在一定程度上提高...关键词:关键词:流感嗜血杆菌 基因佐剂 巨噬细胞源性趋化因子对NTHiP6蛋白疫苗免疫效果的影响 2015年 观察巨噬细胞源性趋化因子(MDC)佐剂对NTHiP6蛋白疫苗免疫效果的影响。将原核表达质粒PGEX-6P2/P6转入E.coli XL1-Blue,IPTG诱导P6蛋白的表达并进行纯化。将BALB/c小鼠随机分为A-D四组,分别为PBS对照组、MDC对照组、P6蛋白组、P6蛋白联合MDC组。分别于0、14、28d经黏膜免疫,末次免疫后14d,每组12只小鼠取血和肺泡灌洗液,ELISA检测血清中IgG抗体和肺泡灌洗液中IgA抗体水平。每组取3只小鼠,制备脾淋巴细胞,ELISA检测IL-4、IL-17和IFN-γ水平。用10LD50NTHi攻击每组剩余15只小鼠,观察免疫保护作用。在大肠杆菌中成功表达P6蛋白。第三次免疫后,D组诱导的IgG抗体、IgA抗体、IL-4、IL-17和IFN-γ水平显著高于其他各组(P<0.05)。经NTHi攻击后,D组生存率达80%,与A组、B组相比差异有统计学意义(P<0.05),但C组、D组之间无显著性差异(P>0.05)。MDC作为佐剂可以使NTHiP6疫苗获得较好的免疫效果。 韩小艳 张彦霞 杨新玲 李小俊 王晨红 张玉妥关键词:不可分型流感嗜血杆菌 黏膜免疫 两株红树林根际土壤放线菌的鉴定和抗菌活性研究 被引量:4 2017年 目的对分离自广西北仑河口红树林根际土壤的两株放线菌(B200、B205)进行抗菌活性研究及鉴定。方法观察两株放线菌的形态特征;通过PCR扩增、测定并比对16S rRNA基因序列,采用邻接法构建系统发育树并进行分析;通过液体发酵、萃取等方法,分别获得发酵液水相、发酵液酯相和菌丝丙酮浸提液三类样品;样品通过纸片扩散法进行抗菌活性测定。结果从红树林根际土壤分离的两株放线菌,其发酵液具有较强的广谱抗菌活性,菌株的16S rRNA基因序列对比结果显示,菌株B200和B205分别与有效发表菌株Agromyces subbeticus DSM16689~T的相似率为98.01%和Micromonospora rosaria DSM 803~T的相似率为99.73%,菌株B200可能为壤霉菌属潜在新种,B205初步鉴定是小单孢菌Micromonospora rosaria DSM 803~T的变种。结论分离自广西北仑河口红树林根际土壤的两株放线菌其次级代谢产物有较强抗菌活性,具有从中发现新抗生素的潜力。 吴越 李小俊 陈建宏 蒋莲秀 何玉林 韦晗宁 孙承航 黄大林关键词:红树林 放线菌 抗菌活性 耐药菌 RRNA 留学生医学微生物学实验教学实践与探索 被引量:1 2012年 医学微生物学是医学专业留学生的一门重要基础课,而实验课是医学微生物学整个教学环节中的一个重要组成部分。该文从教材和教学内容选取、实验准备、课堂教学及教学管理等方面,对留学生医学微生物学实验教学活动进行实践与探索,为医学院校开展留学生教育提供参考。 杨新玲 李小俊 张玉妥关键词:医学微生物学 留学生 实验教学 河南神仙洞放线菌资源勘探及抗菌活性筛选 被引量:7 2015年 目的勘探河南神仙洞放线菌多样性,以期发现药用微生物资源,为新抗生素发现奠定基础。方法采用10种分离培养基,以稀释涂布法分离放线菌;采用16S r RNA基因序列比对分析开展初步鉴别;经液体发酵,发酵液乙酸乙酯萃取,菌丝体丙酮浸提,获得提取浓缩物样品,采用纸片扩散法对样品进行抗菌活性筛选,活性菌株进行次级代谢产物生物合成基因NRPS,PKS I和PKS II的筛选。结果从6份土壤样品中共纯化到179株放线菌;经16S r RNA基因序列比对分析,它们分布于11个科18个属,其中链霉菌属为优势菌属;菌株S6R2A4-9的16S r RNA基因序列与最近有效菌株Flindersiella endophytica EUM 378T的相似率为93.58%,为潜在新属;发酵74株放线菌,其中52株在至少一个抗菌活性筛选中为阳性,总阳性率为70.27%。52株有活性的放线菌中,48株菌存在至少一个次级代谢产物生物合成基因簇,阳性率为92.3%,其中17株同时具有3种生物合成基因簇。结论河南新密神仙洞土壤中存在较为丰富的药用放线菌资源,具有从中发现放线菌新物种及新抗生素的潜力。 戴素娟 李静 刘少伟 李小俊 蒋忠科 姜蓉 孙承航关键词:洞穴 放线菌 生物合成基因簇 生物活性 利用原生质体融合技术选育高产菌株 被引量:3 2007年 以龟裂链霉菌(Sterpomyces rimosus)98#和76#为出发菌株,分别用溶菌酶制得2个亲本的原生质体,其中76#采用15 W紫外灯下30 cm照射25 min,100%灭活,用PEG诱导进行了原生质体的融合.通过比较菌落外观、颜色挑选融合子328株,结合前期代谢情况进一步筛选高单位的融合菌株8株,经反复传代考察融合子的稳定性后得到1株新菌株102#,其发酵单位比亲本提高了13.0%. 李小俊 孙海虹 赵宝华 边艳青关键词:原生质体融合 灭活 广西北仑河口红树林根际土壤放线菌资源勘探及活性研究 目的:研究广西北仑河口红树林根际土壤放线菌的多样性,为新放线菌资源及新抗生素的发现奠定基础.方法:采用5种分离培养基,稀释涂布法分离放线菌;PCR扩增,16S rRNA基因序列比对,分析放线菌多样性;菌株经液体发酵,上清... 吴越 李小俊 陈建宏 蒋莲秀 何玉林 韦晗宁 乔永超 何义 孙承航 黄大林表达不同接头长度的MDC与CVB3VP1融合基因疫苗免疫效果的研究 2010年 目的:观察表达不同接头(Linker)长度的巨噬细胞源趋化因子(MDC)与CVB3VP1融合基因疫苗的免疫效果。方法:将6~8周龄雄性BALB/C小鼠随机分为A^D 4组,分别肌肉注射pcDNA3、pcDNA3/VP1、pcDNA3/MDC-L10-VP1、和pcDNA3/MDC-L19-VP1,每次接种100μg/只,4周注射一次,共3次,第3次免疫后3周,每组取3只小鼠,制备脾细胞,用CCK-8法检测脾淋巴细胞增殖活性和特异性CTL杀伤活性;每组取3只小鼠以3LD50CVB3病毒攻击,第7天处死,取心脏,制备石蜡切片,观察各组小鼠心肌病理学改变;每组取8只小鼠用5LD50的CVB3腹腔内攻击,观察并记录小鼠死亡情况至感染后的第21天。结果:第3次免疫后,D组中小鼠脾淋巴细胞增殖活性和特异性CTL杀伤活性显著高于其它各组(P<0.01);以5LD50CVB3感染小鼠后,D组小鼠存活率最高;以3LD50CVB3病毒攻击后,D组小鼠心肌病理改变最轻。结论:融合基因疫苗pcDNA3/MDC-L19-VP1能诱导小鼠对CVB3VP1产生较强的特异性免疫应答,提高小鼠的生存率。 韩小艳 李小俊 王永祥关键词:柯萨奇病毒B3 基因 疫苗 免疫应答 黑果枸杞根际土样来源Salininema属菌株438HGGQ3-1~T的鉴定 2019年 采用多相分类学的方法,即通过表型、化学分类和分子分类特征,并综合系统发育分析结果,探究我国新疆库尔勒地区黑果枸杞(Lycium ruthenicum)根际土样来源菌株438HGGQ3-1T的分类学地位.结果显示:菌株438HGGQ3-1T为革兰氏染色阳性,可形成广泛分枝状营养菌丝、略带弯曲的丝状气生菌丝和末端平截的杆状分生孢子,最适生长条件为28~37℃、pH 7.0~7.5和2%~12%(质量分数)NaCl.该菌株的氧化酶活性呈阴性,过氧化氩酶活性呈阳性,以内消旋2,6-二氨基庚二酸作为特征性二氨基酸,以葡萄糖和核糖作为特征性全细胞糖,细胞磷脂包含磷脂酰乙醇胺、二磷脂酰甘油、磷脂酰甘油、磷脂酰肌醇甘露糖苷、磷脂酰肌醇和2种含糖的磷脂,主要的甲基萘醌为MK-10(H4)、MK-9(H4)和MK-10(H2),主要脂肪酸为anteiso-C17:0、anteiso-C15:0和iso-C16:0.菌株438HGGQ3-1T与糖霉菌科Salininema proteolyticum Miq-4T、Paraglycomyces xinjiangensis TRM 49201T和Salilacibacter albus J11Y309T同源性较高,对应的16SrRNA基因序列相似度分别为99.79%,99.67%和96.00%,与S.proteolyticumIBRC-M 10908T和P.xinjiangensis CCTCC AA 2013002T的DNA-DNA杂交值均高于70%.综上分析表明菌株438HGGQ3-1T为S.proteolyticum. 刘国强 阿尔新.哈布丁 李小俊 孙承航 郑勇 旭格拉.哈布丁关键词:嗜盐放线菌 黑果枸杞 生防菌菌株A的摇瓶培养条件及发酵工艺 被引量:4 2009年 [目的]优化生防菌菌株A的培养条件与液体发酵工艺。[方法]采用均匀试验设计方法、回归分析方法和分批补料发酵工艺,研究生防菌菌株A的培养条件与液体发酵工艺的优化。[结果]结果表明,适合菌株A摇瓶培养的最佳条件为:培养温度35℃,摇瓶装量12%,接种量3.0%,初始pH值7.2。20 L发酵罐分批补料发酵参数为:种子培养基为YDC培养基,培养时间24 h,接种量3.0%;发酵培养基:葡萄糖1.0%,酵母膏1.0%,CaCO31.0%,pH值7.2;流加培养基:葡萄糖1.5%,酵母膏0.5%,制成混合液一起流加,发酵8 h开始流加;发酵周期(34±2)h,在以上发酵条件下,发酵液芽孢浓度达(3.410±0.151)×109cfu/m l。[结论]该试验条件下所获得发酵液芽孢数浓度较高,可用于进一步制备生防菌剂。 李小俊 陈颖 贾宇 王立安关键词:发酵参数 生防菌 玉米小斑病菌