杨林
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- R31L TNF-α突变体重组质粒的构建、真核表达及其产物的胞毒效应被引量：1
- 2008年
- 目的:研究膜型、分泌型TNF-α的31位氨基酸在其生物学效应中的作用,进一步探讨TNF-α结构与生物学效应的关系。方法:采用重叠PCR方法将wt TNF-α31位精氨酸(R)密码子(CGC)定点突变替换成亮氨酸(L)密码子(CTC),构建R31L TNF-α-pcDNA3.0重组质粒,经酶切、PCR及DNA测序鉴定后,采用脂质体转染法将其瞬时转染COS-7细胞进行表达,通过MTT法检测R31LTNF-α突变体的胞毒效应。结果:酶切、PCR及测序鉴定证实目的基因R31LTNF-α正确连接到pcDNA3.0的多克隆位点;TNF-α31位突变可增强sTNF-α的胞毒效应,突变体的CC50值是野生型的1/10,而对mTNF-α的生物学效应无明显影响。结论:本实验成功地构建了R31L TNF-α-pcDNA3.0重组质粒,且在真核细胞COS-7中获得表达;TNF-α31位置换成亮氨酸后,主要增强其分泌型分子的胞毒效应,而对其膜分子无作用。
- 刘丽丽万琳尹丙姣杨林曾庆岭李清芬李卓娅
- 关键词：分泌型TNF-Α定点突变
- Statins对VLDL受体两种亚型表达的影响
- 2007年
- 目的探讨Statins类药物对极低密度脂蛋白受体(VLDLR)两种亚型表达的影响。方法在体外,用一定浓度的Statins与中低分化胃腺癌细胞株SGC7901温育不同时间,在体内用一定剂量的他汀类药物喂饲兔不同时间后,采用RT-PCR和Western免疫印迹技术检测VLDLR两种亚型mRNA和蛋白质的表达变化。结果Statins均可上调SGC7901和脂肪组织中VLDLR两型mRNA及蛋白质的表达,心肌和骨骼肌中则未发现明显的表达变化。结论St-atins可能通过上调兔脂肪组织VLDLR的表达来清除血中甘油三酯。
- 杨林田俊刘志国杨璞宗义强屈伸
- 关键词：他汀类药物极低密度脂蛋白受体动脉粥样硬化
- 肿瘤坏死因子Ⅰ型受体封闭肽-Fc融合蛋白对肥胖大鼠胰岛素抵抗的影响
- 目的:探讨特异性阻断肿瘤坏死因子Ⅰ型受体(TNFR1)是否改善高糖高脂饮食引起的胰岛素抵抗。方法:建立稳定表达TNFR1阻断肽(TNFR1BP)和Fc融合蛋白(TNFR1BP-FC)的CHO细胞系,纯化真核细胞表达的融合...
- 梁慧芳黄丽霞朱建华杨林张述李清芬李卓娅
- 文献传递
- 肿瘤坏死因子Ⅰ型受体封闭肽-Fc融合蛋白对大鼠胰岛素抵抗的影响
- 建立稳定转染TNFR1封闭肽-IgG1Fc段的真核分泌型表达载体pIg的细胞株CHO, 收集培养上清并纯化TNFR1封闭肽—IgG1Fc融合蛋白(TNFR1BP:Fc)。体外实验证实该融合蛋白可与L929细胞上的YNFR...
- 梁慧芳黄丽霞朱建华杨林张述李清芬李卓娅
- 文献传递
