杨彦
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
- 供职机构：空军总医院更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- shTNFR75在酵母细胞中分泌表达及表达产物的活性分析
- 2001年
- 赵显玲刘丽刘立忠石缨谢宝树王烨杨彦冷爱军曹颖
- 关键词：酵母细胞细胞因子分泌表达
- 靶向表达TNFR75的逆转录病毒载体的构建及其产毒细胞系的建立被引量：1
- 2001年
- 将编码人 TNFR75的 c RNA与血管内皮细胞特异性启动子 (KDRp)及缺失自身启动子的逆转录病毒载体 p LXSN- D2 99重组 .重组质粒 p LXSN- D2 99- KDRp- TNFR75与脂质体共转染包装细胞 PA31 7,经抗生素 G41 8(60 0 mg/L)筛选 1 4d,获得 1 5个稳定的产病毒细胞克隆 .将各细胞克隆分别扩大培养收集所产病毒上清 ,并感染 NIH3T3细胞检测病毒滴度 ,其中 1个克隆滴度达 2×1 0 5CFU/ml.提取该克隆细胞总 RNA进行 RT- PCR分析 ,获得的 c DNA片段长度与目的基因一致 .结果提示 ,建立了 TNFR75反转录病毒产毒细胞系 .
- 孙晓文刘丽石缨刘立忠谢宝树王烨杨彦冷爱军曹颖
- 关键词：肿瘤坏死因子受体逆转录病毒基因载体建系
- PSP94-TNFαD11a融合基因在NIH3T3细胞中的表达及其产物活性分析被引量：2
- 2001年
- 为了分析 PSP94- TNFαD1 1 a融合基因的表达和表达产物的生物学活性 ,将含该融合基因的质粒 pc DNA- PSP94- TNFα D1 1 a转染 NIH3T3细胞 ,72 h后收集细胞培养上清 ,并提取细胞总RNA,经 RT- PCR,得到与目的基因长度相符合的 c DNA片段 ;以 PSP94c DNA为探针 ,对 RT-PCR产物进行 Southern印迹分析 .结果表明 :转染 PSP94- TNFαD1 1 a融合基因的 NIH3T3细胞 ,其 RT- PCR产物杂交信号为阳性 .细胞培养上清用 TNF抗体行 Western印迹和 ELISA分析 ,检测结果为阳性 .生物学活性分析表明 ,细胞培养上清不仅具有 PSP94抑制人前列腺癌细胞 PC- 3生长的活性 ,而且显示出 TNFα对 L92 9细胞的细胞毒作用 .以上结果表明 ,pc DNA- PSP94- TNFαD1 1 a质粒能够正确表达目的基因 PSP94- TNFα D1 1 a,且表达的 PSP94- TNFαD1 1 a融合蛋白具有预期的双重生物学活性 .
- 刘庆鑫刘丽石缨刘立忠王烨杨彦曹颖
- 关键词：融合基因表达活性前列腺癌
- 新型人肿瘤坏死因子基因在血管内皮细胞中的靶向表达被引量：7
- 2001年
- 目的探索一条肿瘤特异性基因治疗的新途径。方法将新型人 TNF- α D11a基因和 KDR特异性启动子插入到 3’L TR缺失 2 99bp的逆转录病毒载体 p L XSN中 ,构建成 p L XSN- D2 99- KDRp- TNF- α D11a重组逆转录病毒载体 ,使目的基因转录受 KDR启动子驱动。通过脂质体介导将该重组载体转染 PA317包装细胞 ,并用病毒上清感染血管内皮细胞和NIH3T3细胞。分别经 EL ISA和 MTT法测定 TNF- α D11a在血管内皮细胞中的表达及其生物学活性。结果成功构建了携带 TNF- α D11a和 KDR启动子的逆转录病毒载体 ,TNF- α D11a在血管内皮细胞中的表达水平及细胞增殖抑制作用均高于NIH3T3细胞。结论 KDR启动子可使外源 TNF-
- 石缨肖畅赵显玲王烨刘丽朱迅刘立忠谢宝树冷爱军杨彦曹颖
- 关键词：TNF-Α逆转录病毒载体靶向表达基因治疗
